Диссертация (1150807), страница 6
Текст из файла (страница 6)
ê. ïðè ââåäåíèèîí âûâîäèòñÿ ãîðàçäî áûñòðåå, ÷åì â íàèâíîì ñîñòîÿíèè (íàèâíîåñîñòîÿíèå äîñòèãàåòñÿ, êîãäà ôóíêöèÿ àêòèâàöèè î÷åíü ìàëà, ò. å.22 (ℎ) ≪ 1).Òîëåðàíòíûé àòòðàêòîð ÿâëÿåòñÿ çåðêàëüíûì îòðàæåíèåì èììóííîãî. Çäåñüíèçêóþ êîíöåíòðàöèþ, ñäåðæèâàåòñÿ ñóïðåññèâíûì ïîëåì, ãåíåðèðóåìûì1 , èìåþùèé2 , êîòîðûé èìååòâ äàííîì ñëó÷àå âûñîêóþ êîíöåíòðàöèþ. Ïðè ââåäåíèè àíòèãåíà â òàêóþ ñèñòåìó èäèîòèïñòàíåò ñîçäàâàòü åùå áîëåå ñòèìóëèðóþùåå ïîëå äëÿ àíòèèäèîòèïà, à òîò, â ñâîþ î÷åðåäüñîçäàñò åùå áîëåå ñèëüíîå ñóïðåññèâíîå ïîëå äëÿ èäèîòèïà, êîòîðûé, â ðåçóëüòàòå, íå ñìîæåòîòâåòèòü íà àíòèãåí.1.5. Èññëåäîâàíèå ïðèíöèïîâ ñïåöèôè÷íîãî ðàñïîçíàâàíèÿñâîåãîè÷óæîãî.ÓñëîâèÿïîëíîòûðåïåðòóàðàðåöåïòîðîâÄàííàÿ òåìà ÿâëÿåòñÿ êëþ÷åâîé â èììóíîëîãèè.Èìåííî ýòà ñïîñîáíîñòü èììóííîéñèñòåìû ðàñïîçíàâàòü ãåíåòè÷åñêè ÷óæåðîäíûå ñòðóêòóðû (âèðóñû, áàêòåðèè è ò.ï.) èëèèçìåíåííûå ñâîè (îïóõîëåâûå êëåòêè, ñòàðåþùèå òêàíè è ò.ä.) è ïîçâîëèëà èììóíîëîãèèâûäåëèòüñÿ â îòäåëüíóþ ìåäèêî-áèîëîãè÷åñêóþ äèñöèïëèíó.Ïðè îïèñàíèè ìàòåìàòè÷åñêèõ èññëåäîâàíèé â ýòîé îáëàñòè ïðåæäå âñåãî ñëåäóåòîáðàòèòüñÿ ê ðàáîòå Ïåðåëüñîíà è Îóñòåðà [88] (åå îáçîð äàí â [52]).ïðîñòðàíñòâî ôîðì (shapeïðèäóìàëè ñïåöèàëüíîå àáñòðàêòíîå ïîñòðîåíèå, òàê íàçûâàåìîåspace),ôîðìêîòîðîåýòîîãðàíè÷åííîéëåãëîïîòîìïðåäñòàâëåíèåîáëàñòèâîñíîâóìíîæåñòâàäâóìåðíîãîèëèìíîãèõðàáîòðàçíîîáðàçíûõäàæåâÝòè èññëåäîâàòåëèýòîéîáëàñòè.ðåöåïòîðîâìíîãîìåðíîãîèÏðîñòðàíñòâîýïèòîïîâåâêëèäîâàââèäåïðîñòðàíñòâà.Êàæäîå èçìåðåíèå ýòîãî ïðîñòðàíñòâà ñîîòâåòñòâóåò ÷èñëîâîé õàðàêòåðèñòèêå êàêîãî-íèáóäüïàðàìåòðà ðåöåïòîðà (íàïð., äëèíà èëè çàðÿä).Ñàìà îáëàñòü îãðàíè÷åíà ââèäó òîãî, ÷òîíà ôèçè÷åñêèå õàðàêòåðèñòèêè ðåöåïòîðîâ è ýïèòîïîâ ïðèðîäîé íàëîæåíû îïðåäåëåííûåîãðàíè÷åíèÿ.Êàæäàÿ òî÷êà òàêîãî ïðîñòðàíñòâà àññîöèèðóåòñÿ ñ êîíêðåòíûì ðåöåïòîðîìèëè ýïèòîïîì, à ðàññòîÿíèå ìåæäó äâóìÿ òî÷êàìè ñîîòâåòñòâóåò óðîâíþ èõ ãîìîëîãè÷íîñòè(ðîäñòâåííîñòè), ò.
