Диссертация (1144791), страница 40
Текст из файла (страница 40)
et al., 2009; Pignataro G. et al., 2008). Однако результаты, полученныенами по ослаблению нейропротективного эффекта ИПостК при совместномприменении с антагонистом АМРА-рецепторов, разнятся по отношению крезультатам, полученным другими авторами при совместном применении ИПреКтакже с антагонистами АМРА-рецепторов (Bond A. et al., 1999).
Так, примоделировании обратимой глобальной ишемии переднего мозга у монгольскихпесчанок совместное применение ИПреК и таких антагонистов АМРАрецепторов, как LY293558 и LY300164, не оказывало эффекта на индукциюишемической толерантности. При этом авторы сделали вывод, что АМРАрецепторы не вовлечены в формирование ишемической толерантности нейроновпри применении ИПреК (Bond A.
et al., 1999). Необходимо отметить, чторазличия в полученных результатах, в первую очередь, могут быть объясненыразличиями в использованных антагонистах. Также следует принять во внимание,что ИПреК в первую очередь способствует формированию устойчивости кповреждающему действию ишемии, в то время как применение ИПостКнаправлено на уменьшение тяжести реперфузионного повреждения, поэтомуиндукторы и триггеры данных процессов могут существенно отличаться, в товремя как механизмы формирования конечных эффектов могут быть сходными.Например, при применении ИПреК и ИПостК было показано сходство в уровняхэкспрессии белков, вовлеченных в механизмы апоптоза, в результате чего авторысделали вывод о том, что оба способа эндогенной нейропротекции имеютодинаковые антиапоптотические эффекты при ишемии-реперфузии (Ding Z.M.
etal., 2012).Такимобразом,внашемисследованиибылоустановлено,чтонейропротективный эффект от применения антагониста АМРА-рецепторов217NBQX выявлялся только для нейронов наиболее чувствительных к действиюишемии-реперфузии полей СА1 и СА3 гиппокампа. Совместное применениеИПостК и антагониста АМРА-рецепторов NBQX сопровождалось ослаблениемнейропротективного эффекта первого до уровня, сопоставимого по выраженностис эффектом отдельного применения антагониста АМРА-рецепторов NBQX длянейронов полей СА1 и СА3 гиппокампа.
Проведенное исследование позволяетпредположить, что в механизмы реализации нейропротективного эффектаИПостК для нейронов полей СА1 и СА3 гиппокампа, наряду с другимифакторами, вовлечена активация АМРА-рецепторов.218ГЛАВА 5ЭФФЕКТЫ ИШЕМИЧЕСКОГО ПРЕКОНДИЦИОНИРОВАНИЯ ПРИИШЕМИИ-РЕПЕРФУЗИИ ГОЛОВНОГО МОЗГАДанный фрагмент исследования посвящен изучению эффектов примененияишемических прекондиционирующих стимулов различной кратности и сразличным временным интервалом до моделирования повреждающей ишемии.Изучение нейропротективного эффекта ИПреК проводили с использованием двухэкспериментальных моделей: хронической церебральной гипоперфузии у крыс иишемии-реперфузии переднего мозга у монгольских песчанок.5.1 Протоколы экспериментов по изучению эффектов ишемическогопрекондиционирования головного мозга5.1.1 Ишемическое прекондиционирование при хронической церебральнойгипоперфузии у крысИзучение нейропротективных эффектов раннего и позднего ИПреКпроводили в острой фазе ишемического повреждения головного мозга на моделихронической церебральной гипоперфузии у крыс.
Для проведения исследованиябыл разработан протокол эксперимента (рис. 5.1). Животные были случайнойвыборкой распределены на следующие экспериментальные группы:1) «ЛО» (n=10). В группу входили ложнооперированные крысы, которымпроводиливсехирургическиеманипуляции,кромеперманентнойбилатеральной окклюзии ОСА.2) «Ишемия» (n=74). Животным данной группы, как и всем животным издругих экспериментальных групп, данного фрагмента исследования,проводили перманентную билатеральную окклюзию ОСА.3) «ПреК» (n=31).
Перед постоянной билатеральной окклюзией ОСАпроводили ишемическое стимулирующее воздействие в виде 5-минутнойокклюзии ОСА с последующей 5-минутной реперфузией (раннее ИПреК).219Таким образом, один ишемический стимул предшествовал перманентнойокклюзии ОСА.4) «3ПреК» (n=40). Раннее ИПреК головного мозга в данной группемоделировали с помощью трех 5-минутных ишемических стимулирующихвоздействий в виде окклюзии/реперфузии ОСА, разделенных 5-минутнымиэпизодамиреперфузииспоследующейпостояннойбилатеральнойокклюзией ОСА.5) «ПреК 24» (n=28). За 24 часа до постоянной билатеральной окклюзии ОСАпроводили ишемическое стимулирующее воздействие в виде однократной5-минутной окклюзии ОСА (позднее ИПреК).ГруппаИПреК5минРеперфузия24 часаИПреКИшемия5мин/5мин2 сутокЛОИшемияПреК3ПреКПреК 24Рис. 5.1. Схема протокола эксперимента, направленного на изучение нейропротективныхэффектов раннего и позднего ишемического прекондиционирования в острой фазе хроническойцеребральной гипоперфузии у крыс.Спустя 2 суток после проведения хирургических манипуляций оценивалиневрологическийстатусживотныхилетальность.Животныхповторнонаркотизировали, извлекали мозг из полости черепа для дальнейшего проведенияморфометрического анализа структур головного мозга.2205.1.2 Ишемическое прекондиционирование при глобальной ишемии-реперфузиипереднего мозга у монгольских песчанокНейропротективный эффект ИПреК был изучен на модели глобальнойишемии-реперфузии переднего мозга у монгольских песчанок в различныхвариантах применения ишемических прекондиционирующих стимулов.
