Диссертация (1151583), страница 32
Текст из файла (страница 32)
70).В мелком (первичном) лимфоидном узелке селезѐнки животныхтретьей опытной группы («Гамавит») разделений на зоны реактивногоцентра, мантийной, маргинальной и периартериальной не выявлено. Диаметрцентральной артерии в узелке увеличивался на 31,2% (р≤0,001), а толщина еѐстенки – на 14,7% (р≤0,05) в сравнение с показателями первой группы(стресс).19465000600005500050000450004000035000300002500020000150001000050000ΙΙΙΙΙΙ"Гамавит"ΙVСтрессРис. 70 – Площади зон (мкм2) среднего лимфоидного узелка селезѐнкисамцов кроликов первой (стресс) и третьей («Гамавит») опытных групп: Ι –периартериальная зона; ΙΙ – реактивный центр; ΙΙΙ – мантийная зона; VΙ –маргинальная зонаПлазмоциты периартериальной зоны крупных лимфоидных узелковселезѐнкикроликовпривоздействиипрепарата«Гамавит»хорошодифференцированы, содержание РНК в их ядрышках и цитоплазмеповышено в сравнении с таковым при стресс-реакции.На ультратонких срезах селезѐнки животных, находящихся в условияхиндуцированного стресса и под воздействием препарата «Гамавит», вреактивном центре лимфоидного узелка выявлялись лимфоциты илимфобласты.
Лимфоциты располагались, плотно прилегая друг другу(рис. 71). Их ядра светлые, округлые с неровными краями, в кариоплазмепревалирует эухроматин. В узком ободке цитоплазмы, окружающей ядро,содержались крупные овальной формы митохондрии, с сохранѐннойструктурой крист. У лимфобластов ядра тѐмные, с инвагинациями, вкариоплазме преобладает гетерохроматин.
В кариолемме выраженасветлая перинуклеарная зона и множество перехватов.195В периартериальной зоне выявлялись лимфоциты и интердигитальныеклетки ретикулярной стромы, стимулирующие бласттрансформацию ипролиферацию лимфоцитов. В ядрах лимфоцитов располагался диффузноэухроматин, выражены ядрышки, архитектоника которых представленафибриллярным и гранулярным компонентами. В цитоплазме одиночно игруппами размещались крупные митохондрии с выраженными кристами.Ядра интердигитальных клеток базофильные, насыщены гетерохроматином.12131АБРис.
71 – Электронограмма ультратонкого среза селезѐнки самцов кроликовтретьей группы («Гамавит»). Ув. х 5800 (А), х 7200 (Б). А – реактивныйцентр; Б – периартериальная зона: 1 – лимфоциты; 2 – лимфобласт; 3 – ядроинтердигитальной клеткиВ красной пульпе выявляли активные макрофаги, между которымиобнаружены плотные и десмосомные контакты. Ядра макрофагов светлые спреобладанием диффузного хроматина, рельеф кариолеммы извилистый синвагинациями.
По всему объѐму их цитоплазмы расположены: митохондриис электронно-плотным матриксом и сохраненной структурой крипт, короткиеканальцы эндоплазматической сети, пиноцитозные везикулы, гранулыгемосидерина, фагосомы с фрагментами эритроцитов (рис. 72, А).1962284113А56Б7Рис. 72 – Электронограмма ультратонкого среза селезѐнки самцов кроликовтретьей группы («Гамавит»). Ув. х 7200 (А, Б). А, Б – красная пульпа: 1 –макрофаги; 2 – эритроциты; 3 – фрагменты эритроцитов; 4 – зѐрнагемосидерина; 5 – эндотелиальная клетка; 6 – миоциты; 7 – контакт миоцитас эндотелиоцитом; 8 – лимфоцитПри воздействии препарата «Гамавит» в селезѐнке отмечали измененияструктур микроциркуляторного русла стромы, как признаков реактивнойактивизации транскапиллярного обмена. После выхода из белой пульпыартериола отдаѐт несколько коротких прекапиллярных артериол (мышечныхжомов),внутренняявыстилкакоторыхобразованаэндотелиальнымиклетками, на базальной мембране плотно расположены гладкомышечныеклетки.Вбазальноймембранеэндотелиявыявленыперфорации,обеспечивающие контакт эндотелиоцита с миоцитом, при котором последнийполучает информацию о поступлении веществ, вызывающих их сокращение(рис.
