Диссертация (1151466), страница 9
Текст из файла (страница 9)
Показатель абсорбцииобратно пропорционален количеству трийодтиронина впробе.Т3 свободный,Метод твердофазного иммуноферментного анализа (ИФА).пмоль/л;Т4 общий, нмоль/л1501Т4 свободный,пмоль/лТТГ, мМЕ/лЛизоцим, мкг/млБАСК, %2)зоотехнические,2ИФА. Метод основан на ферментном иммуноанализе, воснове которого лежит конкуренция немеченных имеченных ферментом антигенов за определенное количествоантигенсвязывающих участков антител. Количествофермент-меченых антигенов, связавшихся с антителами,обратно пропорционально концентрации немеченыхантигенов исследуемого образца. Показатель абсорбцииобратно пропорционален количеству тироксина в пробе.Метод твердофазного ИФА. Определение тиреотропинаоснованонаэнзимсвязанномодношаговомсендвичеподобном иммуноанализе.
Стандарты, контроли иисследуемые образцы сыворотки крови инкубируют вмикротитрационных ячейках, покрытых антит-чТТГантителами с другими антит-чТТГ-антителами, меченнымиэнзимами пероксидазы хрена (ПХ). После промыванияячейки инкубируют с субстратом тетраметилбензидина,добавляют кислотный стоп-раствор и определяют степеньэнзимного оборота субстрата путем измерения абсорбциипри двойном излучении на длине волны 450 и 620 нм.Показатели абсорбции исследуемых образцов прямопропорциональны концентрации ТТГ в пробе.Метод основан на способности лизоцима растворятьсмешанные в агаре Дифко ацетоновый порошок изклеточных оболочек тест-культуры Microccocus lysodecticus.Степеньлитическойактивности(концентрации)определяется путем измерения зон лизиса вокруг лунки вагаре, в которую был внесен исследуемый биоматериал(сыворотка крови).Метод основан на измерении оптической плотностимясопептонного бульона при росте в нем E.coli сдобавлением и без добавления испытуемой сывороткикрови.которыевключаютфизиологическиекритерии,отражающие физиологическую полноценность цыплят (Орлов М.В., 1987;Отрыганьев Г.К., Отрыганьева А.Ф., 1982).-длина эмбрионов на 2-е, 4-е, 8-е, 12-е и 16-е сутки инкубации и цыплятсуточного возраста, большой и малый диаметр сосудистого поля, количествососудов, идущих от эмбриона на 4-е сутки инкубации, овоскопия яиц на 11-есутки инкубации; отходы инкубации: неоплодотворенные яйца, кровяные51кольца, замершие, задохлики, слабые.Большой, малый диаметр сосудистого поля и длину эмбрионов измерялиштангенциркулем с точностью до 0,1 см.
Длину суточного цыпленка измерялиот кончика клюва до кончика среднего пальца с точностью до 0,1 см.– выводимость яиц - количество выведенного здорового молодняка впроцентах от числа оплодотворенных яиц; вывод цыплят – количествовыведенного здорового молодняка в процентах от числа заложенных наинкубацию яиц;- интенсивность вывода цыплят определяли после начала вывода поколичеству вылупившихся цыплят через равные промежутки времени;-сохранностьпоголовьяучитывалипутемежедневнойоценкифизиологического состояния птицы;-динамика живой массы цыплят за 2 месяца выращивания в клеточныхбатареях;- живая масса и масса внутренних органов цыплят суточного возраста(остаточный желток, сердце, легкие, печень, желудки мышечный ижелезистый, селезенка, Фабрициева сумка) - взвешивание с точностью до0,001 г.- измерение ректальной температуры проводили медицинским электроннымтермометром (B.
WELL, WT-04 STANDART); температуру кожи под крыломизмеряли инфракрасным термометром (AND DT-635).-индивидуальная оценка цыплят суточного возраста (табл. 5) по критериямкачества шкалы «Пасгар» и «Оптистарт». Особям хорошего качестваприсуждали 10 баллов, при наличии дефектов вычитали по одному-два баллаза каждое отклонение от нормы [37]. Описание отклонений показателейкачества цыплят от нормы: рефлекс поведения – цыплятам требуется более 2с для переворота со спины на ноги; пупочное кольцо кровоточащее,расширенное, струпик более 2,5 мм; плюсны и пальцы - красные, коготкивздуты; клюв – мягкий, узкий, искривленный (уродства), наличие красныхпятен у основания, ноздри забиты белком; большой и уплотненный живот;52мышечный тонус шеи – в положении «провис головой вниз» особь неподнимает голову.Таблица 5 - Критерии качества цыплят суточного возраста по шкалам «Пасгар» и«Оптистарт» (Епимахова М.Э., 2013)10-балльная шкала «Пасгар»10-балльная шкала «Оптистарт»Рефлекс поведенияПупочное кольцоКлювЖивотПлюсны и пальцыМышечный тонус шеи3) экономические показатели - по методике определения экономическойэффективности ветеринарных мероприятий (составители: Шатохин Ю.Е.,Никитин И.Н., Чулков П.А., Воскобойник В.Ф., 1997).Полученный в ходе экспериментов цифровой материал подвергалистатистической обработке с помощью критерия Стьюдента с использованиемпрограммы Microsoft Excel.
