Диссертация (1150007), страница 13
Текст из файла (страница 13)
С19Н21FО3. Вычислено, %: С 72.13; Н 6.69.3-Гидрокси-2-фтор-D-гомо-эстра-1,3,5(10),8,14-пентаен-17а-он (57)500 мг (1.58 ммоль) секосоединения 56 растворяли в 40 мл толуола, добавляли 40 мг моногидрата п-толуолсульфокислоты. Кипятили 20 мин, послечего реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, промывали 5%раствором соды, водой, насыщенным раствором NaCl. Толуол отгоняли наротационном испарителе.
Получено 460 мг (98%) эстрапентаена 57. Т. пл. 200202оС. Опыт повторили: из 430 мг соединения 56, получили 370 мг (91%)эстрапентаена 57.Спектр ЯМР 1Н ((CD3)2SO, , м.д.): 1.11 c (3H, H18), 1.41-1.54 м (1H), 1.912.25 м (4H), 2.39-2.77 м (7Н), 6.06 уш. с (1H, H15), 6.74 д (1H, H4, JHF=8.7 Гц),7.06 д (1H, H1, JHF=13.1 Гц), 9.83 уш. с (1H, OH).Спектр ЯМР13C ((CD3)2SO, , м.д.): 22.5 (СН2), 22.6, 24.1 (СН2), 24.5 (СН2),28.0 (СН2), 29.5 (СН2), 35.6 (СН2), 39.5, 45.6, 111.7 д (С1, J=19.1 Гц), 117.2, 120.7,128.1, 128.3 д (С10, J= 6.3 Гц), 132.8, 140.6, 144.0 д (С3, J=12.7 Гц), 150.5 д (С2,J=236.3 Гц), 215.3 (С=О).HRMS (ESI-TOF), вычислено для С19Н20FО2 (М+Н)+: 299.1442; найдено:299.1444.Найдено, %: С 76.01; Н 6.66.
С19Н19FО2. Вычислено, %: С 75.98; Н 7.05.2-Фтор-D-гомо-8α-эстрон (16)350 мг (1.17 ммоль) эстрапентаена 57 растворяли в 20 мл абсолютного метанола, добавляли 100 мг 10% Pd/C. Через раствор пропускали водород в течение 2 ч. Контроль за протеканием реакции проводили методом ТСХ в системегексан-этилацетат (2:1) с последующим проявлением в растворе H2SO4 в MeOHпри нагревании. По окончании реакции катализатор отфильтровывали, промывали CHCl3. Растворители удаляли на ротационном испарителе, твердыйостаток кристаллизовали из метанола.Получено 105 мг (30%) 2-фтор-D-гомо-8α-эстрона (16), т.
пл. 218-220оС.98Спектр ЯМР 1Н ((CD3)2SO, , м.д.): 1.06 с (3Н, H18), 1.31-1.41 м (1Н), 1.462.08 м (14Н), 2.58-2.68 м (2Н), 6.57 д (1Н, H4, 4JHF=8.8 Гц), 6.84 д (1Н, H1,3JHF=12.4 Гц), 9.46 с (1Н, OH).Спектр ЯМР 13C ((CD3)2SO, , м.д.): 19.3, 21.8 (CH2), 25.9 (CH2), 26.8 (CH2),28.4 (CH2), 31.1 (CH2), 33.7 (CH2), 38.2 (CH2), 39.5, 40.2, 48.0, 48.2, 116.42 д (С1,J=17.0 Гц), 117.8, 132.6, 133.3 д (С4, J=5.3 Гц), 143.2 д (С3, J=12.7 Гц), 150.3 д(С2, J=238.4 Гц), 215.2 (С=О).HRMS (ESI-TOF), вычислено для С19Н24FО2 (М+Н)+: 303.1755; найдено:303.1758.Найдено, %: С 75.41; Н 7.56. С19Н23FО2.
Вычислено, %: С 75.45; Н 7.67.18-Метил-3-метокси-2-фтор-эстра-1,3,5(10),6,8(9)-пентаен-17-ол (59)К 262 мг (0.736 ммоль) ацетата 18-метил-3-метокси-2-фтор-эстра1,3,5(10),6,8(9)-пентаена-17-ола (58) добавляли 300 мг NaOH в 9 мл MeOH и10 мл бензола. Реакционную смесь кипятили 2 ч, охлаждали до комнатной температуры, выливали в воду. Избыток щелочи нейтрализовали уксусной кислотой, смесь экстрагировали этилацетатом (3х50 мл).
