Диссертация (1144791), страница 37
Текст из файла (страница 37)
Ко 2-м суткамнаблюдений статистически значимые различия в выраженности неврологическихнарушений сохранились между группой «2» и группами «3» (Р<0,01), «4»(Р<0,05) и «5» (Р<0,01). В то же время в группе «6» применение 15стимулирующих воздействий реперфузии/реокклюзии по 5 сек /5 сек не201приводило к увеличению неврологического дефицита ни в 1-е сутки наблюдений,ни во 2-е сутки при сравнении с группой «2» (Р>0,05) (табл. 4.12).На 1-е сутки в группе «2» общая летальность составляла 8,3%, на 2-е суткиона значимо увеличивалась почти в 3 раза (Р>0,05) и составляла 25,0%.Применение различных вариантов ИПостК приводило к увеличению летальностиво всех экспериментальных группах (табл.
4.13). Степень увеличения летальностизависелаотпротоколапримененияишемическихиреперфузионныхстимулирующих воздействий, следующих за продолжительной ишемией. Так,при сравнении с группой «2» наиболее значимое увеличение летальностинаблюдалосьприприменении7стимулирующихвоздействийреперфузии/реокклюзии по 120 с/120 с (группа «7») как в 1-е сутки (Р<0,01), так ико 2-м суткам (Р<0,01) реперфузионного периода после 30-минутной глобальнойишемии переднего мозга.Таблица 4.13Летальность монгольских песчанок после продолжительной глобальнойишемии-реперфузии переднего мозга с последующим применением различныхвариантов ишемического посткондиционирования1(n)1-есутки2-есутки002(n)8,3(1/12)25,0(3/12)Экспериментальная группа345(n)(n)(n)42,942,918,2(3/7)(3/7)(2/11)71,457,154,5(5/7)(4/7)(6/11)6(n)12,5(1/8)37,5(3/8)7(n)71,4*(5/7)100*(7/7)Различия значимы: * по сравнению с показателями в группе «2» при Р<0,01.По степени нарастания индекса неврологического дефицита группыраспределились следующим образом: «2», «6», «4», «5», «3» и «7».
Подобным жеобразом группы распределились по мере нарастания показателя летальности: «2»,«6», «5», «4», «3» и «7». Группы «4» и «5», различающиеся только количествомпосткондиционирующихстимулов(5и7стимулирующихвоздействий,202соответственно)непродемонстрировалиразличийниповыраженностиневрологического дефицита, ни по показателю летальности.Таким образом, применение посткондиционирующих стимулов на данноймодели после глобальной 30-минутной ишемии переднего мозга приводит квозрастанию неврологического дефицита и летальности.
Эти показателивозрастаютсувеличениемпродолжительностипосткондиционирующихстимулов.Вгруппеисследованииложнооперированныхвишемическогоструктурахповрежденияэкспериментальныхгруппах,головногонеупесчанокмозганаблюдалось.выжившихпригистологическомкаких-либоВопесчанок,всехкопроявленийостальных2-мсуткамреперфузионного периода в коре левого и правого полушарий головного мозгаразвивалось преимущественно диффузное и местами значительное очаговоеповреждение. Области необратимого повреждения локализовались в коре,гиппокампе,полосатомтеле ипромежуточноммозге.Отмечалсяярковыраженный периваскулярный и перицеллюлярный отек, повреждение всехполей гиппокампа со сморщиванием и набуханием, гиперхроматозом и хроматолизомклеток, некроз n.
сaudatus, выраженный некроз подкорковых отделов лобных,височных и затылочных долей с реакцией микроглии и лейкоцитов.Обратимаяпродолжительнаяишемия,вызваннаяодномоментнойбилатеральной окклюзией ОСА у монгольских песчанок, в нашем исследованиивызывала развитие неврологического дефицита различной степени выраженностиу всех особей, использованных в данном исследовании. Различная степеньпроявления неврологических симптомов во многом зависит от индивидуальнойчувствительности каждого животного к острой ишемии. Индивидуальнаяустойчивость песчанок к острой ишемии может определяться не только общимсостоянием организма до ишемии, но и индивидуальной вариабельностьюпередних и задних коммуникантных артерий и анастомозами между ними.Необходимоотметить,чтовкладзаднихкоммуникантныхартерийвкровоснабжение переднего мозга при окклюзии ОСА у монгольских песчанок203значителен и может существенно влиять на вариабельность результатов (SealaJ.B.
et al., 2006).В группе с моделированием 30-минутной обратимой ишемии переднегомозга ко 2-м суткам наблюдалось увеличение количества животных снарастанием неврологических симптомов, возрастание индекса неврологическогодефицита и увеличение летальности. Такое нарастание проявлений поврежденияв позднем постишемическом объясняется феноменом «отсроченной гибелинейронов» (Kirino T., 1982).После достаточно длительной ишемии головного мозга, приводящей кгибелинейронов,последующаяреперфузияобладаетдополнительнымповреждающим действием. Известно, что реперфузионный синдром частовстречается в клинической практике, например, при пересадке органов, послереконструктивных операций на сосудах, экстренных чрескожных коронарныхвмешательств,успешнойреанимацииипридругихсостояниях.Приисследовании ИПостК на миокарде было установлено, что ИПостК ослабляетвызванную реперфузией дисфункцию эндотелия окклюзированной коронарнойартерии (Zhao Z.Q.
et al., 2003). Многие исследователи отмечают определенноесходство ИПреК и ИПостК вне зависимости от органа и ткани, в которых ониреализуются. Известно, что короткие ишемические стимулы, предшествующиеперманентной ишемии, не способны вызвать защитный эффект в силу того, чтостимуляция клеточного цитопротективного ответа не предотвращает наступленияишемического некроза, а только замедляет его формирование. К настоящемумоменту существует единичная работа по изучению нейропротективного эффектаИПостК в зависимости от длительности предшествующей ишемии головногомозга, произведенная на модели постоянной фокальной ишемии у крыс.