å.èõ ðàçäåëÿåò.÷åì áîëåå ðàçëè÷àþòñÿ ðåöåïòîðû/ýïèòîïû, òåì áîëüøåå ðàññòîÿíèåÐàññìîòðèì ïðîñòðàíñòâî ôîðì âñåõ ýïèòîïîâ.ýòîì ïðîñòðàíñòâå áóäåò ñîîòâåòñòâîâàòü íåêîòîðàÿ îáëàñòü,êîòîðûì îí êîìïëèìåíòàðåí (ò. ê.ðîäñòâåííûõýïèòîïîâ).(recognition ball).ÝòàÊàæäîìó ðåöåïòîðó ââêëþ÷àþùàÿ âñå ýïèòîïû,îäèí ðåöåïòîð ñïîñîáåí ðàñïîçíàâàòü ñðàçó íåñêîëüêîîáëàñòüáûëàíàçâàíààâòîðàìèðàñïîçíàþùèì øàðîìÎïèñàííîå ïðîñòðàíñòâî ôîðì â ñî÷åòàíèè ñ òåîðèåé âåðîÿòíîñòèïîçâîëÿåò èññëåäîâàòü ìíîãèå ïðîáëåìû ðàñïîçíàâàíèÿ ñâîåãî è ÷óæîãî, íå èìåÿ çíàíèéî ðåàëüíîì ôèçè÷åñêîì ñòðîåíèè ðåöåïòîðîâ. Ñ ïîìîùüþ íåãî àâòîðàì óäàëîñü íà îñíîâåñêóäíûõ ýêñïåðèìåíòàëüíûõ äàííûõ îöåíèòü ìèíèìàëüíûé ðàçìåð ðåïåðòóàðà ðåöåïòîðîâèììóííîé ñèñòåìû äëÿ ìëåêîïèòàþùåãî (ïîðÿäêà106 ,÷òî ñîîòâåòñòâóåò ñîâðåìåííûìýêñïåðèìåíòàëüíûì ïîäñ÷åòàì [89]), è ïîñòðîèòü ðÿä ãèïîòåç, âûïîëíåíèå êîòîðûõ äîëæíîîáåñïå÷èâàòü ïîëíîòó ðåïåðòóàðà.23Ïîõîæåé èäååé ñòàëî ïðåäñòàâëåíèå àíòèòåë â âèäå äâîè÷íûõ ñòðîê [90] èëè â âèäåñòðîê èç ñèìâîëîâ íåêîòîðîãî àëôàâèòà [91].Ñ ïîìîùüþ òàêèõ ïîñòðîåíèé è òîé æåòåîðèè âåðîÿòíîñòè àâòîðû ñìîãëè ïðèáëèçèòåëüíî îöåíèòü ðàçìåð ýïèòîïîâ (ïî êîëè÷åñòâóàìèíîêèñëîò), íà êîòîðûé äîëæíû áûòü ¾íàñòðîåíû¿ ðåöåïòîðû, ÷òîáû èììóííàÿ ñèñòåìàðàáîòàëà îïòèìàëüíî â ñìûñëå ñîîòíîøåíèÿ ïîëíîòû ðåïåðòóàðà è íåîáõîäèìûõ äëÿ ýòîãîðåñóðñîâ [90, 91].Ñ ïîìîùüþ òåîðèè âåðîÿòíîñòè áûëè ðàññìîòðåíû è äðóãèå ôóíäàìåíòàëüíûå âîïðîñûñïåöèôè÷íîñòè.Áûëî èññëåäîâàíî,íà ñêîëüêî ñïåöèôè÷íû äîëæíû áûòü ðåöåïòîðûëèìôîöèòîâ, ÷òîáû îáåñïå÷èòü ïîëíîòó ðåïåðòóàðà ñ îäíîé ñòîðîíû [91, 92] è çàùèòó îòàóòîèììóííûõ çàáîëåâàíèé ñ äðóãîé [92, 93].
