Диссертация (1144749), страница 33
Текст из файла (страница 33)
Установлено, что при введении ксенобиотика содержание нейромедиаторав утреннее и вечернее время было сходным с его содержанием в соответствующих временныхточках в контроле, однако присущего контрольной группе достоверного снижения содержаниянейромедиатора во временном интервале с 9:30 ч до 11 ч ЦВ не наблюдалось в группе,136получившей однократную инъекцию ДМГ. При введении ксенобиотика также отмечалосьисчезновение нормальных суточных изменений содержания ДА в СВ-Арк гипоталамуса,наблюдаемого у контрольных животных (таблица 3.3).Таблица 3.3 – Содержание норадреналина в медиальной преоптической областии дофамина в срединном возвышении с аркуатными ялрами гипоталамуса самок крысна стадии проэструса после однократного введения 1,2-диметилгидразинана фоне введения физиологического раствора (M±m, нг/мг белка; n=9-16)ЦиркадианноеНА в МПОДА в СВ-Арквремя, чфиз.
р-рфиз. р-р + ДМГфиз. р-рфиз. р-р + ДМГ520,3±1,418,7±1,25,2±0,413,8±1,19:3024,3±1,518,4±2,18,4±0,8**13,2±1,51120,9±0,920,3±1,68,2±1,1*14,0±1,6Примечание: – различие с показателем в 11 ч циркадианного времени в той же группе достоверно (p<0,05;U-тест); *, ** – различия с показателем в 5 ч циркадианного времени в той же группе достоверны (*p<0,05;**p<0,01; U-тест).В ходе дальнейшего исследования было обнаружено, что введение ДМГ в утренние часы(3 ч ЦВ) на фоне введения физиологического раствора достоверно (U=217; р<0,01) снижалосреднесуточный уровень НА в МПО гипоталамуса на 12,1% относительно группы животных,получавших только физиологический раствор (19,10,9 нг/мг белка и 21,80,7 нг/мг белка,соответственно) (рисунок 3.21). Анализ данных о среднесуточном содержании ДА в СВ-Аркгипоталамуса показал, что его уровень значительно, на 86,7%, возрастал при введенииксенобиотиканафоневведенияфизиологическогораствора(13,70,8нг/мгбелкаи 7,30,6 нг/мг белка, соответственно).
Сочетанное введение ДМГ и физиологического растворане приводило к достоверному изменению среднесуточного содержания НА в СВ-Арк и ДАв МПО гипоталамуса (рисунок 3.21).Полученные данные подтверждаютимеющиеся влитературе сведения отом,что гипоталамус является одной из мишеней воздействия ДМГ. В то время как избирательноеканцерогенное воздействие ДМГ на энтероциты толстого кишечника является хорошоизученным феноменом [Анисимов В. Н., Забежинский М. А., Попович И.
Г., 2000],нейротоксический эффект данного соединения изучен еще достаточно слабо. Ранее было1373025аклебгм/гн*20**151050НА в МПОНА в СВ-Аркфиз. р-рДА в М ПОДА в СВ-Аркфиз. р-р + ДМГ*, ** – различия с соответствующим показателем в группе животных, получавшихтолько инъекции физиологического раствора, достоверны (*p<0,01; **p<0,001; U-тест)Рисунок 3.21 – Влияние однократного введения 1,2-диметилгидразинана среднесуточное содержание норадреналина и дофамина в медиальнойпреоптической области и срединном возвышении с аркуатными ядрамигипоталамуса самок крыс на фоне введения физиологического раствора(M±m, n=31-40)установлено, что уже спустя 3 ч после введения [3Н]-ДМГ самцам крыс в их гипоталамусеи гипофизе наблюдался высокий уровень удельной радиоактивности, который превосходилзначения этого показателя в коре больших полушарий и стволе мозга [Анисимов В.
Н. и соавт.,1976]. Более того, удельная радиоактивность ткани гипоталамуса и гипофиза была выше,чем таковая печени, основного органа, который метаболизирует ксенобиотик [Лихачев А. Я.,1980]. Воздействие ДМГ на гипоталамус и гипофиз определенно затрагивает механизмынейроэндокриннойрегуляциирепродуктивнойфункции,таккакчерезнеделюпосле однократного введения ксенобиотика самцам крыс наблюдалось значительное снижениесодержания ФСГ в гипофизе [Анисимов В. Н.
