Диссертация (1144791), страница 35
Текст из файла (страница 35)
Можно предположить, что применение ИПостКреализует свой нейропротективный потенциал через изменение характера189активациииммуннойсистемы,котораяизменяетсявзависимостиотдлительности реперфузионного периода.4.2 Эффект ишемического посткондиционирования при фокальной ишемииголовного мозга у крыс4.2.1. Протокол эксперимента по изучению эффектов ишемическогопосткондиционирования при фокальной ишемии головного мозга у крысЭкспериментпосвященизучениюинфаркт–лимитирующегоэффектаИПостК у крыс Wistar, имеющих различные типы строения корковой ветви СМА.У всех крыс, которым была проведена трепанация черепа, проводиливизуальную оценку анатомического строения корковой ветви СМА. Частотавстречаемости каждого варианта строения СМА представлена в виде доликаждого типа СМА, которая вычислялась как отношение числа животных сотдельным типом строения к общему числу животных с проведеннойтрепанацией черепа, включенных в данный эксперимент.Для анализа инфаркт–лимитирующего эффекта ИПостК при фокальнойишемии головного мозга у крыс был специально разработан протокол проведенияэксперимента.
После определения типа строения корковой ветви СМА, крысыбыли случайной выборкой разделены на следующие экспериментальные группы:1.Животные с магистральным типом строения корковой ветви СМА:1) «мЛО»(n=8).Вгруппувходилиложнооперированныекрысысмагистральным типом строения СМА, находившиеся под наблюдениемпосле операции в течение 2 суток;2) «мИшемия» (n=10). В группу были включены крысы с магистральнымтипом строения корковой ветви СМА. У животных данной группы, как ивсех последующих групп, проводили перманентную окклюзию СМА и 30минутную окклюзию ЛОСА с последующим периодом реперфузии втечение 2 суток;1903) «мПостК» (n=8).
После 30-минутной окклюзии ЛОСА выполнялось 5эпизодов реперфузии/реокклюзии ЛОСА по 10 с/10 с.2.Животные с рассыпным типом строения корковой ветви СМА:1) «рЛО» (n=6). В группу вошли ложнооперированные крысы с рассыпнымтипом строения СМА, находившиеся под наблюдением после операции втечение 2 суток;2) «рИшемия» (n=7). Фокальная ишемия моделировалась у животных срассыпным типом строения корковой ветви СМА;3) «рПостК» (n=6). После 30-минутной окклюзии ЛОСА выполнялось 5эпизодов реперфузии/реокклюзии ЛОСА по 10 с/10 с.3. Животные со смешанным типом строения корковой ветви СМА:1) «сЛО» (n=6).
В группу вошли ложнооперированные крысы со смешаннымтипом строения СМА;2) «сИшемия» (n=7). Фокальная ишемия моделировалась у животных сосмешанным типом строения корковой ветви СМА;3) «сПостК» (n=6). После 30 минутной окклюзии ЛОСА выполнялось 5эпизодов реперфузии/реокклюзии ЛОСА по 10 с/10 с.После завершения периода реперфузии оценивали летальность. Выжившихживотных под повторным наркозом декапитировали и проводили оценку размераинфаркта головного мозга гистохимическим способом.4.2.2 Влияние ишемического посткондиционирования на размер инфаркта взависимости от анатомического варианта строения корковой ветви среднеймозговой артерии при фокальной ишемии головного мозга у крысУ 60 крыс Wistar была проведена визуальная оценка анатомическоговарианта строения корковой ветви СМА.
Частота встречаемости каждоговарианта строения дистального сегмента СМА составила: магистральный типнаблюдался у 26 (43,3%) животных, рассыпной – у 20 (33,3%) животных,смешанный – у 14 (23,3%) животных.191Фокальная ишемия головного мозга была проведена 44 крысам Wistar. Ко2-м суткам после операции в группах ложнооперированных животных «мЛО»,«рЛО» и «сЛО» летальных исходов не наблюдалось (табл. 4.10). В группах:«мИшемия», «рИшемия» и «сИшемия» ко 2-м суткам реперфузионного периодалетальность составила 10, 14,3 и 14,3%, соответственно, и значимо не отличаласьот таковой в группах с соответствующим анатомическим вариантом строениякорковой ветви СМА и с применением ИПостК – «мПостК», «рПостК» и«сПостК» (Р>0,05).Размер моделируемого инфаркта головного мозга существенно различалсясреди животных с различным вариантом строения СМА и в группах «мИшемия»,«рИшемия» и «сИшемия» составил 18,9 ± 1,49, 9,8 ± 5,26 и 12,3 ± 2,33%,соответственно (рис.
