Диссертация (1144791), страница 41
Текст из файла (страница 41)
et al., 2003; Lee H.J. et al., 2009). Эта экспериментальная модельпозволяет изучать механизмы ишемического повреждения мозга, а такжеособенности нейропротективных воздействий, выполненных как в острую стадиюповреждения, так и в стадию частичного восстановления мозгового кровотока засчет коллатерального кровообращения. В нашем исследовании мы проводилианализ неврологического статуса и летальности к концу острого периода223ишемического повреждения мозга у крыс. Эти показатели в группе «Ишемия» неотличались от аналогичных показателей, наблюдаемых в других исследованиях сприменением данной экспериментальной модели (Atochin D.N.
et al., 2003; LeeH.J. et al., 2009).Применение раннего ИПреК в виде одного 5-минутного ишемическогостимулирующего воздействия (группа «ПреК») до билатеральной окклюзии ОСАне влияло на показатели неврологического дефицита и летальности присравнении с аналогичными показателями в группе «Ишемия» (Р>0,05) (табл.
5.1,табл. 5.2). Раннее ИПреК, представленное в виде трех последовательныхстимулирующих воздействий ишемией-реперфузией по 5 минут (группа«3ПреК»), выполненных за 5 минут до моделирования билатеральной окклюзииОСА, приводило к увеличению летальности до 57,5% ко 2-м суткам наблюдений,однако с группой «Ишемия» значимых различий обнаружить не удалось (Р=0,39),причем необходимо отметить, что 35,0% (14 из 40 животных) погибали во времяпроведения стимулирующих воздействий ишемией-реперфузией и из 26перенесших ишемические стимулы животных только 9 животных (34,6% от числавыживших) погибали на 2-е сутки после моделирования ишемии головного мозга(табл.
5.1). Животные группы «3ПреК», перенесшие три стимулирующихвоздействия ишемией-реперфузией и выжившие ко 2-м суткам острой ишемииголовного мозга, имели глубокий неврологический дефицит. Коэффициентневрологического дефицита у животных группы «3ПреК» составил 14,8 (min 8 –max 18) и был значимо выше, чем в группе «Ишемия» (Р<0,05) (табл. 5.1).Выполнение позднего ИПреК, в виде одного 5-минутного ишемическогостимулирующего воздействия за 24 реперфузии перед постоянной окклюзиейОСА в группе «ПреК 24» способствовало значимому снижению тяжестиневрологического дефицита ко 2-м суткам наблюдения при сравнении с группой«Ишемия» (Р<0,05) (табл. 5.1).
Показатель летальности понижался до 39,5%,однако достоверных различий с группой «Ишемия» обнаружить не удалость(Р=0,17) (табл. 5.2).2245.2.2 Эффекты раннего и позднего ишемического прекондиционирования приглобальной ишемии-реперфузии переднего мозга у монгольских песчанокУ песчанок монгольских раннее ИПреК, представленное в виде одного 2минутного ишемического стимулирующего воздействия, выполненного за 5минут до моделирования 7-минутной ишемии головного мозга (группа«1ПреК5») ко 2-м суткам наблюдения приводило к нарастанию симптомовневрологического дефицита и летальности при сравнении с аналогичнымипоказателями в группе «Ишемия 2а», однако значимых различий обнаружено небыло (Р>0,05) (табл.
5.3, табл. 5.4).Таблица 5.3Индекс неврологического дефицита монгольских песчанок при глобальнойишемии-реперфузии переднего мозга после применения различных вариантовишемического прекондиционированияИшемия 2а0,67(0 – 2)Экспериментальная группаМе (min-max)1ПреК52ПреК 51ПреК 241,142,67*0,56(0 – 2)(1 – 4)(0 – 2)2ПреК 242,25*(1-3)Различия значимы: * по сравнению с показателем в группе «Ишемия 2а» при Р<0,01.Раннее ИПреК у песчанок монгольских, представленное в виде двухпоследовательных ишемических стимулирующих воздействий по 2 минуты,разделенных реперфузией по 5 минут (группа «2ПреК 5»), приводило ксущественному нарастанию выраженности неврологических нарушений в видезапрокидыванияголовы,птоза,судорог,двигательнойгиперактивности.Коэффициент неврологического дефицита увеличивался до 2,67 (min 1 – max 4) ибыл значимо выше, чем в группе «Ишемия 2а» (Р<0,01) (табл.