72, Б)В петлях ретикулиновых волокон пульпарных тяжей селезѐнкивстречаются лимфоциты и плазмоциты. Лимфоциты с овальными ядрами, вкариоплазме преобладает диффузный гетерохроматин. В малом объѐме ихцитоплазмы располагались единичные митохондрии, короткие канальцаэндоплазматической сети.
Плазмоцит с тѐмным ядром неправильной формы,в кариоплазме преобладает гранулярный гетерохроматин, а в цитоплазме большое количество гранул, единичные митохондрии с выраженными197кристами.Впульпарныхтяжахзавершаетсяцитодифференцировкаплазмоцитов, а лимфоциты здесь могут формировать новые лимфоидныеузелки (рис. 73).В синусе красной пульпы эндотелиоциты расположены на прерывистойбазальной мембране, их ядра веретеновидной формы с преобладаниемэухроматина. На поверхности синуса ретикулярные волокна и отросткиретикулярных клеток формируют сеть.
В просвете синуса лейкоциты сядрами округлой и неправильной формы, содержащие перихроматиновыегранулы, с преобладанием диффузного гетерохроматина. В кариолеммезаметны тонкая полоска перинуклеарного пространства и поры (рис. 73).В цитоплазме лейкоцитов расположены единичные митохондрии безструктурных аберраций, везикулы.8228411563А5БВ7Рис. 73 – Электронограмма ультратонкого среза селезѐнки самцов кроликовтретьей опытной группы («Гамавит»). Красная пульпа. Ув. х 7200 (А, Б, В): 1– лимфобласт; 2 –лимфоцит (плазмоцит); 3 – ретикулярные волокна; 4 –эритроцит; 5 – отростки перицитов; 6 – перицит; 7 – эфферентные нервныеокончания; 8 – отростки эндотелиоцита; 9 – лизосомы и везикулыЛимфоциты, располагающиеся в красной пульпе вблизи капилляров игрупп эритроцитов, выполняют функцию «распознавания» физиологическойспецифичности эритроцита.
Их ядро овальной формы, с преобладанием198эухроматина,цитоплазмаввидетонкойполоски,сединичнымимитохондриями.В красной пульпе встречаются гемокапилляры с выраженнымиэндотелиоперицитарными контактами, особенностью морфологии которыхявляется то, что в этих участках цитолеммы эндотелиоцита и перицитаистончены и прерывисты. В эндотелиоците овальное ядро, с прилегающим ккариолемме гетерохроматином, в цитоплазме единичные митохондрии.Рядом с поверхностью эндотелиоцита обнаруживаются пиноцитозныепузырьки. Перицит представлен крупным ядром овально-вытянутой формы,в котором обнаруживаются перихроматиновые гранулы, в цитоплазмеединичные митохондрии, в них структура крист сглажена. На цитолеммеперицита визуализируются терминали эфферентных нервных окончаний(рис.73, В).Втрабекулярномаппаратестромывыявлялисьфункциональноактивные фибробласты со светлыми овальными ядрами, содержащимиядрышки, представленные фибриллярным и гранулярными компонентами(рис.
74, А). В цитоплазме фибробластов митохондрии и эндоплазматическаясеть расположены диффузно, структуры крипт сохранены, комплекс Гольджипредставлен цистернами. Вокруг клеток локализовались пучки коллагеновыхволокон, между которыми обнаруживались нервные волокна. Миоцитытрабекул имеют ядро вытянутой формы, с преобладанием эухроматина, вцитоплазмеэлектронноплотныетельца–местаприкреплениямиофиламентов к цитолемме. На плазмолемме гладких мышечных клетоктрабекул располагались терминалии нервных окончанийВ красной пульпе между отростками ретикулярных клеток в петляхретикулиновых волокон выявлялись эритроциты и макрофаги в начальнойстадии фагоцитоза.
Ядро макрофага овально-округлой формы с неровнымиконтурами и многочисленными инвагинациями, в центральной частикариоплазмы рассеянный гетерохроматин и образующий крупные глыбки по199периферии. Вокруг макрофага плотно расположены эритроциты, некоторыеиз них на стадии эритрофагии (рис.
