Диссертация (1151583), страница 28
Текст из файла (страница 28)
52).166Рис. 52 – Площадь (мкм2) лимфоидных узелков селезѐнки самцов кроликовконтрольной и первой опытной групп (стресс)Вусловияхиндуцированногострессавыявленахарактернаягистоархитектоника лимфоидных структур селезенки кроликов: так, вкрупном лимфоидном узелке диаметр центральной артерии увеличивалсянезначительно (на 3,6%), тогда как толщина ее стенки достоверно (р≤0,001)возрастала на 58,4%. Площадь периартериальной зоны достоверно (р≤0,001)увеличивалась в 2,1 раза, реактивного центра, мантийной и маргинальной зонуменьшалась – в 1,7; 1,7 и в 1,3 раза соответственно (рис. 53).200000180000160000140000120000100000800006000040000200000ΙΙΙΙΙΙконтрольΙVстрессРис.
53 – Площади зон (мкм2) крупного лимфоидного узелка селезѐнкикроликов контрольной и первой опытной групп: Ι – периартериальная зона; ΙΙ– реактивный центр; ΙΙΙ – мантийная зона; VΙ – маргинальная зона167Всреднемлимфоидномузелкедиаметрцентральнойартерииувеличивался на 22,4% и толщина еѐ стенки – на 49,2%. Площадьпериартериальной зоны достоверно (р≤0,001) увеличивалась в 2,3 раза;реактивного центра, мантийной и маргинальной зон – уменьшалась в 1,5; 1,5и 1,7 раза соответственно в сравнении с контролем (рис.
54 ).9000080000700006000050000400003000020000100000ΙΙΙΙΙΙконтрольΙVстрессРис. 54 – Площади зон (мкм2) среднего лимфоидного узелка селезѐнкикроликов контрольной и первой опытной групп: Ι – периартериальная зона; ΙΙ– реактивный центр; ΙΙΙ – мантийная зона; VΙ – маргинальная зонаВ мелком (первичном) лимфоидном узелке селезѐнки животныхконтрольной ипервой опытной групп разделений на зоны реактивногоцентра, мантийной, маргинальной и периартериальной не выявлено.
Диаметрцентральной артерии в узелке снижался на 19,2%, а толщина еѐ стенки – на31,8% (р≤0,001) в сравнении с контрольными показателями.В селезѐнке кроликов первой опытной группы ретикулоциты иплазмоцитыпериартериальныхзонлимфоидныхузелковслабодифференцированы, в них выявляются «следы» PAS-позитивных субстратов.Цитоплазма плазмоцитов слабобазофильна, содержание РНК в ядрышкахснижено (слабая пиронинофилия).На ультратонких срезах селезѐнки животных контрольной группымакрофаги имели овально-округлое, крупное, амблиохроматичное ядро с168преобладанием эухроматина, локализованного по периферии, с хорошовыраженными ядрышками, в цитоплазме выявлялись органоиды ЭПР,митохондрии, большое количество лизосом. У лимфобластов ядро овальное,с крупными конгломератами базиохроматина и слабозаметными просветамимежду ними. Вокруг ядра располагается светлая перинуклеарная зона.Цитоплазма лимфобласта – в виде узкого ободка, содержащая единичныеовальные митохондрии, структуры крист сглажены (рис.
55).341231АБРис. 55 – Электронограмма ультратонкого среза селезѐнки самцов кроликовконтрольной группы. Ув. х 7200 (А), х 5800 (Б): 1 – макрофаг; 2 –эритроциты; 3 – лимфобласты; 4 – отростки дендритных клеток.Субмикроскопическое строение селезѐнки кроликов при стрессеимеет отличительные морфологические особенности. Ядра макрофаговнеправильной формы, с множеством инвагинаций, с преобладаниемэухроматина,равномернорасположенноговкариоплазме,четковыраженными двумя ядрышками, зона перинуклеарного пространства невыявляется, в цитоплазме большое количество вторичных лизосом,митохондрии крупные, палочковидные, структуры крист сохранены.Цитоплазма эритроцитов неоднородная – с фрагментами ядер (рис.
56).В красной пульпе секвестрационная функция осуществляется всинусах,продолжающихся«распознаваниенаэндотелиальнымизрелость»эритроцитовтяжами,макрофагами,происходитудалениефрагментов ядер (телец Жолли, телец Гейнца, гранул железа). Ядро169лимфобластововальное,содержащеерассеянныйгетерохроматин,перенуклиарная зона не выявлена, вокруг ядра располагается светлаяцитоплазма в виде узкого ободка, с редкими, мелкими митохондриями.2113А51421БВРис. 56 – Электронограмма ультратонкого среза селезѐнки самцов кроликовпервой опытной группы (стресс).