5.3). Летальностьувеличивалась до 45,5% и также была значимо выше, чем в группе «Ишемия 2а»(Р<0,05) (табл. 5.4). Также необходимо отметить, что 36,4% (4 из 11 песчанок)погибали на второй минуте 7-минутной ишемии после проведения двухстимулирующих воздействий ишемией-реперфузией.225Таблица 5.4Летальность монгольских песчанок при глобальной ишемии-реперфузиипереднего мозга после применения различных вариантовишемического прекондиционированияИшемия 2а10,0(1/10)Экспериментальная группа1ПреК52ПреК 51ПреК 2412,545,5*10,0(1/8)(5/11)(1/10)2ПреК 2442,9*(3/7)Различия значимы: * по сравнению с показателем в группе «Ишемия 2а» при Р<0,05.Позднее ИПреК, выполненное в виде одного 2-минутного ишемическоговоздействия за 24 ч перед 7-минутной обратимой окклюзией ОСА у песчанокмонгольских в группе «1ПреК 24» способствовало некоторому снижениютяжести неврологических симптомов, но значимых различий в значениикоэффициента неврологического дефицита и летальности при сравнении стаковыми в группе «Ишемия 2а» обнаружено не было (Р>0,05) (табл.
5.3, табл.5.4).Ко 2-м суткам реперфузионного периода после обратимой 7-минутнойишемии позднее ИПреК, представленное в виде двух 2-минутных ишемическихстимулирующих воздействий, разделенных 5-минутным интервалом реперфузиии выполненное за 24 часа (группа «2ПреК 24») приводило к значимомунарастанию симптомов неврологического дефицита песчанок и увеличениюлетальности по сравнению с показателями в группе «Ишемия 2а» (Р<0,05) (табл.5.3, табл. 5.4).2265.3 Морфологические изменения структур головного мозга при примененииишемического прекондиционирования5.3.1 Влияние ишемического прекондиционирования на изменения нейроновкоры головного мозга и гиппокампав острой фазе хронической церебральной гипоперфузии у крысКо2-мсуткампослемоделированияхроническойцеребральнойгипоперфузии при гистологическом анализе фронтальных срезов головного мозгакрыс группы «Ишемия» были обнаружены морфологические изменения нейроновв пирамидном слое полей СА1, СА2, СА3 и СА4 гиппокампа и в слоях II, III и Vкоры мозга при сравнении с ложнооперированными животными группы «ЛО».Изменения выражались в виде уменьшения числа морфологически неизмененныхнейронов, а также в виде сморщивания и набухания, гиперхроматоза ихроматолиза клеток, обширного перицеллюлярного и периваскулярного отека(рис.
5.3). В слоях II и III коры головного мозга наблюдалось значимоеуменьшение числа морфологически неизменных нейронов на 20,8 (Р<0,05) и13,9% (Р<0,05), соответственно, при сравнении с таковым в группе «ЛО» (табл.5.5). При морфометрическом анализе полей гиппокампа ко 2-м суткамнаблюдений в группе «Ишемия» наиболее интенсивная гибель нейронов былаобнаружена в полях СА1 и СА3; количество неизмененных нейроновуменьшалось на 49,4 (Р<0,01) и 18,4% (Р<0,05), соответственно, при сравнении стаковым в аналогичных полях гиппокампа группы «ЛО» (табл. 5.6).227АБВГДЕРис. 5.3. Пирамидный слой поля СА1 гиппокампа крыс Wistar. А – схематичное изображение; Б –«ЛО» ложнооперированные животные, находившиеся под наблюдением 2 суток; В – «Ишемия» перманентнаябилатеральная окклюзия общих сонных артерий (ОСА) с последующей репефузией 2 суток; Г – «ПреК»применение одного прекондиционирующего стимула за 5 минут до перманентной билатеральная окклюзия ОСА споследующей репефузией 2 суток; Д – «3ПреК» применение трех прекондиционирующих стимулов за 5 минут доперманентной билатеральная окклюзия ОСА с последующей репефузией 2 суток; Е – «ПреК 24» - применениеодного прекондиционирующего стимула за 24 часа до перманентной билатеральная окклюзия ОСА споследующей репефузией 2 суток.