Объединенный органический слой промывали последовательно водой (2х50 мл), сушили над Na2SO4,растворитель отгоняли в вакууме. Получали 219.5 мг (95%) 18-метил-3-метокси-2-фтор-эстра-1,3,5(10),6,8(9)-пентаен-17-ола (59), который без дополнительной очистки использовали в дальнейших реакциях.3-Гидрокси-18-метил-2-фтор-эстра-1,3,5(10),6,8(9)-пентаен-17-он (18)К раствору 219.5 мг (0.7 ммоль) соединения 59 в 2 мл хлористого метилена добавляли 290 мг DMP, реакционную смесь перемешивали при комнатнойтемпературе 2 ч, выливали в воду, экстрагировали этилацетатом (3х50 мл), последовательно промывали водой (2х50 мл), насыщенным раствором NaCl (2х50мл), сушили над Na2SO4. Растворители удаляли в вакууме, хроматографировали на колонке с силикагелем, элюировали смесью петролейный эфирэтилацетат 8:1.
Полученные 120 мг (55%) 18-метил-3-метокси-2-фтор-эстра-991,3,5(10),6,8(9)-пентаен-17-она (60) растворяли в 1 мл HBr и 3 мл AcOH, реакционную смесь кипятили с обратным холодильником 6 ч, выливали в воду, экстрагировали этилацетатом (3х20 мл). Объединенный органический слой промывали последовательно 5% раствором Na2CO3 (3х20 мл), водой (2х30 мл), насыщенным раствором NaCl (1х30 мл), сушили над Na2SO4, растворительудаляли в вакууме. Перекристаллизацией из метанола получали 60 мг (52%)соединения 18, т. пл. 220оС.Спектр ЯМР 1Н ((CD3)2SO, δ, м.д.): 0.73 т (3Н, J= 6.9 Гц, С18-СН3), 1.04-1.10м (1Н), 1.22-1.27 м (1Н), 1.60-1.68 м (1Н), 1.92-1.98 м (1Н), 2.19-2.33 м (2Н),2.40-2.67 (2Н), 2.93-3.02 м (1Н), 3.11-3.23 м (2Н), 7.19 д (1Н, J=8.1 Гц), 7.28 д(1Н, J= 9.2 Гц), 7.57-7.63 м (2Н), 10.19 с (1Н, -ОН).Спектр ЯМР13С ((CD3)2SO, δ, м.д): 8.0, 17.3, 21.3, 23.9, 25.0, 36.6, 47.1,50.3, 108.7 д (J=18.5 Гц), 113.1, 123.9, 125.0, 126.4 д (J=7.7 Гц), 130.3, 130.8 д (J=5.4 Гц), 133.0, 144.5 д (С3, J= 14.6 Гц), 152.3 д (С2, J= 245.8 Гц), 218.1 (С=О).HRMS (ESI-TOF), вычислено для С19Н19FО2 (М+Н)+: 299.1442; найдено:299.1440.Сульфамат 18-метил-2-фтор-8α-эстрона (19)К 100 мг (0.33 ммоль) 18-метил-2-фтор-8α-эстрона (14) добавляли 80 мг(6.72 ммоль) сульфамоилхлорида в 1.0 мл диметилацетамида.
Реакционнуюсмесь перемешивали при комнатной температуре (протекание реакции контролровали методом ТСХ), выливали в воду, экстрагировали этилацетатом (3х20мл), объединенный органический слой промывали последовательно водой(2х15 мл), насыщенным раствором NaCl (1х15 мл), сушили над Na2SO4,растворитель отгоняли на ротационном испарителе. Перекристаллизацией изметанола получали 69 мг (55%) соединения 19, т.
пл. 185-187оС.Спектр ЯМР 1Н ((CD3)2SO, δ, м.д.): 0.64 т (3Н, J= 7.3 Гц, С18-СН3), 1.10-1.25м (2Н), 1.45-1.95 м (9Н), 1.96-2.15 м (3Н), 2.30-2.40 м (1Н), 2.55-2.85 м (3Н),7.11 д (1Н, J= 8.0 Гц), 7.21 д (1Н, J= 11.6 Гц), 8.16 с (2Н, -NH2).100Сульфамат 2-фтор-D-гомо-8α-эстра-1,3,5(10)-триен-17а-она (20)К 50 мг (0.17 ммоль) 3-гидрокси-2-фтор-D-гомо-8α-эстра-1,3,5(10)-триен17а-она (16) добавляли 40 мг (3.36 ммоль) сульфамоилхлорида в 1.0 мл диметилацетамида.
Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре(протекание реакции контролировали методом ТСХ), выливали в воду, экстрагировали этилацетатом (3х10 мл), объединенный органический слой промывалипоследовательно водой (2х15 мл), насыщенным раствором NaCl (1х15 мл), сушили над Na2SO4, растворитель отгоняли на ротационном испарителе. Перекристаллизацией из метанола получали 52 мг (80%) соединения 20, т. пл. 221222 оС.Спектр ЯМР 1Н ((CD3)2SO, δ, м.д.): 0.99 с (3Н), 1.01-1.07 м (1Н), 1.43-1.69м (3Н), 1.84-2.43 м (11Н), 2.53-2.83 м (1Н), 2.75-2.77 м (3Н), 6.68 д (1Н, J= 8.9Гц), 6.92 д (1Н, J= 13.0 Гц), 9.66 с (2Н, -NH2).Сульфамат 18-метил-2-фтор-эстра-1,3,5(10),6,8(9)-пентаен-17-она (21)К 50 мг (0.17 ммоль) 3-гидрокси-2-фтор-эстра-1,3,5(10),6,8(9)-пентаен-17она (18) добавляли 40 мг (3.36 ммоль) сульфамоилхлорида в 1.0 мл диметилацетамида.
Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре(протекание реакции контролировали методом ТСХ), выливали в воду, экстрагировали этилацетатом (3х10 мл), объединенный органический слой промывали последовательно водой (2х15 мл), насыщенным раствором NaCl (1х15 мл),сушили над Na2SO4, растворитель отгоняли на ротационном испарителе.Перекристаллизацией из метанола получали 52 мг (81%) соединения 21, т. пл.245-2470С.Спектр ЯМР 1Н ((CD3)2SO, δ, м.д.): 0.73 т (3Н, J= 7.3 Гц, С18-СН3), 1.01-1.07м (1Н), 1.23-1.32 м (1Н), 1.67-1.75 м (1Н), 1.95-2.02 м (1Н), 2.21-2.37 м (3Н),2.59-2.67 м (2Н), 3.01-3.10 м (1Н), 3.20-3.26 м (1Н), 7.37 д (1Н, J= 8.5 Гц), 7.84 с(1Н), 7.87 д (1Н, J= 5.5 Гц), 7.96 д (1Н, J= 8.2 Гц), 8.29 с (2Н, -NH2).HRMS (ESI-TOF), вычислено для С19Н20FNО4S (М+NН4)+: 395.1435;найдено: 395.1445.10110β-фторэстра-1,4-диен-3-он-17β-ол (64)К 137 мг (0.5 ммоль) эстрадиола (61) добавляли 195 мг (0.55 ммоль) соединения «Selectfluor», 0.5 мл метанола и 500 мг ионной жидкости «bmimBF4».
Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре 10 ч, выливали вводу, экстрагировали Et2O (3х20 мл), органический слой последовательно промывали водой, насыщенным раствором NaCl, сушили над Na2SO4, растворителиудаляли в вакууме. Остаток хроматографировали на колонке с силикагелем,элюируя смесью гексан-этилацетат (4:1).Получали 89 мг (64%) 10β-фторэстра-1,4-диен-3-он-17β-ола (64), т.пл. 151153oC.Спектр ЯМР 1Н (СDCl3, δ, м.д.): 0.86 с (3H, CH3-18), 0.96-1.56 м (8H), 1.601.69 м (1H), 1.76-1.85 м (1H), 1.84-2.04 м (4H), 2.04-2.15, 2.40-2.47 м (1H), 2.632.75 м (1H), 3.66 т (J=8.5 Гц, H-17), 6.04 с (1H, H-4), 6.24 д (J=10.2 Гц), 7.09 дд(7.6 Гц, J=10.4 Гц).Спектр ЯМР 13С (СDCl3, δ, м.д.): 10.9 (CH3), 22.6, 23.5, 30.3, 31.8, 32.6, 35.8,36.1, 43.1, 49.7, 54.2 д (JC,F=25.0 Гц, C-9), 81.4, 89.2 д (JC,F=168.0 Гц, C-10), 123.6д (JC,F=4.4 Гц), 129.4 д (JC,F=8.1 Гц), 145.1 д (JC,F=24.2 Гц), 160.3 д (JC,F=19.1 Гц),185.1 д (JC,F=4.4 Гц).HRMS (ESI-TOF), Вычислено для [M+H]+, [С18Н23FО2]+: 291.1755, найдено:291.1743.3.2.
Исследование биологических свойствИсследования соединений in vitro на культурах раковых клеток MCF7 иMELN проводились нами в Германском центре онкологических исследований(German Cancer Research Center, DKFZ) под руководством проф. Doris Mayer.Изучение антиоксидантных свойств соединений проводились нами вБиомедицинском центре университета Хельсинки (Biomedicum Helsinki) подруководством проф. Matti J.
Tikkanen-а.102Культуральные среды и растворыM2 (phenol-red free DMEM or RPMI)Penicillin/Streptomycin100 U/ml resp. 100 μg/mlFCS (эмбриональной сыворотки теленка)10 %sodium pyruvate1 mML-glutamine2 mMDCC solutionTris-HCl (pH 8.0)0.01 MCharcoal Norrit A0.25 % (w/v)Dextran 600.0025 % (w/v) in distilled H2OM3phenol-red free DMEM or RPMI100 U/ml resp. 100 μg/mlPenicillin/Streptomycindextran-coated charcoal-treated FCS (DCC-FCS) 10 %sodium pyruvate1 mML-glutamine2 mMM4phenol-red free DMEM or RPMIPenicillin/Streptomycin100 U/ml resp.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
