Диссертация (1151583), страница 30
Текст из файла (страница 30)
Диаметрцентральной артерии в узелке увеличивался на 26,8% (р≤0,001), а толщина еѐстенки – на 18,8% (р≤0,001) в сравнении с показателями первой группы(стресс).В периартериальной зоне лимфоидных узелков селезѐнки самцовкроликовпривоздействиипрепарата180«Ронколейкин ®»хорошопросматриваются ретикулоциты и плазмоциты. Выраженная пиронинофилияв ядрышках и базофилия цитоплазмы плазмоцитов свидетельствуют оповышенном содержании РНК и интенсивном синтезе белка в них всравнении со стрессом.На ультратонких срезах селезѐнки животных второй группы (рис. 61) вмантийной зоне лимфоидного узелка лимфоциты располагались, плотноприлегая друг другу. Их цитоплазма, окружающая ядро в виде узкого ободка,содержала единичные овальные митохондрии.
Ядро округло-овальнойформы, края неровные, в кариоплазме преобладал эухроматин, гранулыгетерохроматина локализованы вблизи кариолеммы. В последней хорошовыражена светлая перинуклеарная зона.3121АБРис. 61 – Электронограмма ультратонкого среза селезѐнки самцов кроликоввторой группы («Ронколейкин ®»). Ув. х 5800 (А), х 7200 (Б). А – лимфоцитыи макрофаги мантийной зоны; Б – интердигитальные клетки и лимфоциты впериартериальной зоне: 1 – лимфоциты; 2 – ядра интердигитальных клеток; 3– макрофагиВ периартериальной зоне рядом с лимфоцитами (рис. 61)располагались интердигитальные клетки, присутствие которых косвенносвидетельствует о проходящей здесь цитодифференцировки Т-лимфоцитов.Интердигитальные клетки имеют крупное ядро неправильной формы, ихцитоплазма формирует многочисленные отростки, окружающие лимфоциты,особенностью субмикроскопии которых было наличие овоидной формы ядрас крупными гранулами гетерохроматина, в цитоплазме, расположеннойнебольшой просветленной зоной вокруг ядра, выявляются лизосомы.181Ядро гранулоцита представлено двумя сегментами округлой формы, спросветленным центром, по периферии крупные гранулы гетерохроматина, вцитоплазме обилие гранул секрета с электронноплотным содержимым,органоиды не выявлены.24121423АБВ2Рис.
62 – Электронограмма ультратонкого среза селезѐнки самцов кроликоввторой группы («Ронколейкин ®»). Красная пульпа. Ув. х 7200 (А, В), Ув. х10000 (Б): 1 – ядро макрофага; 2 – эритроциты; 3 – лимфоцит; 4 – гранулоцитМакрофаги имели крупное неправильной формы амблиохроматичноеядросмножествоминвагинацийипреобладаниемэухроматина,гетерохроматин был локализован, главным образом, по периферии ядра, зонаперинуклеарного пространства проявлялась нечетко (рис. 62).
В цитоплазмемакрофага и его псевдоподиях визуализируются: большое количествофагоцитарных вакуолей с фрагментами эритроцитов, лизосом, фагосом, атакже канальцы ЭПР, крупные палочковидные митохондрии с хорошовыраженными кристами и просветленным матриксом.В зоне реактивного центра дифференцирующийся плазмоцит сэксцентричным ядром овальной формы, вокруг него прослеживаютсяпросветленные участки цитоплазмы, в которой видны многочисленныеканальцы ЭПР, скопления гранул включений (рис.