4.15). При этом, размер инфаркта в группе «рИшемия» былзначимо меньше при сравнении с таковым в группе «мИшемия» (Р<0,01). Крометого, при рассыпном типе строения корковой ветви СМА (группа «рИшемия»)отмечалась набольшая вариабельность размера инфаркта 9,8 ± 5,26% (Max 16,4 –Min 5,4) (рис. 4.16).Таблица 4.10Летальность крыс Wistar с различным анатомическим вариантом строениякорковой ветви средней мозговой артерии после фокальной ишемии головногомозга с последующим применением ишемического посткондиционированияЭкспериментальные группыс магистральным типом строения корковой ветви средней мозговой артериимЛОмИшемиямПостК10,012,50(1/10)(1/8)с рассыпным типом строения корковой ветви средней мозговой артериирЛОрИшемиярПостК14,316,70(1/7)(1/6)со смешанным типом строения корковой ветви средней мозговой артериисЛОсИшемиясПостК14,316,70(1/7)(1/6)192Наблюдаемое явление может объясняться неодинаковой эффективностьюколлатерального кровообращения в области ишемии у животных с различнымивариантами строения СМА.
Возможно, что многочисленные мелкие ветви у крысс рассыпным типом строения СМА имеют лучшую связь с кортикальнымианастомозами, которые обеспечивают коллатеральное кровообращение изпередней и задней ипсилатеральной мозговой артерии. Однако нельзя исключатьналичие дополнительных маленьких ветвей СМА при рассыпном типе, которые,возможно, остаются за переделами трепанационного окна и могут способствоватьуменьшению зоны инфаркта в группе «рИшемия».Рис. 4.15.
Инфаркт головного мозга крыс Wistar с различными анатомическими вариантамистроения корковой ветви средней мозговой артерии: 1 – магистральный тип строения; 2 –рассыпной тип строения; 3 – смешанный тип строения. Окраска трифенилтетразолием хлоридом.193Также необходимо отметить, что, по мнению некоторых авторов, вциркуляторно-метаболическом обеспечении деятельности головного мозга особоезначение имеют еще две системы, а именно, внутричерепная ликвородинамика ибиомеханические свойства черепа (Москаленко Ю.Е.
с соавт, 2010). Былопоказано положительное влияние трепанации на внутричерепную гемо- иликвородинамику у пациентов нейрохирургической клиники, которым помедицинским показаниям было наложено трепанационное отверстие в костяхчерепа (Москаленко Ю.Е. с соавт, 2008). Возможно, у животных с магистральнымтипом строения СМА регуляторно-адаптивные возможности внутричерепнойликвородинамики и биомеханические свойства черепа минимальны примоделируемом ишемическом повреждении головного мозга.Установленные закономерности необходимо учитывать при проведениифундаментальных исследований ишемического повреждения головного мозга, атакже при исследовании нейропротективных воздействий на данной модели,поскольку преобладание в экспериментальной группе животных с рассыпнымтипомстроениякорковойложноположительноговетвирезультата.СМАЭтиможетданныепривестипозволяюткполучениюрекомендоватьисключать из исследования животных, имеющих рассыпной тип строениядистального сегмента СМА.19425P<0,05P>0,05P>0,05Размер инфаркта, %20151050мИшемиямПостКрИшемиярПостКсИшемиясПостКРис.
4.16. Размер инфаркта головного мозга крыс Wistar с различными анатомическимивариантами строения корковой ветви средней мозговой артерии при фокальной ишемииголовного мозга с последующим применением ишемического посткондиционирования.Применение ИПостК ко 2-м суткам реперфузии в группе «мПостК»приводило к значимому уменьшению размера инфаркта головного мозга (до 8,4 ±2,64%, Р<0,05) при сравнении с таковым в группе «мИшемия» (рис. 4.16).Наличие нейропротективного эффекта ИПостК согласуется с результатамиисследования, проведенного ранее на крысах Sprague-Dawley с использованиемдругого протокола ИПостК (Zhao H. et al., 2006).
Так, после постоянной окклюзииСМА и билатеральной окклюзии ОСА на 15, 30 и 60 минут последующееприменение 3 эпизодов 10 с реперфузии и 30 с окклюзии ОСА приводило куменьшению площади повреждения на 80, 51 и 17%, соответственно (Zhao H. etal., 2006).Таким образом, в нашем исследовании и в указанной работе фокальнаяишемия моделировалась путем постоянной окклюзии корковой ветви СМА,кровоснабжающейпреимущественнокоруголовногомозга,апосткондиционирующие эпизоды проводилось при помощи окклюзии ОСА.Следовательно, нейропротективное действие ИПостК реализовалось фактически195в зоне пенумбры, поскольку коротким ишемическим стимулам подвергаласьчасть головного мозга, кровоснабжающаяся из ОСА.Выбор экспериментальной модели играет ключевую роль при проведениифундаментальных физиологических исследований, а также при исследованиимеханизмов физиологической адаптации к неблагоприятным факторам внешней ивнутренней среды организма.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
