Диссертация (1144749), страница 29
Текст из файла (страница 29)
Так, содержание нейромедиатора при объединении данныхпо стадиям цикла (диэструс и проэструс) составило: 10,01,3 нг/мг белка (5 ч ЦВ),10,30,5 нг/мг белка (9:30 ч ЦВ) и 6,80,4 нг/мг белка (11 ч ЦВ) (рисунок 3.8). При этом важноотметить, что максимальной величины уровень содержания НА в этой гипоталамическойструктуре достигает в интервале времени с 5 ч до 9:30 ч ЦВ, что соответствует, как показалинаши дальнейшие эксперименты, времени оптимального проявления преовуляторного пикасекреции ГнРГ.117121412***59:30циркадианное время, ч10*86*48нг/мг белканг/мг белка106422059:30110циркадианное время, чПроэструсДиэструс11* – различия с показа-телем в 9:30 ч*, ** – различия с показателем в 11 чциркадианного времени в той же группециркадианного времени достоверныдостоверны (p<0,01; U-тест)(*p<0,05; **p<0,001; U-тест)Рисунок 3.7 – Суточная динамикаРисунок 3.8 – Суточная динамикасодержания норадреналинасодержания норадреналинав медиальной преоптической областив медиальной преоптической областигипоталамуса самок крыс на различныхгипоталамуса самок крысстадиях эстрального цикла(объединенные данные по стадиям(M±m, n=6-7)диэструса и проэструса; M±m, n=13-14)Другой нейромедиатор, ДА, не претерпевал достоверных суточных изменений в этойгипоталамической структуре.
Отмечена лишь тенденция к снижению его уровня в период с 5 чдо 11 ч ЦВ на стадии диэструса и к повышению его содержания в 9:30 ч ЦВ на стадиипроэструса (рисунок 3.9).В СВ-Арк гипоталамуса также наблюдались изменения в содержании биогенных аминов,отличные от динамики их уровня в МПО гипоталамуса. Так, в этой гипоталамическойструктуре не было обнаружено суточных ритмов содержания НА. На обеих стадияхэстральногоциклафиксировалсяпрактическипостоянныйуровеньнейромедиаторана протяжении всего дня (рисунок 3.10).
Содержание же ДА в СВ-Арк гипоталамуса, напротив,имело выраженную суточную динамику, с повышением уровня биогенного амина в вечерниечасы (рисунок 3.11). Уровень нейромедиатора составил на стадии проэструса: 7,01,3 нг/мг11891281078нг/мг белканг/мг белка6546432210059:30циркадианное время, чПроэструс11Диэструс59:30циркадианное время, чПроэструс11ДиэструсРисунок 3.9 – Суточная динамикаРисунок 3.10 – Суточная динамикасодержания дофамина в медиальнойсодержания норадреналинапреоптической области гипоталамусав срединном возвышении с аркуатнымисамок крыс на различных стадияхядрами гипоталамуса самок крысэстрального цикла (M±m, n=5-8)на различных стадиях эстральногоцикла (M±m, n=6-8)белка (5 ч ЦВ), 9,42,0 нг/мг белка (9:30 ч ЦВ) и 10,91,0 нг/мг белка (11 ч ЦВ); на стадиидиэструса: 6,90,8 нг/мг белка (5 ч ЦВ), 6,41,0 нг/мг белка (9:30 ч ЦВ) и 13,21,8 нг/мг белка(11 ч ЦВ). С помощью Н-теста Крускала-Уоллиса была подтверждена зависимость содержанияДА в данной гипоталамической области от временного показателя (Н=11,910; p<0,01).Так, при объединении данных по стадиям цикла (диэструс и проэструс) содержаниенейромедиатора в исследуемой области гипоталамуса составило: 6,90,7 нг/мг белка (5 ч ЦВ),8,11,3 нг/мг белка (9:30 ч ЦВ) и 12,01,0 нг/мг белка (11 ч ЦВ) (рисунок 3.12).Можно полагать, что именно суточная динамика содержания НА в МПО и ДА в СВ-Аркгипоталамуса играет важную роль в формировании преовуляторного пика секреции ГнРГ.Суточное изменение активности норадренергической и дофаминергической нейромедиаторныхсистем может быть тем самым механизмом, благодаря которому создается «интервалчувствительности» гонадолиберинергических нейронов к стимулирующему циркадианномусигналу, поступающему из СХЯ гипоталамуса.
Ранее был обнаружен моносинаптический путь,11916141412*86**4*10*10нг/мг белканг/мг белка12**86422059:30циркадианное время, чПроэструс1105Диэструс9:30циркадианное время, ч11* – различия с показателем в 5 ч циркадианного*, ** – различия с показателем в 11 чвремени в той же группе достоверны (p<0,05;циркадианного времени достоверныU-тест); ** – различие с показателем в 11 ч(*p<0,01; **p<0,001; U-тест)циркадианного времени в той же группеРисунок 3.12 – Суточная динамикадостоверно (p<0,05; U-тест)содержания дофамина в срединномРисунок 3.11 – Суточная динамикавозвышении с аркуатными ядрамисодержания дофамина в срединномвозвышении с аркуатными ядрамигипоталамуса самок крыс на различныхгипоталамуса самок крыс(объединенные данные по стадиямдиэструса и проэструса; M±m, n=12-14)стадиях эстрального цикла(M±m, n=6-8)связывающий нейроны СХЯ с гонадолиберинергическими нейронами МПО гипоталамуса[van der Beek E.
