Диссертация (1144749)
Текст из файла
РОССИЙСКАЯ АКАДЕМИЯ МЕДИЦИНСКИХ НАУКСЕВЕРО-ЗАПАДНОЕ ОТДЕЛЕНИЕФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ«НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТАКУШЕРСТВА И ГИНЕКОЛОГИИ ИМ. Д. О. ОТТА»На правах рукописиКореневский Андрей ВалентиновичНАРУШЕНИЕ ГИПОТАЛАМИЧЕСКОЙ РЕГУЛЯЦИИРЕПРОДУКТИВНЫХ ЦИКЛОВ ПРИ ВОЗДЕЙСТВИИНЕБЛАГОПРИЯТНЫХ ЭКОЛОГИЧЕСКИХ ФАКТОРОВ03.03.01 («Физиология»)03.01.04 («Биохимия»)Диссертацияна соискание ученой степенидоктора биологических наукНаучный консультант:з.д.н.
РФ, д.б.н., проф. Арутюнян А. В.Санкт-Петербург 20152ОГЛАВЛЕНИЕВВЕДЕНИЕ…………………………………………………………………………………..............ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ1.1.516Гипоталамо-гипофизарная регуляция репродуктивной функции женскогоорганизма………………………………………………………………………….161.2.Роль пинеальной железы в регуляции репродуктивной функции…………......401.3.Возрастные нарушения гипоталамической регуляции репродуктивнойфункции……………………………………………………………………………501.4.Изменение содержания пинеального мелатонина при старении………………571.5.Влияние пептидных биорегуляторов на репродуктивную функцию………….611.6.Воздействиеэкзогенныхнейротоксическихксенобиотиковтолуолаи 1,2-диметилгидразина на гипоталамо-гипофизарное звено регуляциирепродуктивной системы…………………………………………………………1.7.ВоздействиеэндогенногоL-гомоцистеинананейротоксическогогипоталамо-гипофизарное66ксенобиотиказвенорегуляциирепродуктивной функции………………………………………………………...82ГЛАВА 2.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ………………………………......922.1.Животные……………………………………………………………………….....922.2.Реактивы и препараты…………………………………………………………….922.3.Общая схема эксперимента………………………………………………………942.4.Выделение и препарирование структур мозга, осуществляющих регуляциюэстральных циклов………………………………………………………………..2.5.Определениеуровнягонадолиберинавструктурахмозгаиммуноферментным методом…………………………………………………....2.6.ОпределениеуровняполовыхгормоноввсывороткеОпределениевструктурахсодержаниямозгабиогенныхметодомаминовиихметаболитоввысокоэффективнойжидкостнойхроматографии с электрохимическим детектированием…………………...….2.8.ОпределениеуровняобщегоL-гомоцистеинавплазме101102кровииммуноферментным методом………………………………...………………….2.9.100кровирадиоиммунологическим методом…………………………………………...….2.7.98103Определение уровня генерации активных форм кислорода в структурахмозга методом люминолзависимой хемилюминесценции…...………………...10332.10.
Определение содержания продуктов перекисного окисления липидоввсывороткекровипотестус2-тиобарбитуровойкислотойспектрофотометрическим методом…………………...…………………………2.11. Определениесодержаниянитритоввсывороткекровиспектрофотометрическим методом………………………………………...……2.12. Определениемоноаминооксидазнойактивностивструктурах104105мозгаспектрофотометрическим методом…………………………...…………………1052.13.