В работеизучали нейропротективное действие ИПостК фактически в зоне пенумбры (ZhaoH. et al., 2006). Исследований, направленных на исследование возможныхзащитных эффектов ИПостК при продолжительной полной глобальной ишемииголовного мозга, на сегодняшний момент не существует.204Эффективность применения ИПостК ограничена жесткими временнымирамками.
Известно, что кардиопротективный эффект ИПостК реализуется, еслипервый ишемический стимул моделируется уже через 10-30 с реперфузии, апродолжительность ишемического стимула составляет от 10 до 30 с (Boengler K.et al. 2008). С другой стороны, общепринятого протокола индукции ИПостК несуществует, и каждый коллектив исследователей вырабатывает протокол,базируясь на собственных данных. В нашей работе применялись различныеварианты протокола. Первое ишемическое стимулирующее воздействие после 30минутной глобальной ишемии мозга песчанки применяли спустя 5, 10, 30 и 120секунд, причем число ишемических стимулов было различным. Ни один изпримененных протоколов ИПостК не обладал нейропротективным действием.Более того, индекс неврологического дефицита возрастал во всех исследуемыхгруппах пропорционально длительности посткондиционирующих стимулов,увеличивался и показатель летальности. В наибольшей степени исследуемыепоказатели ухудшались в группе «7» при применении протокола ИПостК, гдепервый ишемический стимул применялся после 120 секунд реперфузии и далееследовали 7 стимулирующих воздействий по 120 секунд ишемии и по 120 секундреперфузии.
Объяснением наблюдаемого нарастающего повреждающего эффектапри применении ИПостК могут служить несколько обстоятельств: во-первых,длительность времени от момента окончания ишемии до начала первогоишемического стимула, возможно, играет ключевую роль при реализациизащитного эффекта ИПостК, во-вторых – ишемические стимулирующиевоздействия способствуют прогрессивному уменьшению и перераспределениюперфузируемых капилляров, что может способствовать развитию вторичнойгипоксии, в-третьих, суммарное дополнительное время ишемии при этомсоставило 14 минут, что само по себе привнесло дополнительный повреждающийишемический эффект.
Так в исследовании на модели постоянной фокальнойишемии с применением ИПостК путем окклюзии двух ОСА у крыс былоустановлено, что применение стимулов ишемии-реперфузии после 3 минутреперфузии, следующей за ишемией, приводило к потере нейропротективного205действия ИПостК (Gao X. et al., 2008). Нейропротективный эффект ИПостК былобнаружен в исследовании на кроликах при применении минутной реокклюзиичерез минутную реперфузию после повреждающей ишемии спинного мозга (JiangX.
et al., 2006). Таким образом, мы предполагаем, что различные виды животныхдля достижения нейропротективного эффекта нуждаются в различной стратегииприменения стимулирующих воздействий реперфузии/реокклюзии.Вэкспериментахнавыбраннойнамимоделиустановлено,чтомоделирование стимулирующих воздействий ишемии-реперфузии после 30минутной глобальной ишемии переднего мозга не только не оказываетнейропротективного эффекта независимо от длительности и количествапосткондиционирующихневрологическогостимулов,дефицитаиноиспособствуетувеличиваетлетальность.нарастаниюОчевидно,чтоключевыми факторами, определяющими эффективность ИПостК, являетсяпродолжительностипревышениепредшествующейпродолжительностиишемии.По-видимому,глобальнойишемиикритическоесопряженосвозникновением необратимого ишемического повреждения нейронов в зонеишемиииопределяетпосткондиционирования.эффектапринеэффективностьТакжеприменениипоследующегонаблюдаемоеИПостКможетнарастаниеишемическогоповреждающегообъяснятьсяпроявлениемкумулятивного повреждающего эффекта повторных стимулирующих воздействийпри применении ИПостК.4.4 Роль AMPA–рецепторов в обеспечении эффектов ишемическогопосткондиционирования головного мозгаВ данном фрагменте работы была изучена роль AMPA–рецепторов вреализации нейропротективного эффекта ИПостК.
Имеющиеся в литературеданные позволяют предположить, что одним из механизмов нейропротективногоэффектаИПостКможетявлятьсяослаблениепроявленийфеноменаэксайтотоксичности. Наряду с NMDA- и каинатными рецепторами, ключевая206рольвреализацииэксайтотоксичностипринадлежитпостсинаптическимрецепторам альфа-амино-3-гидрокси-5-метил-4-изоксазол-пропионовой кислоты AMPA–рецепторам (Harukuni I., Bhardwaj A., 2006). Ряд исследованийсвидетельствует о том, что применение блокаторов AMPA–рецепторов в периодереперфузии способствует сохранению жизнеспособности нейронов (SheardownM.J. et al., 1993; Gorter J.A. et al., 1997; Kawasaki-Yatsugi S. et al., 1997).
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