Òàê áûë âûÿâëåí äîâîëüíî íåîæèäàííûé ôàêò:÷òî óðîâåíü ñïåöèôè÷íîñòè ëèìôîöèòîâ âî ìíîãîì îïðåäåëÿåòñÿ êîëè÷åñòâîì ñîáñòâåííûõàíòèãåíîâ (ïðåäñòàâëåííûõ â ôîðìå pMHC), ê êîòîðûì èììóííàÿ ñèñòåìà äîëæíà áûòüòîëåðàíòíà, à íå òåì, íà ñêîëüêî ÷óâñòâèòåëüíûì äîëæíû áûòü ëèìôîöèòû ïî îòíîøåíèþê ¾âíåøíèì âðàãàì¿ [92, 93].Àíàëîãè÷íûìñïîñîáîìáûëàèññëåäîâàíàçàâèñèìîñòüðàçíîîáðàçèÿ MHC ìîëåêóë â èíäèâèäóàëüíîì îðãàíèçìå.ïîëíîòûðåïåðòóàðàîòÈçâåñòíî, ÷òî ðàçíîîáðàçèåMHC ìîëåêóë ïîâûøàåò óðîâåíü ðàñïîçíàâàíèÿ ÷óæåðîäíûõ àíòèãåíîâ. òî æå âðåìÿ âêîíêðåòíîì îðãàíèçìå, êàê ïðàâèëî, ïðåäñòàâëåíî 10-20 ðàçëè÷íûõ MHC, ÷òî äîâîëüíî ìàëîïî ñðàâíåíèþ ñ ìàêñèìàëüíî âîçìîæíûì èõ ÷èñëîì. Íåêîòîðûå ó÷åíûå îáúÿñíÿëè ýòî òåì,÷òî ïîâûøåíèå ÷èñëà MHC ïðèâåäåò ê ÷ðåçìåðíîé îòðèöàòåëüíîé ñåëåêöèè ëèìôîöèòîâ âòèìóñå (ò.
ê. èì áóäåò ïðåäñòàâëåíî ñëèøêîì ìíîãî êîìïëåêñîâ MHC-ñîáñòâåííûé ïåïòèä),÷òî ìîæåò íàðóøèòü ïîëíîòó ðåïåðòóàðà èììóííîé ñèñòåìû.  [94, 95] ïîêàçàíî, ÷òî ñ òî÷êèçðåíèÿ ïîëíîòû ðåïåðòóàðà íåãàòèâíûé ýôôåêò íà÷íåò âîçíèêàòü òîëüêî êîãäà êîëè÷åñòâîÌÍÑ ïåðåñå÷åò îòìåòêó â 140 øò. Îñîáåííî æå îí ñêàæåòñÿ, êîãäà èõ êîëè÷åñòâî äîñòèãíåòâåëè÷èíû103 .Ïîäðîáíûé îáçîð áîëüøåé ÷àñòè îïèñàííûõ ðàáîò ìîæíî íàéòè â [52, 96]. ×òî êàñàåòñÿïîíÿòèÿ ïðîñòðàíñòâà ôîðì, òî îíî àêòèâíî ðàçâèâàëîñü. Áåãëûé îáçîð ìàòåìàòè÷åñêèõ ðàáîòäàí â [81].Îäíà èç ñòàòåé íà ýòó òåìó ïåðåâåäåíà íà ðóññêèé ÿçûê [97].Ñ ïîÿâëåíèåìíîâûõ ìåòîäîâ êîìïüþòåðíîãî ìîäåëèðîâàíèÿ ñ ïîìîùüþ ìíîãî-àãåíòíûõ ñèñòåì (ïîäðîáíååî ìíîãî-àãåíòíûõ ñèñòåìàõ ñì.íèæå), ïðîñòðàíñòâî ôîðì ïåðåêî÷åâàëî è ñþäà: êðàòêèéîáçîð ýòèõ ðàáîò ìîæíî íàéòè â [98].