Определение содержания общего белка в структурах мозга и в реакционнойсмеси турбидиметрическим методом……………………………………………1062.14. Статистическая обработка результатов…………………………...…………….107ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ………...1083.1.Содержаниеигонадолиберинасрединномвозвышениивмедиальнойсаркуатнымипреоптическойядрамиобластигипоталамусаи уровень половых гормонов в крови на различных стадиях эстральногоцикла…………………………………………………………………………….....3.2.108Суточная динамика и среднесуточное содержание биогенных аминоввмедиальнойпреоптическойобластиисрединномвозвышениис аркуатными ядрами гипоталамуса на различных стадиях эстральногоцикла……………………………………………………………………...………..3.3.Циркадианныйвхарактермедиальнойдинамикипреоптическойсодержанияобластиибиогенныхсрединномаминоввозвышениис аркуатными ядрами гипоталамуса……………………………………...……...3.4.Влияниесодержаниексенобиотика1,2-диметилгидразинагонадолиберинавмедиальнойнапреоптическойобласти133Влияние ксенобиотиков 1,2-диметилгидразина и толуола на суточнуюдинамикувисреднесуточноемедиальнойпреоптическойсодержаниеобластиибиогенныхсрединномаминоввозвышениис аркуатными ядрами гипоталамуса…………………………………………......3.6.128среднесуточноеи срединном возвышении с аркуатными ядрами гипоталамуса………...……..3.5.111Влияниеметиониновойнагрузки135(гипергомоцистеинемии)на суточную динамику и среднесуточное содержание биогенных аминоввмедиальнойпреоптическойобластиисрединномвозвышениис аркуатными ядрами гипоталамуса…………………………………………..…3.7.Влияние ксенобиотиков 1,2-диметилгидразина, толуола и метиониновойнагрузки на образование активных форм кислорода в медиальной1474преоптической области и срединном возвышении с аркуатными ядрамигипоталамуса и продуктов перекисного окисления липидов в сывороткекрови……………………………………………………………………………….3.8.Коррекция с помощью мелатонина и пептидных биорегуляторов нарушениякатехоламинергическойнейротоксическимрегуляциивоздействиемэстральныхциклов,(1,2-диметилгидразин,вызванногометиониноваянагрузка)…………………………………………………………………………...3.9.152Изменениекатехоламинергическойрегуляцииэстральных157циклову животных различных возрастных групп………………………………………1693.10.
Влияние мелатонина и эпиталона на динамику эстральных циклову молодых и старых животных при различных световых режимах…………...175ЗАКЛЮЧЕНИЕ…………………………………………………………………………………...181ВЫВОДЫ………………………………………………………………………………………….192ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ………………………………………………………….194СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ……………………………………………………………………….194СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ………………………………………………………………………...1965ВВЕДЕНИЕАктуальность темы исследованияСовременный этап развития цивилизации характеризуется все большим вмешательствомчеловека в состояние биосферы.
В ней появляются и накапливаются несвойственные природесоединения, называемые ксенобиотиками. Их присутствие даже в относительно небольшихколичествах при длительном воздействии способно вызывать нарушения различных функцийживого организма.Репродуктивнаякнеблагоприятнымсистемаявляетсяэкологическимоднойфакторамсистемизнаиболееженскогочувствительныхорганизма.Имеютсямногочисленные клинические наблюдения, свидетельствующие о нарушении менструальногоцикла, секреции гонадотропных гормонов, пролактина, половых стероидов у женщин,работающих в присутствии паров таких широко распространенных на промышленныхпредприятиях органических веществ, как бензол, формальдегид, метилметакрилат, стирол,диоксан и др.
[Баласанян И. Г., 1991; Лыткин В. В., Антипова В. Г., 1991; Айламазян Э. К.и соавт., 1997].Важнейшая роль в координации репродуктивной функции млекопитающих принадлежитпроцессам центральной регуляции, которые осуществляет единая нейроэндокринная система,использующая в качестве химических посредников половые гормоны [Шаляпина В. Г., 1991].Процессу овуляции, характерному для женского организма, предшествует ряд гормональныхизменений в организме, среди которых важнейшим является резкое повышение в крови уровнягонадотропных гормонов гипофиза, вызываемое у самок крыс гиперсекрецией гонадолиберина.Для осуществления преовуляторного пика секреции этого нейрогормона необходимовзаимодействие двух сигналов – гормонального, заключающегося в повышении в крови уровнясинтезируемых яичниками стероидов в период, предшествующий овуляции, и циркадианногосигнала, ежедневно поступающего из супрахиазматических ядер гипоталамуса к нейрональнымструктурам, ответственным за синтез и секрецию гонадолиберина [Palm I.
F. et al., 1999; 2001].Обаэтисигналапередаютсякгонадолиберинергическимнейронамопосредованно,через нейромедиаторные системы. Активность этих систем регулируется как эндокриннымпутем, в первую очередь половыми гормонами яичников, так и посредством нейрональныхсвязей с различными функциональными отделами мозга.Несмотря на то что роль главного циркадианного осциллятора, супрахиазматических ядергипоталамуса, в протекании эстрального цикла в настоящее время считается доказанной,многие вопросы, связанные с молекулярной организацией этого процесса у животныхс сезонным и несезонным размножением и особенно у человека остаются невыясненными.6Имеютсяданные,свидетельствующиеоважнойроликатехоламинергическихи пептидергических систем в нейроэндокринной регуляции репродуктивной функции[Chappell P.
