Диссертация (1144749), страница 28

Просмтор этого файла доступен только зарегистрированным пользователям. Но у нас супер быстрая регистрация: достаточно только электронной почты!

Текст из файла (страница 28)

Ранее нами ужепроводился анализ суточной динамики содержания биогенных аминов в структурахгипоталамуса. Проведенные в нашей лаборатории исследования обнаружили различноесодержание биогенных аминов в утреннее и позднее вечернее время суток [Керкешко Г. О.,2002], что послужило основанием для более детального исследования нами суточной динамикисодержания НА и ДА в структурах гипоталамуса, ответственных за синтез и секрецию ГнРГ.Данное исследование проводилось только на стадии проэструса.

Ранее нами объединялисьданные по стадиям диэструса и проэструса, что не давало возможности получить представленияо зависимости содержания вышеупомянутых нейромедиаторов от изменяющегося фонаполовых гормонов в крови. Другие исследователи в своих работах также отмечали наличиесуточных ритмов содержания различных нейромедиаторов в гипоталамических областях,1133252,520нг/мг белканг/мг белка21510*1,5150,50081012814101214циркадианное в ремя, чциркадианное время, ч* – различие с показателем в 9 ч циркадианногоРисунок 3.4 – Суточная динамикавремени достоверно (p<0,05; U-тест)содержания дофамина в медиальнойРисунок 3.3 – Суточная динамикапреоптической области гипоталамусасодержания норадреналинасамок крыс на стадии проэструсав медиальной преоптической области(M±m, n=6-9)гипоталамуса самок крыс на стадиипроэструса (M±m, n=7-9).связанных с реализацией репродуктивной функции. Так, в некоторых работах, проведенныхнаинтактныхживотныхнастадиидиэструса,характеризующейсяотносительнымпостоянством уровня половых гормонов в крови, были обнаружены суточные изменениясодержания ДА в МПО гипоталамуса с характерным снижением уровня нейромедиаторав дневные часы по сравнению с ночным значением данного показателя, а также изменениясодержания НА в той же гипоталамической структуре, которые носили противоположныйхарактер[ReussS.etal.,1999].Вдругихжеисследованиях,проведенныхна овариэктомированных животных при введения капсулы с эстрадиолом, суточной динамикисодержания ДА в МПО гипоталамуса выявлено не было [MohanKumar S.

M. J.,MohanKumar P. S., 2004]. В исследованиях, проведенных на самцах, были обнаруженыдостоверные изменения в суточной динамике содержания НА в СВ гипоталамуса с пиковымзначением в середине светлого времени суток [Koulu M. et al., 1989], однако ни в данномисследовании, ни в исследованиях, проведенных нами ранее [Керкешко Г. О., 2002], подобныхизменений в организме самок крыс обнаружено не было.217186155нг/мг белканг/мг белка1141294362310*08101214циркадианное время, ч8101214циркадианное время, чРисунок 3.5 – Суточная динамика* – различие с показателем в 9 ч циркадианногосодержания норадреналинавремени достоверно (p<0,05; U-тест)в срединном возвышении с аркуатнымиядрами гипоталамуса самок крысна стадии проэструса (M±m, n=6-8).Рисунок 3.6 – Суточная динамикасодержания дофамина в срединномвозвышении с аркуатными ядрамигипоталамуса самок крыс на стадиипроэструса (M±m, n=5-7)Достаточно трудно сопоставить полученные нами результаты по суточной динамикесодержания НА и ДА в исследованных структурах гипоталамуса с данными литературы, так каксведения о характере этих изменений носят противоречивый характер, что может бытьобусловлено рядом факторов, таких как: возраст животного, пол, стадия эстрального цикла,сезонные различия, изменяющийся световой режим, различие в методах определениябиогенных аминов.

Кроме того, характер суточной динамики содержания биогенных аминовсильно зависит от того, какие конкретно структуры гипоталамуса были подвергнутыисследованию. Так, в различных ядрах, входящих в состав МПО гипоталамуса, активностьмоноаминергических систем может быть различной, а исследование СВ гипоталамуса можетпроводиться с анализом прилегающих к нему аркуатных ядер гипоталамуса, как в нашемэксперименте, или же без них.

Необходимо также отметить, что изменения в содержаниинейромедиаторов могут осуществляться не постепенно, в течение нескольких часов,а за достаточно короткий промежуток времени, что, вероятнее всего, связано с реализациейопределенной функции и относительно быстрым восстановлением их базального уровня.115Подобный характер изменений подразумевает необходимость достаточно частых измерений(некоторыеисследователирегистрируютданныес10-20-минутнымиинтервалами,что представляет собой довольно трудоемкий и времязатратный процесс), а включениев эксперимент небольшого числа временных точек может недостаточно точно отражатькартину суточных изменений уровня нейромедиаторов.ОбнаруженныенамирезкоеснижениесодержаниеНАвМПОгипоталамусаи достоверный подъем содержания ДА в СВ-Арк гипоталамуса совпадают по временис завершением преовуляторного пика секреции ГнРГ.