Результаты считали достоверными при p≤0,05 (*р<0,05; **- р<0,01; ***- р<0,001).Материалы для исследования:инкубационные яйца от кур яичного кросса «Шейвер 2000»;эмбрионы кур на 2-е, 4-е, 8-е, 12-е и 16–е сутки инкубации;кровь и сыворотка крови, полученная от цыплят суточного возрастакросса «Шейвер 2000»;внутренние органы цыплят суточного возраста;молодняк в возрасте 1-60 суток.532.2. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ2.2.1. Влияние микроклиматических стрессоров на организм яичныхцыплят во время инкубацииРезультаты исследований по данной теме представлены в следующейработе [151].2.2.1.1. Особенности становления организма цыплят под влияниемвысокой температуры во время инкубацииВданномразделеоцененастепеньвоздействияповышеннойтемпературы на результаты искусственной инкубации, интенсивностьпроцессов перекисного окисления липидов, жизнеспособность и основныефизиолого-биохимические показатели молодняка кур кросса «Шейвер 2000».Для проведения эксперимента № 1 были подобраны две группы(контрольная и опытная) по 500 инкубационных яиц кросса «Шейвер 2000».Яйца кур яичного кросса опытной группы инкубировали в автоматическоминкубаторе при следующих параметрах инкубации: температура 40,0±0,1 oC,относительная влажность воздуха 55-60 %, а контрольную группу – согласнонормативным показателям, утвержденным на ФГУП ППЗ «Птичное» (см.приложение 1).Доказано, что наиболее выраженное влияние на результаты инкубацииоказывает температура воздуха в инкубаторе [188].
Так, пределы температурывоздуха около яиц, в которых развитие происходит нормально, 37-39 оС.Результаты инкубации (процент вывода и качество молодняка), крайне низкиена границах указанного интервала. Несомненно, параметры микроклимата вовремя инкубации могут выступать стрессором для развивающихся эмбрионови цыплят. В производственном цикле самым опасным считается стресс,возникающий при перегреве инкубационных яиц [76], поэтому в качествестрессора в данном исследовании выбрали именно тепловое воздействие(40,0±0,1 oC). Данная температура не отвечает действующим рекомендациямВНИТИП для инкубации яиц сельскохозяйственной птицы, поэтомурезультаты инкубации в приведенном нами опыте заведомо будут уступать54результатам, полученным при инкубировании яиц в оптимальных условиях.Данное суждение подтверждено в работах М.В.
Орлова и А.Г. Отрыганьева[76, 78].2.2.1.1.1. Зоотехнические показателиЖизнеспособность эмбрионов кур и молодняка кур отражена в таблице6.К.7,80±1,20Оп.8,40±1,241,60±0,564,40± 6,40±0,92 1,098,80± 6,60± 9,20±1,27*** 1,11 1,291,20±0,498,20±1,23***яицВыводимостьСлабыеЗадохликиЗамершиеКровяныекольцаНеоплодотворенныеяйцаПартияОтходы инкубации85,25±1,59±Δ-Вывод цыплятТаблица 6 – Результаты инкубации, % (n=500)78,60±1,83±Δ-64,19±58,80±-21,06-19,802,14***2,20***П р и м е ч а н и е : Здесь и далее *- р<0,05; **- р<0,01; ***- р<0,001Данные таблицы еще раз подтверждают многочисленные исследования[18, 76, 78] об отрицательном влиянии высокой температуры на становлениеорганизма цыплят во время инкубации. Установлено достоверное увеличениев опытной партии таких отходов инкубации, как «кровяные кольца» и«слабые» в 5,5 (р<0,001) и 6,8 раз (р<0,001) соответственно по сравнению сконтролем, что обусловило снижение вывода цыплят в опытной партии на19,80 % (р<0,001), а выводимости яиц – на 21,06 % (р<0,001).На протяжении 60 суток выращивания цыплят учитывали динамикусохранности птицы (табл.
7). Указанный период охватывает основныекритическиепериодыраннегопостнатальногопериода.Показателимикроклимата в птичнике соответствовали нормативным значениям (см.приложение 2, 3).55Таблица 7 – Сохранность цыплят, % (n=100)Группы цыплят1-10Возраст в сутках10-2020-3030-4040-5050-60Всего за 60 сутокпадежсохр.падежсохр.К.397±1,71199±0,99Оп.793±2,55496±1,96падежсохр.0100397±1,71падеж20сохр.падеж98±1,4001002сохр.10098±1,40падежсохр.199±0,990100падежсохр.793±2,551684±3,67Показатели сохранности указывают на высокий падеж молодняка впервую декаду выращивания цыплят (падеж был в 2,3 раза выше, чем вконтроле). За весь исследуемый период сохранность птицы в контроле былавыше на 9,0 %.Жизнеспособность цыплят в опытной группе также уступала контролю,что подтверждает значительное влияние высокой температуры на становлениеорганизма цыплят как в эмбриональный, так и в постэмбриональный период.2.2.1.1.2.