Ìû îòìåòèì îäíó èç íèõ, â êîòîðîé óäàëîñü îáúÿñíèòüñòðàííûé ôåíîìåí, íàáëþäàåìûé ó ëèö, ðåãóëÿðíî äåëàþùèõ ñåçîííóþ ïðèâèâêó îò ãðèïïà.Ê 90-ì ãã.óæå èìåëèñü èññëåäîâàíèÿ, ñîãëàñíî êîòîðûì â îäíèõ ñëó÷àÿõ ðåãóëÿðíàÿâàêöèíàöèÿ äàâàëà äëèòåëüíóþ èììóííóþ çàùèòó, à â äðóãèõ, íàîáîðîò, ñíèæàëà óðîâåíüçàùèòû, èìåâøèéñÿ ïîñëå ïðåäûäóùåé ïðèâèâêè.Èññëåäîâàíèå ïðîáëåìû ñ ïîìîùüþêîìïüþòåðíîãî ìîäåëèðîâàíèÿ ïðîñòðàíñòâà ôîðì îáúÿñíèëî ýòîò ïàðàäîêñ [99, 100].
 [99]áûëà âûäâèíóòà òàê íàçûâàåìàÿ ãèïîòåçà àíòèãåííîé äèñòàíöèè, ñîãëàñíî êîòîðîé ïåðâàÿâàêöèíà íà÷èíàåò ìåøàòü ïîñëåäóþùèì â ñëó÷àå, åñëè èõ øòàììû íàõîäÿòñÿ íà áëèçêîìðàññòîÿíèè â ïðîñòðàíñòâå ôîðì, ò. å.åñëè îíè äîñòàòî÷íî ãîìîëîãè÷íû.Ñîãëàñíî ýòîéãèïîòåçå ïðè âûáîðå î÷åðåäíîé âàêöèíû íóæíî îðèåíòèðîâàòüñÿ íå òîëüêî íà åå áëèçîñòü24ê îæèäàåìîìó øòàììó âèðóñà, íî è íà òî, ÷òîáû àíòèãåííàÿ äèñòàíöèÿ ñ ïðåäûäóùåéâàêöèíîé áûëà êàê ìîæíî áîëüøå. [100] áûëî ïðîâåäåíî ïîäðîáíîå èññëåäîâàíèåýêñïåðèìåíòàëüíûõ äàííûé è ðàçðàáîòàíû ìåòîäû âèçóàëèçàöèè àíòèãåííîé äèñòàíöèèìåæäó âàêöèíàìè.Ðåçóëüòàòû ýòèõ èññëåäîâàíèé áûëè ñåðüåçíî âîñïðèíÿòû Âñåìèðíîéîðãàíèçàöèåé çäðàâîîõðàíåíèÿ, êîòîðàÿ òåïåðü ïðè âûáîðå íîâîé ñåçîííîé âàêöèíû ïðîâîäèòäîïîëíèòåëüíûå èññëåäîâàíèÿ ìåòîäàìè,ïðåäëîæåííûìè â [100] íà ñòåïåíü ðîäñòâà ñïðåäûäóùèìè âàêöèíàìè [101].Èíòåðåñ ê èññëåäîâàíèþ ïðèíöèïîâ ñïåöèôè÷íîñòè ñåãîäíÿ ðàñòåò.àíàëîãèè ñ ãåíîìèêîé è ïðîòåîìèêîé âîçíèêëî íîâîå íàïðàâëåíèå Òàê íåäàâíî ïîèììóíîìèêà(Im-munomics), êîòîðàÿ çàíèìàåòñÿ îïðåäåëåíèåì è èçó÷åíèåì âñåãî ìíîãîîáðàçèÿ ýïèòîïîâàíòèãåíîâ, ñ êîòîðûìè ïîòåíöèàëüíî ìîæåò âñòðåòèòüñÿ èììóííàÿ ñèñòåìà.
Ñàìî ìíîæåñòâîàíòèãåíîâ ïðè ýòîì íàçûâàåòñÿèììóíîìîé(immunome) ïî àíàëîãèè ñ èíòåðàêòîìîé âïðîòåîìèêå [102].1.6. Ïðîëèôåðàöèÿ êëåòîê. Àíàëèç CFSE-äàííûõ.Ìåòîäû ïðîòî÷íîé öèòîìåòðèè âíåñëè áîëüøîé âêëàä â ïîíèìàíèå äèíàìèêè èììóííûõêëåòîê. Îäíàêî ïðè èññëåäîâàíèè ïðîëèôåðàöèè Ò-êëåòîê âîçíèêàåò ïðîáëåìà èíòåðïðåòàöèèýêñïåðèìåíòàëüíûõ äàííûõ.Çà ïîñëåäíèå 15 ëåò ðàçíûìè àâòîðàìè áûëè ïðåäëîæåíîìíîæåñòâî ìåòîäîâ, ðåøàþùèõ ýòó ïðîáëåìó ñ ïîìîùüþ ìàòåìàòè÷åñêîãî ìîäåëèðîâàíèÿ,áëàãîäàÿðÿ ÷åìó óäàëîñü óçíàòü, êàêîâà ñêîðîñòü äåëåíèÿ è àïîïòîçà è êàê îíà ìåíÿåòñÿ âçàâèñèìîñòè îò êîëè÷åñòâà ïðîéäåííûõ äåëåíèé [103105].