и соавт., 1976].Воздействие ДМГ на гипоталамо-гипофизарное звено регуляции репродуктивнойфункции может осуществляться посредством его влияния на нейромедиаторные системыгипоталамуса. Ранее было установлено, что через сутки после однократного введения ДМГнаблюдается снижение среднесуточного содержания НА и ДА в целом гипоталамусе самцовкрыс [Анисимов В. Н. и соавт., 1976а]. Предполагалось, что ксенобиотик способенингибироватьактивностьпиридоксальзависимыхферментовсинтезакатехоламинов,138что характерно и для других представителей семейства гидразинов [Moloney S. J., Prough R. A.,1983].
В нашем эксперименте через сутки после введения ДМГ также было зафиксированоснижение содержания НА в МПО гипоталамуса по сравнению с контрольной группойживотных при сохранении прежнего уровня его предшественника, ДА. Вместе с тем уровеньНА, измеренный через сутки после введения ксенобиотика в другой гипоталамическойструктуре, в СВ-Арк, как показывают наши эксперименты, не отличался от таковогов контрольной группе, однако было обнаружено существенное увеличение содержанияпредшественника данного нейромедиатора.Такое различие в эффекте введения ДМГ не может быть объяснено толькоингибированием через определенное время процессов биосинтеза ДА и НА в исследованныхструктурах гипоталамуса, как это представлялось ранее.
Скорее, можно предположитьвоздействие ксенобиотика на механизмы, обеспечивающие обратный захват и (или) процессыдеградации исследуемых нейромедиаторов (опосредуемые соответствующим изменениемактивности МАО и КОМТ), а также суточные ритмы содержания этих нейромедиаторов(см. подраздел 3.2) и суточные изменения чувствительности организма в целом и гипоталамусав частности. Нельзя исключить и разнонаправленного действия ДМГ на ферментные системыгипоталамуса:снижениеактивностидофамин--гидроксилазывМПОгипоталамуса(и, по-видимому, также в СВ-Арк) может в то же самое время сопровождаться компенсаторнымповышением активности ДОФА-декарбоксилазы в СВ-Арк гипоталамуса, где исследуемыенейромедиаторы играют различную функциональную роль.
Однако тот факт, что различиев уровне НА между группой животных, получивших инъекцию ДМГ на фоне физиологическогораствора, и группой животных, не получивших ее, обусловлено только разницей в содержаниинейромедиатора в 9:30 ч ЦВ, позволяет предположить, что в данном случае ксенобиотикне оказывает непосредственного влияния на активность дофамин--гидроксилазы, а изменяетсуточную активность различных взаимно влияющих друг на друга нейромедиаторных системгипоталамуса, совокупно участвующих в осуществлении циркадианного сигнала запускапреовуляторного пика секреции ГнРГ в достаточно узких границах критического для этогофизиологического явления временного интервала.
Вопрос об особенностях воздействияданногоксенобиотиканавышеупомянутыеферментыметаболизмаисследуемыхнейромедиаторов в гипоталамических структурах, участвующих в регуляции овариальныхциклов, несмотря на потенциальную ценность таких данных, к сожалению, не мог быть изученв рамках данного исследования.Как уже было показано выше, инъекции ДМГ на фоне введения физиологическогораствора вызывали достоверное снижение среднесуточного содержания НА в МПОгипоталамусаивыраженноеповышениесреднесуточногоуровняДАвдругой139гипоталамической структуре – в СВ-Арк. В литературе имеются данные о том, что однократноевведение крысам другого нейротоксиканта, диметилтиокарбоната, приводило к снижениюсреднесуточного уровня НА и значительному повышению среднесуточного содержания ДАв переднем и заднем гипоталамусе [Goldman J.