63). В маргинальной зонев составе стенки синусоидного капилляра тонкая базальная пластинка с182микропорами,широкийэндотелиальныйслой,содержащиемикропиноцитозные везикулы. Ядро эндотелиоцита овальной формы, в егоцитоплазмехорошомножественныекапилляра–выявляетсяпиноцитозныелимфоцитсагранулярныйпузырьки.ВпросветленнойЭПР,присутствуютпросветесинусоидногоцитоплазмойиредкимимитохондриями.ба1а2131б5АБ4Рис. 63 – Электронограмма ультратонкого среза селезѐнки самцов кроликоввторой группы («Ронколейкин ®»). Ув. х 7200. А – реактивный центр; Б –маргинальная зона: 1 – лимфоцит и лимфобласт; 2 – плазмоцит; 3 –дендроцит; 4 – капсулированное нервное окончание; 5 – синусоидныйкапилляр, а, б – микропорыТрабекулярныйаппаратоднонаправленнымипучкамибелоксинтезирующийаппаратстромыволокон.всВсостояниихорошовыраженнымицитоплазмефибробластасекреторнойактивности,митохондрии небольшого размера, с выраженными структурами крипт,диффузно располагались рядом с ядром.
Ядро фибробласта характерновытянутой формы, с неровными контурами, гетерохроматиновые фракциирасполагались в большей степени по его периферии, перинуклеарноепространство слабо выражено (рис. 64).1834213АБРис. 64 – Электронограмма ультратонкого среза селезѐнки самцов кроликоввторой группы («Ронколейкин ®»). Ув. х 7200 (А), х 10000 (Б). А – трабекула сфибробластом; Б – гранулоцит в красной пульпе: 1 – фибробласт; 2 –коллагеновые волокна; 3 – гранулоцит; 4 – лимфоцитВ красной пульпе, в цитоплазме выявленного гранулоцита, редкиекрупные митохондрии с хорошо выраженными кристами и множествовакуолей с электроннонеплотным содержимым, что, вероятно, обусловленоразличной степенью их (зрелости исостояния.Егоядронасыщеноактивности) функциональногогетерохроматином,перинуклеарноепространство и ядерные поры хорошо выражены (рис.
65).В реактивном центре присутствие дендритных клеток, отросткикоторыхплотноконтактируютсплазмолеммойлимфоцитов,чтоопосредованно, свидетельствует об их активной антигенпрезентативнойфункции в отношении клеток костного кроветворного дифферона. Хорошовыраженыбазофильныеядрапролиферирующихлимфобластовспреобладанием гетерохроматина и слабовыраженным перинуклеарнымпространством.
В цитоплазме лимфобласта органоиды представленыредкими округлой формы митохондриями (рис. 65). Гранулоцит имеетнесколько фрагментов ядра с множественными включениями в цитоплазме.184231АБРис. 65 – Электронограмма ультратонкого среза селезѐнки самцов кроликоввторой группы («Ронколейкин®»). Ув. х 5200 (А), х 10000 (Б), А –реактивный центр: 1 – лимфобласты; 2 – отростки дендритных клеток; 3 –дендроцит.Исследования гематологических показателей кроликов показали, чтопрепарат «Ронколейкин®» инициировал снижение численности эритроцитови общих лейкоцитов в крови соответственно на 38,7 (р≤0,001) и на 16,2%(р≤0,01), увеличение количества агранулярных лейкоцитов на 4,7% (р≤0,05)по отношению к стрессу (табл.