Òàêæå áûëî èññëåäîâàíî âëèÿíèåIL-2 íà ïðîëèôåðàöèþ: Deenick, Ganusov è ñîàâò.ïîêàçàëè, ÷òî ýòîò öèòîêèí óìåíüøàåòïðîöåíò àïîïòîçà äåëÿùèõñÿ êëåòîê, à òàêæå âëèÿåò íà òî, êàê ìíîãî êëåòîê ïîïóëÿöèèâîîáùå âñòóïèò â äåëåíèå [103, 106]. Ã. Áî÷àðîâûì è ñîàâò. ñ èñïîëüçîâàíèåì òàêèõ ìîäåëåéáûëà îáíàðóæåíà ëîãàðèôìè÷åñêàÿ ñâÿçü ìåæäó êîëè÷åñòâîì Ò-êëåòîê ïðåäøåñòâåííèêîâ èôàêòîðîì ýêñïàíñèè, êîòîðûé îïðåäåëÿåòñÿ êàê ÷àñòíîå îò äåëåíèÿ ÷èñëà ñïåöèôè÷åñêèõ Òêëåòîê íà ñåäüìîé äåíü ïîñëå èììóíèçàöèè íà ÷èñëî êëåòîê-ïðåäøåñòâåííèêîâ [107].ÍàèáîëååïîäõîäÿùèìèäëÿÌÈñ÷èòàþòñÿêðàñèòåëÿäàííûå,CFSE,ïîëó÷åííûåïîçâîëÿþùåãîñïîìîùüþèíòåðíàëèçóåìîãîôëóîðåñöåíòíîãîïðîñëåäèòüäîäåëåíèé êëåòêè.Ïðè ýòîì ìåòîäû ÌÈ óñëîâíî ìîæíî ðàçäåëèòü íà äâà êëàññà:10òå,êîòîðûå èñïîëüçóþò ëèøü äàííûå âûñîòû ïèêîâ êðèâîé óðîâíÿ CFSE (àññîöèèðóåìûå ñêîíöåíòðàöèåé êëåòîê, ïðîøåäøèõ ðàâíîå ÷èñëî äåëåíèé), è òå, êîòîðûå èñïîëüçóþò äàííûåâñåé êðèâîé.
Ê ïåðâîìó êëàññó îòíîñèòñÿ áîëüøèíñòâî ðàáîò â ýòîé îáëàñòè (ñì. [105, 106,108, 109] è äð.), íî óðîâåíü ïîãðåøíîñòè òàêèõ ìîäåëåé äîñòàòî÷íî âûñîê, è, êàê ïîêàçàíîâ [105], ðàçíûå ìîäåëè ìîãóò äàâàòü ðàçíûå ðåçóëüòàòû.Íàèáîëåå ðàñïðîñòðàíåííûìçäåñü ìåòîäîì ÿâëÿåòñÿ èñïîëüçîâàíèå óïðîùåííîé Ñìèò-Ìàðòèíîâñêîé ìîäåëè, â êîòîðîéêëåòî÷íûé öèêë ðàçäåëåí íà äâå ôàçû îòäûõà è äåëåíèÿ [110].Âòîðîé êëàññ ìîäåëåéïîÿâèëñÿ ñðàâíèòåëüíî íåäàâíî â ñîâìåñòíîì èññëåäîâàíèè ðîññèéñêèõ (Ëóçÿíèíà, Áî÷àðîâ)è çàïàäíûõ èññëåäîâàòåëåé,ïðåäëîæèâøèõ ýëåãàíòíóþ è ìîùíóþ ìîäåëü [111].25Ýòàìîäåëü ÿâëÿþòñÿ ìîäèôèêàöèåé1â 1967 ã.