Дляпроведения исследования был разработан протокол эксперимента (рис. 5.2).Животные случайной выборкой были распределены на экспериментальныегруппы:1) «Ишемия 2а» (n=10). В группу входили песчанки, перенесшие 7-минутнуюишемию переднего мозга, длительность реперфузионного периода в даннойгруппе, как и во всех остальных группах этой серии, после проведенияхирургических манипуляций составляла 2 суток.2) «1ПреК 5» (n=8). Песчанкам данной группы, перед 7-минутной ишемиейпереднего мозга моделировали однократное ишемическое стимулирующеевоздействие в виде2-минутной билатеральной окклюзииОСА споследующей 5-минутной реперфузией.3) «2ПреК 5» (n=11). Песчанкам данной группы, перед 7-минутной ишемиейпереднегомозгавоздействиявмоделироваливидедваишемическихбилатеральной2-минутнойстимулирующихокклюзииОСА,разделенных 5-минутной реперфузией.4) «1ПреК 24» (n=10).
Животным данной группы, перед 7-минутнойбилатеральной окклюзией ОСА моделировали один ишемический стимул ввиде 2-минутной окклюзии ОСА с последующей 24 часовой реперфузией.5) «2ПреК 24» (n=7). Животным данной группы, перед 7-минутнойбилатеральной окклюзией ОСА моделировали два ишемических стимула ввиде 2-минутной окклюзии ОСА, разделенных 5-минутной реперфузией споследующей 24 часовой реперфузией.После проведения хирургических манипуляций оценивали неврологическийстатусживотныхилетальность.Выжившихживотныхповторно221наркотизировали,извлекалимозгдлядальнейшегопроведенияморфометрического анализа структур головного мозга.ИПреК2мин/5минРеперфузия24 часаИПреК2мин/5минИшемияРеперфузия7 минут2 сутокИшемия 2а1ПреК 52ПреК 51ПреК 242ПреК 24Рис. 5.2.
Схема протокола эксперимента, направленного на изучение нейропротективныхэффектов раннего и позднего ишемического прекондиционирования при глобальной ишемииреперфузии переднего мозга у монгольских песчанок.5.2 Влияние различных вариантов ишемического прекондиционирования наневрологический дефицит и летальность при ишемии-реперфузииголовного мозга5.2.1 Эффекты раннего и позднего ишемического прекондиционирования вострой фазе хронической церебральной гипоперфузии у крысВ данном разделе представлены результаты о нейропротективных эффектахраннего и позднего ИПреК в острой фазе хронической церебральнойгипоперфузии головного мозга у крыс.Ко 2-м суткам наблюдений в группе ложнооперированных крыс – «ЛО» всеживотные были живы и не имели симптомов неврологического дефицита. У крысгруппы «Ишемия», перенесших ишемический инсульт в результате двустороннейнеобратимой окклюзии ОСА, ко 2-м суткам наблюдались значительные222неврологические нарушения, которые проявлялись в виде вялости, тремора,полуптоза,одностороннегоилидвустороннегоптоза,прижатияушей,постишемической двигательной гиперактивности, парезов, судорог, резкихограничений подвижности, коматозного состояния.
Индекс неврологическогодефицита в группе «Ишемия» составил 12,5 (min 6 – max 14) (табл. 5.1). Ко 2-мсуткам наблюдений летальность в группе «Ишемия» составила 52,7% (табл. 5.2).Таблица 5.1Индекс неврологического дефицита крыс в острую фазу хроническойцеребральной гипоперфузии после применения различных вариантовишемического прекондиционированияЭкспериментальная группаМе (min-max)ИшемияПреК3ПреК12,511,814,8*(6 – 14)(7 – 16)(8 – 18)ЛО0(0)ПреК 249,8*(6 – 12)Различия значимы: * по сравнению с показателем в группе «Ишемия» при Р<0,05.Таблица 5.2Летальность крыс в острую фазу хронической церебральной гипоперфузии послеприменения различных вариантов ишемического прекондиционированияЭкспериментальная группаИшемияПреК3ПреК52,745,257,5(39/74)(14/31)(23/40)ЛО0ХроническаядвустороннейцеребральнаяперевязкойОСА,гипоперфузия,широкоПреК 2439,5(11/28)вызваннаяиспользуетсяпостояннойвкачествеэкспериментальной модели ишемического повреждения головного мозга у крыс(Atochin D.N.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