74,Б).Макрофагистромыселезѐнкинаходилисьвактивнойформе,цитолемма образовывала длинные микровыросты, в цитоплазме которыхвыявлялись первичные и вторичные лизосомы, пиноцитозные пузырьки,профили эндоплазматической сети, фрагменты эритроцитов. По всейцитоплазме визуализировались зерна гемосидерина. Митохондрии редкие,средней величины, округлой формы, с выраженными кристами, в основном,локализовались непосредственно рядом с ядром (рис. 74, В).759514а015630810А2БВ0017Рис.
74 – Электронограмма ультратонкого среза селезѐнки самцов1 кроликовтретьей опытной группы («Гамавит»). Красная пульпа. Ув. х 7200 (А, Б, В):1 – фибробласты; 2 – миоцит; 3 – терминалии нервных окончаний; 4 –нервное волокно; 5 – пучки ретикулярных волокон; 6 – ядро макрофага; 7 –эритроциты и их фрагменты; 8 – вторичные лизосомы; 9 – гранулыгемосидеринаИсследования гематологических показателей крови самцов кроликовпоказали, что препарат «Гамавит» инициировал снижение численностиэритроцитов и общих лейкоцитов в крови соответственно на 31,5 (р≤0,001) и9,4% (р≤0,05) и незначительное снижение количества агранулярныхлейкоцитов – на 2,9% по отношению к стрессу (табл. 11).200Таблица 11 – Гематологические показатели самцов кроликов первой (стресс)и третьей («Гамавит») опытных группПоказатели кровиГруппыЭритроциHb,СодержаниеОбщиеАгранулярживотныхты,г/лHb влейкоциты,ные12910 /лэритроците,10 /ллейкоциты,(пк)10 9/лСтресс9,51±117,47±12,36±8,41±3,80±0,1001,8320,2930,2100,09«Гама6,51±112,79±17,33±7,62±3,69±вит»0,1502,1640,2490,1080,066*******Примечание: * – р≤0,05; *** – р≤0,001, по сравнению с первой опытной группой(стресс)Уровень гемоглобина в крови понижался на 4,0%, его среднеесодержание (MCH) в эритроците составляло 17,33±0,249 пк, что было вышена 40,2% (р≤0,001) данных значений крови животных, находившихся вусловиях индуцированного стресса.Анализ биохимических показателей сыворотки крови показал, чтоиспользование препарата «Гамавит» увеличивало концентрацию общегобелка (57,30±0,193 г/л) в сыворотке крови на 9,5% (р≤0,001), повышалосодержаниебелковальбуминовойфракциина6,3%(р≤0,001),аглобулиновой: α, – понижало на 1,2%, β и γ – увеличивало на 10,4% (р≤0,01)и на 21,9% (р≤0,001) соответственно, по отношению к стрессу.Содержание в сыворотке крови животных кальция составляло2,53±0,028 ммоль/л, что на 36,0% (р≤0,001) выше, чем в первой группе(стресс), концентрации фосфора – 1,87±0,020 ммоль/л, что ниже на 12,6%(р≤0,05) по отношению к стрессу.
Концентрация щелочной фосфатазы,ферментов АсАТ и АлАТ повышалась на 12,4; на 3,6 и 16,7% (р≤0,05)соответственно, по отношению к первой группе (стресс). Уровень ферментовАсАТ (0,58±0,024 ммоль/л) был выше на 18,4% по сравнению сконцентрацией АлАТ (0,49±0,012 ммоль/л), что привело к понижению201показателя коэффициента Де Ритиса (1,18±0,032) на 10,6% (р≤0,05)относительно стресса.Концентрация глюкозы в сыворотке крови животных при применениипрепарата «Гамавит» составляла 7,03±0,317 ммоль/л, что ниже на 26,0%(р≤0,01), чем при индуцированном стрессе (9,50±0,57 ммоль/л). При этомизменялся гормональный фон самцов кроликов, понижалось содержаниекортизола в сыворотке крови на 9,7% (р≤0,05), тогда как уровень ДГЭА-С –повышался на 40,0% (р≤0,01), хотя по отношению к контролю концентрациякортизола была выше на 28,0% (р≤0,01), а ДГЭА-С – на 6,1%.Парным корреляционным анализом при воздействии препарата«Гамавит» на организм самцов кроликов, находившихся в индуцированномстрессе,выявленовзаимосвязейувеличениелимфоидныхобщегообразованийколичествабелойположительныхпульпыселезѐнкисгематологическими показателями (187) относительно их показателей пристрессе (146) (прил., табл.