Кроме того, в эти же часы происходитподъем уровня прогестерона и содержания опиоидных пептидов, а также снижение уровнявазопрессина [Fox S. R. et al., 1990]. Известно, что увеличение секреции прогестерона на стадиипроэструса, на фоне повышенного уровня эстрадиола, происходит за несколько минутдо преовуляторного пика секреции ЛГ [Fink G., Rosie R., Thomson E., 1991], что характеризуетмеханизм положительной обратной связи овариального сигнала активации гипоталамогипофизарного звена регуляции репродуктивной функции. Вазопрессин же является однимиз основных нейромедиаторов, участвующих в передаче циркадианного сигнала запускапроцесса гиперсекреции ГнРГ от СХЯ к МПО гипоталамуса [Kalra S.

P., 1993; Inouye S. T.,1996; Palm I. F. et al., 1999, 2001]. Подобное изменение содержания НА в МПО и ДА в СВ-Аркгипоталамуса именно в этом, достаточно узком, временном интервале может формировать тотсамый нейромедиаторный фон, который необходим для реализации пика секреции ГнРГна стадии проэструса.В результате проведенного исследования возникает вопрос о том, зависят лиобнаруженные суточные изменения содержания НА и ДА в МПО и СВ-Арк гипоталамусаисключительно от работы центрального циркадианного осциллятора, СХЯ гипоталамуса, илиже на эти ритмы влияет изменение уровня освещенности.

До сих пор в литературе нетоднозначных данных, проливающих свет на природу суточной динамики содержаниябиогенных аминов в каких-либо отделах гипоталамуса самок крыс, прежде всего в МПО и СВ.Подавляющее большинство исследований в этом направлении выполнено на самцах.Обусловлено это, по-видимому, тем, что самки представляют собой довольно сложный объектисследования по причине наличия у них половой цикличности, которая связана с изменениямина разных стадиях эстрального цикла уровня в крови половых гормонов, способных влиятьна активность нейромедиаторных систем. Значительная роль в формировании преовуляторногопика секреции ГнРГ отводится именно влиянию на активность моноаминергических нейроновповышенного уровня в крови половых стероидов в день проэструса.

Некоторые авторырассматривают изменения содержания НА и ДА в МПО и СВ гипоталамуса толькокак следствие повышения в крови уровня половых гормонов, не связанное напрямую116с суточными ритмами организма [MohanКumar P. S., ThyagaRajan S., Quadri S. K., 1995], однаконаличие сходных суточных изменений содержания биогенных аминов в условиях искусственносозданного постоянного уровня в крови половых гормонов, пониженного в результатеовариэктомии и повышенного при введении овариэктомированным животным эстрогенов[Wise P.

M. et al., 1997], позволяет предположить, что обнаруженные изменения связаныс системой суточного периодизма.Поэтому в следующей серии экспериментов нами была изучена зависимость суточныхизмененийсодержанияисследуемыхнейромедиатороввструктурахгипоталамуса,ответственных за синтез и секрецию ГнРГ, от стадии эстрального цикла и уровня половыхгормонов в крови, для чего были выбраны три временные точки, достаточно хорошоотражающие основные изменения в стероидном фоне и секреции ГнРГ на стадии проэструса.Кроме того, было проведено исследование суточных ритмов содержания биогенных аминовввышеупомянутыхгипоталамическихструктурахвусловияхсветовойдепривациидля уточнения вопроса об их циркадианной природе.Было обнаружено, что в исследованных областях гипоталамуса наблюдается различнаясуточная динамика содержания биогенных аминов в зависимости от стадии эстрального цикла.Так, было установлено, что в МПО гипоталамуса как на стадии проэструса, так и на стадиидиэструса, при котором уровень половых гормонов в крови остается относительно стабильным,наблюдаются сходные суточные изменения содержания НА (рисунок 3.7).

Содержаниенейромедиатора в исследуемой области гипоталамуса составило на стадии проэструса:11,00,6 нг/мг белка (5 ч ЦВ), 9,70,8 нг/мг белка (9:30 ч ЦВ) и 5,90,4 нг/мг белка (11 ч ЦВ);на стадии диэструса: 10,12,3 нг/мг белка (5 ч ЦВ), 11,00,4 нг/мг белка (9:30 ч ЦВ) и 7,70,5нг/мг белка (11 ч ЦВ). Как будет показано ниже (таблица 3.1, рисунок 3.15), среднесуточноесодержание НА в МПО гипоталамуса не зависит от стадии эстрального цикла; следовательно,независимо от уровня половых стероидов в крови, этот нейромедиатор подвержен постояннымежедневным изменениям с характерным снижением его уровня в узком временном интервалес 9:30 ч до 11 ч ЦВ (р<0,01). В то же самое время с помощью Н-теста Крускала-Уоллиса былаподтверждена зависимость содержания НА в данной гипоталамической области от временногопоказателя (Н=14,247; p<0,001).

Характеристики

Список файлов диссертации