E., 2005]. Однако по-прежнему малоизученными остаются вопросы, связанныес изменением в течение суток содержания нейромедиаторов в гипоталамических структурах,ответственных за синтез и секрецию гонадолиберина. Недостаточно изучена роль пинеальнойжелезы и продуцируемого ею мелатонина в регуляции репродуктивных циклов и их возрастныхнарушениях.В последние десятилетия были получены данные о том, что процесс передачициркадианного сигнала к нейромедиаторным системам, участвующим в гипоталамическойрегуляции репродуктивной функции, отличается особой чувствительностью к различныместественным и техногенным воздействиям.
Так, у самок крыс наиболее ранним маркеромвозрастных нарушений эстральных циклов служит исчезновение околосуточных ритмовактивности моноаминергических и опиоидергических систем гипоталамуса [Wise P. M. et al.,1997; Арутюнян А. В., Степанов М. Г., Кореневский А. В., 1998; Goldman J. M. et al., 2008].Экспериментальные исследования показали, что нейротоксические соединения вызываютв первую очередь нарушения центрального, гипоталамо-гипофизарного, звена регуляциирепродуктивной системы [Савченко О. Н., Арутюнян Н. А., Степанов М. Г., 1992;Степанов М.
Г., 1994; Арутюнян А. В. и соавт., 1997]. Поэтому исключительно актуальнойпредставляется задача исследования содержания и суточной динамики биогенных аминовв гипоталамических структурах как индикатора ранних нарушений репродуктивной функциипри воздействии нейротоксикантов.Вследствие увеличения средней продолжительности жизни человека женский организмв течение более 20 лет пребывает в условиях возрастных изменений гормональногогомеостазиса,обусловленныхпрекращениемциклическихпроцессоввженскойрепродуктивной системе. В связи с этим актуальным является изучение механизмов регуляциирепродуктивной функции, ее возрастных изменений с целью разработки мер, направленныхна осуществление контроля и возможное продление репродуктивного периода.
Исследования,проведенные в последние десятилетия, были посвящены раскрытию сложных механизмовразвития нормального функционирования репродуктивной системы и ее естественногоугасания с возрастом. Несмотря на то, что она является одной из наиболее чувствительныхк изменению окружающей среды систем живого организма, отмечается неспецифическийхарактер ее реакции на воздействие различных химических и физических факторов. Этосвидетельствуетобопределенныхнарушенияхцентральныхмеханизмоврегуляциирепродуктивной функции под действием неблагоприятных экологических факторов внезависимости от их природы [Arutjunyan A. V. et al., 2001; Арутюнян А. В.
и соавт., 2003].7К числу эндогенных неблагоприятных факторов, способствующих развитию системногоокислительного стресса в тканях, в том числе и в головном мозге, следует отнестицитотоксичную аминокислоту L-гомоцистеингомоцистеиновуюкислоту,уровеньикоторыхпродуктвегокровяномспонтанного окисленияруслерезковозрастаетпри нарушениях мозгового кровообращения [Yap S., 2003; Зорилова И.
В. и соавт., 2005],а также при недостаточности в организме витаминов группы В, и прежде всего фолиевойкислоты [Miller J. W., 2013]. Гипергомоцистеинемия, вызываемая нарушением метаболизмаL-гомоцистеина, представляет реальную угрозу для здоровья человека в современномурбанистическом обществе. В последние годы появились данные о важной роли нарушенийобмена фолатов и L-гомоцистеина в патогенезе микроциркуляторных и тромботическихосложнений в акушерской практике [Ефимов В. С., Цакалов А.
Характеристики
Тип файла PDF
PDF-формат наиболее широко используется для просмотра любого типа файлов на любом устройстве. В него можно сохранить документ, таблицы, презентацию, текст, чертежи, вычисления, графики и всё остальное, что можно показать на экране любого устройства. Именно его лучше всего использовать для печати.
Например, если Вам нужно распечатать чертёж из автокада, Вы сохраните чертёж на флешку, но будет ли автокад в пункте печати? А если будет, то нужная версия с нужными библиотеками? Именно для этого и нужен формат PDF - в нём точно будет показано верно вне зависимости от того, в какой программе создали PDF-файл и есть ли нужная программа для его просмотра.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