M. et al., 2008]. При этом наблюдалосьподавление преовуляторного пика секреции ЛГ, сопровождавшееся нарушением эстральногоцикла. Авторы данного исследования полагают, что обнаруженный ими феномен обусловленснижением количества c-fos-позитивных нейронов, продуцирующих ГнРГ в СОКП, которыйрасполагается в МПО гипоталамуса. В подразделе 3.2 было показано, что моноаминергическиесистемы, участвующие в регуляции синтеза и секреции ГнРГ, сильно зависят от уровняполовых стероидов в крови. Поэтому если предположить наличие отрицательного воздействияДМГ на механизмы, осуществляющие овариальный сигнал запуска секреции ГнРГ, то вполнеследует ожидать изменений среднесуточного содержания этих нейромедиаторов в исследуемыхгипоталамических структурах под действием ксенобиотика на фоне введения физиологическогораствора. Тем не менее, достоверных изменений в среднесуточном содержании НА в СВ-Арки ДА в МПО гипоталамуса нами обнаружено не было, а наблюдаемое достоверное снижениеНА в МПО и повышение ДА в СВ-Арк гипоталамуса еще раз доказывает правильностьпредположения о том, что ксенобиотик воздействует именно на те нейромедиаторные системы,которые участвуют в осуществлении циркадианного сигнала запуска преовуляторного пикасекреции ГнРГ.В следующей серии экспериментов была поставлена задача изучить влияние на те жесамые показатели (суточная динамика и среднесуточное содержание биогенных аминов)воздействиядругоготоксическогосоединения–толуола,известногосвоиминейротоксическими свойствами, и сопоставить эффекты двух различных по своей химическойприроде ксенобиотиков – острого воздействия ДМГ и хронического воздействия толуола –на гипоталамо-гипофизарное звено регуляции репродуктивной функции.Как показали дальнейшие исследования, ингаляция толуола в дозах на уровне ПДКвызывала достоверное (U=7; p<0,01) повышение уровня НА в МПО гипоталамуса в дневноевремя (9 ч ЦВ) по сравнению с контролем (таблица 3.4), что приводило к исчезновениюхарактерной для контрольной группы суточной динамики содержания этого нейромедиатора(рисунок 3.22).
В отношении содержания НА в СВ-Арк гипоталамуса было обнаруженодостоверное (U=12; p<0,05) повышение утреннего (3 ч ЦВ) уровня этого нейромедиатора(таблица 3.5). Как и в контрольной группе, после воздействия ксенобиотика содержание НАв этой гипоталамической структуре не претерпевало достоверных суточных изменений(рисунок 3.22).140Таблица 3.4 – Влияние хронической ингаляции толуола в дозах на уровне предельнодопустимой концентрации на суточную динамику содержания норадреналина, дофамина,серотонина и его метаболита 5-оксииндолилуксусной кислоты в медиальной преоптическойобласти гипоталамуса самок крыс (M±m, нг/мг белка; n=6-10)ГруппаНАКонтроль3 ч ЦВ31,32,1Толуол30,61,4ДА9 ч ЦВ11,22,6***27,63,23 ч ЦВ7,31,68,21,45-ОТ9 ч ЦВ2,81,1*7,21,83 ч ЦВ17,41,911,31,75-ОИУК9 ч ЦВ8,41,7*10,31,33 ч ЦВ5,70,69 ч ЦВ3,80,95,10,35,10,3Примечание: *, *** – различия с показателем в 3 ч циркадианного времени в той же группе достоверны (*p<0,05;***p<0,001; U-тест); ,– различия с показателем в контрольной группе в то же время достоверны ( p<0,05;p<0,01; U-тест).Таблица 3.5 – Влияние хронической ингаляции толуола в дозах на уровне предельнодопустимой концентрации на суточную динамику содержания норадреналина, дофаминаи метаболита серотонина 5-оксииндолилуксусной кислоты в срединном возвышениис аркуатными ядрами гипоталамуса самок крыс (M±m, нг/мг белка; n=7-10)ГруппаНАДАКонтроль3 ч ЦВ17,91,89 ч ЦВ14,91,93 ч ЦВ16,71,6Толуол23,51,221,52,821,13,75-ОИУК9 ч ЦВ11,81,3*23,82,53 ч ЦВ2,40,59 ч ЦВ2,00,62,50,23,80,5Примечание: * – различие с показателем в 3 ч циркадианного времени в той жегруппе достоверно (p<0,05; U-тест); ,– различия с показателем в контрольнойгруппе в то же время достоверны (p<0,05; p<0,01; U-тест).При воздействии толуола в дозах на уровне ПДК происходило достоверное (U=2; p<0,01)повышениеуровняДА вСВ-Аркгипоталамусавдневноевремя(таблица3.5),что сопровождалось исчезновением характерной для контрольной группы животных суточнойдинамики содержания этого нейромедиатора (рисунок 3.22).
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