Ув. х 7200 (А), х 5800 (Б), х 14000 (В): 1 –ядра секреторно активных макрофагов маргинальной зоны; 2 – синус сэритроцитами; 3 – лимфобласт маргинальной зоны; 4 – фибробласттрабекулы; 5 – фрагменты гибнущих эритроцитов (зерна гемосидерина) вкрасной пульпеТрабекулярный аппарат стромы органа представлен рыхлыми пучкамиволокон. Уфибробластов,ремоделирующихтрабекулярнуюсистемуселезѐнки, ядро вытянутой формы, с неровными контурами, включающеегетерохроматиновые фракции, перинуклеарное пространство не выражено, вцитоплазме мелкие митохондрии, без характерных структур крист.170В периартериальной зоне узелков множество дендритных клеток,окружающих своими отростками Т-лимфоциты, что говорит об активизациидифференцировки дендритных клеток, повышении уровня их антигенпрезентирующего потенциала в отношении Т-лимфоцитов в условияхстресса.В лимфоцитах реактивного центра узелков ядра с преобладаниемгетерохроматина, с неровными краями, структуры кариолеммы сглажены, вцитоплазме деструкция органоидов.
Малочисленные лимфобласты содержатовальное ядро с базиохроматином, перинуклеарная зона светлая, поры невыявлены. Цитоплазма лимфобласта прослеживается в виде узкого ободка,содержит единичные митохондрии, с выраженными структурами крист.Анализ гематологических характеристик крови кроликов показал, чтоуживотных,находящихсявусловияхэкспериментальногостресса,количество эритроцитов и общих лейкоцитов в крови увеличивалось на 71,9(р≤0,001) и на 13,8% (р≤0,05) соответственно, численность агранулярныхлейкоцитовснижалась на 11,6% (р≤0,05) по сравнению с контрольнойгруппой (табл. 9).Таблица 9 – Гематологические показатели самцов кроликов контрольной ипервой опытной групп (стресс)Показатели кровиГруппыЭритроциты,Hb,СодержаниеОбщиеАгрануляр12животных10 /лг/лHb влейкоциты,ные9эритроците,10 /ллейкоциты,(пк)10 9/лКонтроль5,53±105,29±19,04±7,39±4,30±0,1012,1520,0640,2290,116Стресс9,51±117,47±12,36 ±8,41±3,80±0,100***1,832*0,293***0,210*0,096*Примечание: * – р≤0,05; *** – р≤0,001, по сравнению с контрольной группойУ кроликов при стресс-реакции уровень гемоглобина в крови(117,37±2,346 г/л) повышался на 11,4% (р≤0,05) по сравнению с контролем(табл.
7), тогда как среднее содержание гемоглобина (MCH) в эритроците171составило 12,4 ±0,293 пк, что было ниже на 35,1% (р≤0,001) контрольныхзначений.Анализ биохимических характеристик сыворотки крови показал, что укроликов первой опытной группы концентрация общего белка снижалась на6,9% (р≤0,001), уменьшалось содержание белков альбуминовой фракции на5,4% (р≤0,001), а α-, β-, γ-глобулиновой – на 5,6 (р≤0,05); 6,0 (р≤0,01); 16,7%(р≤0,001) соответственно, в отношении контрольных значений.Содержание в сыворотке крови кальция у животных, находящихся вусловиях индуцированного стресса, составляло 1,86 ммоль/л, что на 28,7%(р≤0,001) было ниже контрольного значения, концентрация фосфора – 2,14ммоль/л), что выше на 16,9% (р≤0,01) по отношению к контрольнымпоказателям.
Концентрации щелочной фосфатазы, ферментов АсАТ и АлАТ,понижались на 13,1(р≤0,05), на 14,1(р≤0,05) и 22,2% (р≤0,01)соответственно, по сравнению с контролем. Уровень ферментов АсАТ(0,55±0,02 ммоль/л) был выше на 31,0% по сравнению с концентрациейАлАТ(0,42±0,01ммоль/л),чтопривелокповышениюпоказателякоэффициента Де Ритиса на 10,9% относительно контрольных значений.Концентрация глюкозы в сыворотке крови животных при стрессреакции составляла 9,50±0,29 ммоль/л, что было выше на 50,1% (р≤0,01),чем в контроле (6,33±0,18 ммоль/л). Кроме того, изменение гормональногофона самцов кроликов выразилось повышением концентрации кортизола на41,9% (р≤0,01), но понижением ДГЭА-С – на 24,2% (р≤0,01) относительноконтрольных значений.Уживотныхприиндуцированнойстресс-реакциипарнымкорреляционным анализом выявлена высокоположительная взаимосвязьплощади крупного лимфоидного узелка с концентрацией Hb в крови(r=+0,97) (прил., табл.
16). Так, уменьшение площади крупного лимфоидногоузелка прямо коррелирует со снижением концентрации Hb (r=+0,97), апоследнее – со снижением численности агранулярных лейкоцитов в крови(r=+0,83).172Площадькрупноголимфоидногоузелкауменьшаетсязасчет«истощения» площади мантийной зоны (r=+0,97) и реактивного центра(r=+0,96). Именно эти зоны лимфоидного узелка отвечают за пролиферациюВ-лимфобластов и цитодифференцировку В- и Т-лимфоцитов. При стрессепролиферация лимфобластов в реактивном центре сдерживается (r=+0,85), амиграция В- и Т-лимфоцитов в маргинальную зону и их взаимодействие вней с антигенами и макрофагами ингибируется (r=0), что подавляетпоступление макрофагов в красную пульпу селезѐнки, снижая элиминациюгибнущих эритроцитов.