10).Таблица 10 – Гематологические показатели самцов кроликов первой (стресс)и второй («Ронколейкин®») опытных групп.ГруппыживотныхСтресс«Ронколейкин®»Эритроциты,1012/лHb,г/л9,51±0,1005,83±0,119***117,47±1,832103,76±2,662*Показатели кровиСодержаниеОбщиеHb влейкоциты,эритроците,10 9/л(пк)12,36±8,41±0,2930,21017,80±7,05±0,1900,108*****Агранулярныелейкоциты,10 9/л3,80±0,093,98±0,065*Примечание: * – р≤0,05; ** – р≤0,01; *** – р≤0,001, по сравнению с первой опытнойгруппой (стресс)185Уровень гемоглобина в крови понижался на 11,7% (р≤0,05), его среднеесодержание (MCH) в эритроците составляло 17,80 ±0,190 пк, что было вышена 44,0% (р≤0,001) данных значений крови животных, находившихся вусловиях индуцированного стресса.Анализ биохимических характеристик сыворотки крови показал, чтоиспользованиепрепарата«Ронколейкин ®»увеличивалоконцентрациюобщего белка (61,05±0,184 г/л) на 16,7% (р≤0,001), содержание белковальбуминовой фракции – на 1,4% (р≤0,05), а глобулиновой: α – на 2,5%, β –на 11,1% (р≤0,01) и γ – на 29,0% (р≤0,001) соответственно по отношению кстрессу.Содержание в сыворотки крови животных кальция составляло2,71±0,031 ммоль/л, что на 45,7% (р≤0,001) было выше, чем в первой группе(стресс), концентрация фосфора – 1,98±0,023 ммоль/л, что было ниже на7,5% по отношению к стрессу.
Концентрация щелочной фосфатазы,ферментов АсАТ и АлАТ повышалась на 15,6; на 1,1 и на 23,8% (р≤0,01)соответственно. Уровень ферментов АсАТ (0,60±0,033 ммоль/л) был выше на15,4% по сравнению с концентрацией АлАТ (0,52±0,014 ммоль/л), чтопривело к понижению показателя коэффициента Де Ритиса (1,15±0,032) на12,9% (р≤0,01) по отношению к стрессу.Концентрация глюкозы в сыворотке крови животных при применениипрепарата «Ронколейкин®» составляла 7,33±0,296 ммоль/л, что ниже на22,8% (р≤0,01), чем при стрессе (9,50±0,570 ммоль/л). Кроме того, изменялсягормональный фон самцов кроликов, концентрация кортизола в сывороткекрови понижалась на 14,4% (р≤0,01), тогда как уровень ДГЭА-С повышалсяна 28,0% (р≤0,01) относительно стресса.Парным корреляционным анализом при воздействии препарата«Ронколейкин®» на организм самцов кроликов на фоне индуцированногострессавыявленовзаимосвязейувеличениелимфоидныхобщегообразованийколичествабелойположительныхпульпыселезѐнкисгематологическими показателями (202) относительно их показателей при186стрессе(146),всеони100%положительны.Отмечаетсявысоко-положительная взаимосвязь площади крупного лимфоидного узелка сконцентрацией Hb в крови (r=+0,98) (прил., табл.
17). Увеличение площадикрупноголимфоидногоузелкапрямокоррелируетсоснижениемконцентрации гемоглобина (r=+0,98), численности эритроцитов (r=+0,97),общих лейкоцитов (r=+0,98) и с повышением численности агранулярныхлейкоцитов (r=+0,85) в крови.Увеличениеплощадикрупноголимфоидногоузелкапрямокоррелирует с увеличением площади реактивного центра (r=+0,88) имантийной зоны (r=+0,85) – за счет повышения численности агранулярныхлейкоцитов (r=+0,85). Периартериальная зона высоковзаимосвязана сплощадью центральной артерии (r=+0,97), реактивным центром (r=+0,94),мантийной зоной (r=+0,97), миграции в неѐ лейкоцитов (r=+0,89), а также ихвыброс в синусы мантийной зоны (r=+0,86).
При этом миграцияагранулярных лейкоцитов в маргинальную зону снижается (r=0,68),нормализуя в ней взаимодействие последних с антигенами и макрофагами(при стрессе r=0), что стабилизирует процесс элиминации гибнущихэритроцитов.Увеличение площади среднего лимфоидного узелка прямо коррелируетс изменением площади крупного узелка (r=+0,77), а также с динамикойплощади своей периартериальной зоны (r=+0,83), реактивного центра(r=+0,88) и площади мантийной зоны (r=+0,93), равно как и в крупномлимфоидном узелке, что свидетельствует об однонаправленности процессовв этих зонах.