Нормальные пирамидные нейроны гиппокампа имеют круглые интенсивноокрашенные ядра, а нейроны в стадии некроза и некробиоза - пикноз ядра. Окраска гематоксилин и эозин (х400,об. 40, ок.10).228Проведенный нами морфологический и морфометрический анализ слоевкоры мозга и полей гиппокампа крыс в группе «Ишемия» к концу острогопериода ишемического повреждения головного мозга не выявил существенныхотличий от результатов, полученных в других исследованиях с применениемиспользованнойэкспериментальноймоделиишемическогоповрежденияголовного мозга у крыс (Atochin D.N.
et al., 2003; Lee H.J. et al., 2009).Таблица 5.5Количество морфологически неизмененных нейронов в слоях коры головногомозга крыс в острую фазу хронической церебральной гипоперфузии послеприменения различных вариантов ишемического прекондиционирования(на 1 мм2 на срезе)Слои коры головного мозгаЭкспериментальнаягруппаII352±12280±10*284±12222±11+299±12ЛОИшемияПреК3ПреКПреК 24III339±13292±12*298±10213±11++301±13Различия значимы: * по сравнению с показателем в группе «ЛО» при Р<0,05;группе «Ишемия» при Р<0,05;++V196±10185±12188±8172±10181±10+по сравнению с показателем впри Р<0,01.Применение раннего ИПреК в виде одного 5-минутного ишемическогостимулирующего воздействия (группа «ПреК») до постоянной билатеральнойокклюзии ОСА не приводило к значимому изменению числа морфологическинеизмененных нейронов слоев II, III и V коры головного мозга и полей СА1, СА2,СА3 и СА4 гиппокампа при сравнении с аналогичными показателями в группе«Ишемия» (Р>0,05) (табл.
5.5, табл. 5.6). У животных группы «3ПреК»,перенесших раннее ИПреК представленное в виде трех последовательныхстимулирующих воздействий ишемией-реперфузией по 5 минут выполненных за5 минут реперфузии до моделирования билатеральной окклюзии ОСА ивыживших ко 2-м суткам острой ишемии головного мозга, в полях СА1 и СА3гиппокампа, а также в слоях II и III коры мозга наблюдалось значимое229уменьшение количества морфологически неизмененных нейронов на 40,6(Р<0,01), 15,9 (Р<0,05), 27,1 (Р<0,01), 20,8% (Р<0,05) соответственно присравнении с таковыми в аналогичных полях гиппокампа и слоях коры группы«Ишемия» (рис.
5.1, табл. 5.5, табл. 5.6).Таблица 5.6Количество морфологически неизмененных нейронов в полях гиппокампа крыс вострую фазу хронической церебральной гипоперфузии после примененияразличных вариантов ишемического прекондиционирования(на протяжении 1 мм на срезе)ЭкспериментальнаягруппаЛОИшемияПреК3ПреКПреК 24Поля гиппокампаСА1327±11166±15*159±2198±13+205±18++СА2187±11179±11181±10176±10182±10СА3186±11151±11**148±10128±12++159±10Различия значимы: * по сравнению с показателем в группе «ЛО» при Р<0,01; ** при Р<0,05;показателем в группе «Ишемия» при Р<0,01; ++ при Р<0,05.СА4127±12117±10116±13111±12120±9+по сравнению сВыполнение позднего ИПреК, представленного в виде одного 5-минутногоишемического стимулирующего воздействия за 24 ч перед постоянной окклюзиейОСА в группе «ПреК 24» способствовало значимому увеличению количестваморфологически неизмененных нейронов на 24,2% в поле СА1 гиппокампа присравнении с таковым в группе «Ишемия» (Р<0,05), при этом в поле СА3гиппокампа и в слоях II и III коры головного мозга также отмечалось увеличениечисла неизмененных нейронов по сравнению с группой «Ишемия», однаконаблюдаемые различия были недостоверны (Р>0,05) (табл.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