[112, 113] .æå èäåÿ:ñòðóêòóðíûõ ïîïóëÿöèîííûõ ìîäåëåé,ïðåäëîæåííûõ åùåÒîãäà â äâóõ íåçàâèñèìûõ ðàáîòàõ áûëà èñïîëüçîâàíà îäíà è òàïðîöåññ äåëåíèÿ ðàññìàòðèâàëñÿ êàê ðåçóëüòàò íåïðåðûâíîãî ðîñòà îòäåëüíûõêëåòîê ïî ðàçìåðó (ïî îñè Ox).Ïðè ýòîì äåëåíèå êëåòîê îïèñûâàëîñü, êàê ìãíîâåííûéïåðåíîñ êëåòîê ïî îñè Ox ê çíà÷åíèþ â äâà ðàçà ìåíüøåìó, ÷åì òåêóùåå ñ îäíîâðåìåííûìóäâîåíèåì êîíöåíòðàöèè êëåòîê. Îòëè÷èå ìåæäó óêàçàííûìè ðàáîòàìè çàêëþ÷àëîñü â òîì,÷òî â ñëó÷àå [112] ïîä ðàçìåðîì ïîäðàçóìåâàëñÿ îáúåì, à â ñëó÷àå [113] ìàññà êëåòêè.Íåîáõîäèìîñòü èñïîëüçîâàòü ìàññó è îáúåì äèêòîâàëàñü íåîáõîäèìîñòüþ èíòåðïðåòèðîâàòüñîîòâåòñòâóþùèå ýêñïåðèìåíòàëüíûå äàííûå. ñîâðåìåííûõ ðàáîòàõ [41, 104, 117119]ìàññó è îáúåì çàìåíèë ïîêàçàòåëü ôëóîðåñöåíöèè êðàñèòåëÿ CFSE, êîòîðûì ìåòÿòñÿ êëåòêèäëÿ ïîñëåäóþùåãî èçìåðåíèÿ ñ ïîìîùüþ ïðîòî÷íîãî öèòîôëóîðèìåòðà.
Ìîäåëü òàêîãî òèïàïîçâîëÿåò èçâëå÷ü ìàêñèìàëüíóþ èíôîðìàöèþ èç CFSE-äàííûõ ïîëíîñòüþ îïðåäåëèòüôóíêöèè äåëåíèÿ è àïîïòîçà êëåòîê â çàâèñèìîñòè îò êîëè÷åñòâà ñîâåðøåííûõ èìè äåëåíèé,ó÷èòûâàÿ ïðè ýòîì òàêèå òîíêîñòè,êàê ïîíèæåíèå óðîâíÿ ôëóîðåñöåíöèè êðàñèòåëÿ,ïðîèñõîäÿùåå äàæå â ïîêîÿùèõñÿ êëåòêàõ. Íèæå ïðèâåäåíà ìîäåëü èç [117]:Çäåñü(, ) − ()(, ) = −(() + ())(, ) + 2()(, ).(, ) êîíöåíòðàöèÿ êëåòîê ñ óðîâíåì CFSE-ôëóîðåñöåíöèè â ìîìåíò(1.7)âðåìåíè.Âòîðîå ñëàãàåìîå ëåâîé ÷àñòè ðàñ÷åò ïîíèæåíèÿ óðîâíÿ ôëóîðåñöåíöèè êðàñèòåëÿ ñîâðåìåíåì.,()Ïåðâîå ñëàãàåìîå ïðàâîé ÷àñòè óáûëü êëåòîê ñ óðîâíåì CFSE ðàâíûìïðîèñõîäÿùåå êàê çà ñ÷åò ãèáåëè êëåòîê ñî ñêîðîñòüþ(),òàê è çà ñ÷åò äåëåíèÿ(ïðè äåëåíèè óðîâåíü CFSE ïàäàåò ïðèáëèçèòåëüíî â äâà ðàçà çäåñü ýòî êîýôôèöèåíò ).Ïîñëåäíåå ñëàãàåìîå ïðàâîé ÷àñòü âîçðàñòàíèå êîíöåíòðàöèè êëåòîê ñ óðîâíåìôëóîðåñöåíöèè çàñ÷åò äåëåíèÿ êëåòîê ñ óðîâíåì ôëóîðèñöåíöèè.1.7.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