M., 1996; Palm I. F. et al., 1999]. Предполагается также наличиемультисинаптическогопути,связывающегоСХЯсСВгипоталамуса,основнымнейрогемальным органом, выделяющим ГнРГ в портальную кровеносную систему гипофиза[Horvath T. L., 1997]. Известно, что СХЯ гипоталамуса имеют эфферентные пути, идущиек аркуатным ядрам гипоталамуса, где располагается большоеколичество дофаминергическихнейронов [Horvath T.
L., 1997], а также пути, идущие к зонам продолговатого мозга, каудальнаявентролатеральная часть которого содержит норадренергические нейроны, проецирующие своиволокна через вентральный пучок в МПО гипоталамуса [Бабичев В. Н., 1995; Saeb-Parsy K.et al., 2000].
Несмотря на то, что роль СХЯ гипоталамуса в протекании эстрального циклав настоящее время ни у кого не вызывает сомнений, и за последние десятилетия накопился120значительный массив данных, позволяющих предположить, что суточные изменениясодержания биогенных аминов в гипоталамических структурах, участвующих в регуляциирепродуктивной функции, обусловлены функционированием этого циркадианного осциллятора[Wise P. M., 1994; Wise P. M. et al., 1997; Reuss S. et al., 1999; Sellix M. T., Freeman M. E., 2003],многие вопросы, связанные с молекулярной организацией этого явления у животныхс сезонным и несезонным размножением, а также у человека, по-прежнему остаютсяневыясненными.Полученные нами ранее данные о суточной динамике содержания ДА в МПОгипоталамуса не выявили достоверных различий в уровне нейромедиатора, однаковарьирующиеся тенденции его суточных изменений на стадиях диэструса и проэструса,обнаруженные в этом эксперименте, снижение его среднесуточного содержания на стадиипроэструса, а также противоречивые данные литературы о роли этого катехоламинав процессе синтеза ГнРГ позволили выдвинуть предположение о том, что ДА в МПОгипоталамуса, возможно, играет роль не столько активного нейромедиатора, сколькопредшественника НА в норадрененергических нейронах.
В результате исследований,проведенных в нашей лаборатории, было установлено, что суточная динамика содержания НАв МПО гипоталамуса не связана с соответствующим изменением активности МАО[Разыграев А. В., 2007], поэтому можно предположить, что она опосредована либо активностьюКОМТ, либо снижением активности дофамин--гидроксилазы.Для оценки участия дофамин--гидроксилазы в наблюдаемых изменениях суточнойдинамики содержания катехоламинов был использован коэффициент соотношения уровнейНА/ДА.
В МПО гипоталамуса было выявлено достоверное (U=5; p<0,05) снижение данногопоказателя на стадии проэструса в период с 5 ч до 11 ч ЦВ (рисунок 3.13), что вероятно,характеризует уменьшение активности дофамин--гидроксилазы, которое в свою очередьможет обеспечивать резкое снижение уровня НА в вечерние часы, при этом изменениякоэффициента НА/ДА, наблюдаемого на стадии проэструса, на стадии диэструса выявленоне было. Это наблюдение позволяет предположить, что изменение содержания НА в МПОгипоталамуса контролируется как сигналами, поступающими из СХЯ гипоталамуса,так и уровнем половых гормонов в крови. Можно предположить, что МПО гипоталамусавыполняет релейную функцию, передавая гонадолиберинергическим нейронам от СХЯгипоталамуса циркадианный сигнал, который может либо ингибироваться, либо активироватьсяв зависимости от уровня половых гормонов в крови.
Эта гипотеза подтверждается даннымилитературы о том, что антеровентральная перивентрикулярная зона МПО гипоталамуса богатанейронами, которые содержат рецепторы к эстрогенам [Simerly R. B. et al., 1990] и к которымнаправляются проекции вазопрессинергических нейронов СХЯ гипоталамуса [Kalra S. P., 1993].121В другой структуре гипоталамуса, СВ-Арк, характер суточных изменений коэффициентаНА/ДА сходен на стадиях диэструса и проэструса, но наиболее выражен на стадии проэструсаи также снижается в интервале времени с 5 ч до 11 ч ЦВ (рисунок 3.14), что подтверждает9281,871,6**1,461,25ед.ед.*4*310,80,620,410,20059:30циркадианное время, чПроэструс11Диэструс59:30циркадианное время, чПроэструс11Диэструс* – различие с показателем в 5 ч циркадианного* – различие с показателем в 11 чвремени на той же стадии эстрального циклациркадианного времени на той же стадии(проэструс) достоверно (p<0,05; U-тест)эстрального цикла (проэструс) достоверноРисунок 3.13 – Суточная динамика(p<0,05; U-тест); ** – различие с показателемкоэффициента норадреналин/дофаминв 11 ч циркадианного времени на той же стадиив медиальной преоптической областигипоталамуса самок крыс на различныхстадиях эстрального цикла(M±m, n=5-8)эстрального цикла (диэструс) достоверно(p<0,05; U-тест)Рисунок 3.14 – Суточная динамикакоэффициента норадреналин/дофаминв срединном возвышении с аркуатнымиядрами гипоталамуса самок крысна различных стадиях эстральногоцикла (M±m, n=6-8)активное участие ДА в регуляторных процессах на уровне СВ-Арк гипоталамуса, котороереализуется за счет вечернего повышения содержания нейромедиатора в этой структуре.Относительное постоянство уровня НА в этой области гипоталамуса в течение дня,при снижении коэффициента НА/ДА, вероятнее всего, связано с изменением активностиферментов метаболизма НА.122В дополнение к исследованию суточной динамики содержания биогенных аминовв структурах гипоталамуса, ответственных за синтез и секрецию ГнРГ, и влияния на нее уровняполовых стероидов в крови, нами также было изучено их воздействие на среднесуточноесодержание исследуемых нейромедиаторов в гипоталамусе.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
