Диссертация (1144749), страница 36
Текст из файла (страница 36)
Известно, что X-бокс-связывающий белок-1вовлечен в патогенез заболеваний ЦНС [Hosoi T., Ogawa K., Ozawa K., 2010]. Таким образом,можно предположить, что искажение нормальной суточной динамики и среднесуточногосодержания катехоламинов в МПО и СВ-Арк гипоталамуса в рассмотренной нами модели ГГЦ,вызванной введением L-метионина, может обусловливать нарушения в центральной регуляцииэстральных циклов.
Однако механизмы этого явления нуждаются в дальнейшем изучении.Полученные нами данные позволяют рассматривать ГЦ, концентрация которого в организмесамок крыс возрастает при метиониновой нагрузке, в качестве эндогенного ксенобиотика,вызывающего нарушение центральной регуляции репродуктивных циклов.1523.7. Влияние ксенобиотиков 1,2-диметилгидразина, толуола и метиониновой нагрузкина образование активных форм кислорода в медиальной преоптической областии срединном возвышении с аркуатными ядрами гипоталамуса и продуктов перекисногоокисления липидов в сыворотке кровиПомимо суточных изменений содержания биогенных аминов в структурах гипоталамуса,ответственных за синтез и секрецию ГнРГ, в МПО гипоталамуса также были обнаруженысуточные изменения генерации АФК. Образование АФК в этой структуре в дневное времясущественно (U=4; p<0,05) превосходило значения данного показателя в утренние и ранниеночные часы (рисунок 3.27).
С помощью Н-теста Крускала-Уоллиса была подтвержденазависимость уровня люминолзависимой хемилюминесценции в этой гипоталамической областиот временного показателя (Н=9,156; p<0,05). Необходимо отметить, что суточная динамикагенерации АФК в МПО гипоталамуса имела характер, противоположный соответствующимизменениям содержания биогенных аминов в той же структуре (рисунок 3.22).18000*отн. ед./мг белка16000*1400012000100008000#6000400020000391739173ц иркад ианное вр ем я, чф и з .
р -рф и з . р -р + Д М Г* – различие с показателями в 3 ч и 17 ч циркадианного времени в той же группедостоверно (р<0,05; U-тест); – различие с показателем в группе животных, получившихинъекцию физиологического раствора, в то же время достоверно (р<0,05; U-тест)Рисунок 3.27 – Влияние однократного введения 1,2-диметилгидразинана генерацию активных форм кислорода (уровень люминолзависимойхемилюминесценции) в медиальной преоптической области гипоталамусасамок крыс на фоне введения физиологического раствора (M±m; n=5-6)153Введение ДМГ достоверно (U=1; p<0,05) снижало дневной уровень образования АФКдо значений, характерных для утреннего и раннего ночного времени, что приводилок исчезновению наблюдаемой в контрольной группе суточной динамики генерации АФК(рисунок 3.27).Хроническая ингаляция толуола в дозах на уровне ПДК вызывала достоверное (U=5;p<0,05) повышение утреннего уровня генерации АФК в МПО гипоталамуса по сравнениюс контролем, что приводило к исчезновению наблюдаемых в норме суточных измененийинтенсивности свободнорадикального окисления (рисунок 3.28).1 8 00 01 6 00 0*отн.
ед./мг белка1 4 00 01 2 00 0#1 0 00 08 00 06 00 04 00 02 00 00К о нт ро л ь3 ч ЦВТ о л у ол9 ч ЦВ* – различие с показателем в 3 ч циркадианного времени в той же группе достоверно(р<0,05; U-тест); – различие с показателем в то же время в контрольной группедостоверно (р<0,05; U-тест)Рисунок 3.28. Влияние хронического воздействия толуолана генерацию активных форм кислорода (уровень люминолзависимойхемилюминесценции) в медиальной преоптической областигипоталамуса самок крыс (M±m; n=6-10)Нарушение суточной динамики содержания биогенных аминов в МПО гипоталамусапод воздействием хронической ингаляции толуола сопровождалось исчезновением суточнойдинамики образования АФК в этой гипоталамической структуре. В то же время однократноевведение ДМГ вызывало исчезновение в этой области гипоталамуса нормальной суточнойдинамики содержания ДА и образования АФК.
Таким образом, в МПО гипоталамусапри различных воздействиях, также как и в нормальных физиологических условиях,наблюдалась взаимосвязь между уровнем биогенных аминов и свободнорадикальными154процессами. Несмотря на то, что механизм нейротоксического действия толуола и ДМГ связанс образованием свободных радикалов, ни ингаляция ксенобиотика, ни введение канцерогенане вызывали значительного повышения образования АФК в МПО гипоталамуса. Этот факт,по-видимому, дает дополнительное подтверждение того, что обнаруженные при различныхвоздействиях изменения в образовании АФК в МПО гипоталамуса отражают измененияв содержании биогенных аминов, а не обусловлены индукцией свободных радикаловпри метаболизме ксенобиотиков.
Если суточная динамика образования АФК в МПОгипоталамусаобусловленасуточнымиизменениямиактивностиметаболизирующейкатехоламины МАО-А, то в таком случае следует предполагать, что нарушение суточныхритмов генерации АФК под воздействием ксенобиотиков представляет собой следствиенарушения суточных ритмов активности этой формы моноаминоксидазы самого изофермента.Суточные изменения активности МАО-А в переднем гипоталамусе самцов крыс исчезалипри помещении экспериментальных животных в условия световой депривации [Kamase Н.,1980], поэтому исчезновение суточных ритмов образования АФК при различных воздействияхмогло явиться следствием нарушения механизмов передачи фотопериодической информацииот сетчатки глаза к моноаминергическим системам гипоталамуса.Полученные нами данные позволяют предположить, что суточные ритмы генерации АФКв МПО гипоталамуса связаны с суточными изменениями в содержании биогенных аминовв этой богатой моноаминергическими окончаниями гипоталамической структуре.
Вместе с темуровень генерации АФК может рассматриваться как интегральный показатель, не толькосвидетельствующий об изменении активности моноаминергических систем, но и дающийпредставление об интенсивности множества различных биохимических процессов, связанныхс образованием АФК. Таким образом, изучение суточной динамики образования АФКв структурах гипоталамуса, ответственных за регуляцию эстральных циклов, может служитьмаркеромнормальногофункционирования механизмовпередачик этимструктураминформации о суточном периодизме, а также нарушения таких механизмов при различныхнеблагоприятных воздействиях на организм.Как уже было указано в главе 1, одним из основных механизмов токсичности ГЦ являетсяего аутоокисление в присутствии кислорода и ионов металлов с переходной валентностьюи инициируемая этим генерация АФК [Perna A.
F. et al., 2003]. Образующиеся пероксидводорода и супероксиданион-радикал стимулируют процессы перекисного окисления липидови снижают биодоступность оксида азота [Upchurch G. R. Jr. et al., 1997]. Последнееобусловлено,впервуюочередь,образованиемпривзаимодействииоксидаазотаи супероксиданион-радикала высокотоксичного продукта – пероксинитрита [Hooijmans C. R.,Blom H. J., 2009; Upchurch G. R. Jr. et al., 1997]. При повышении содержания общего ГЦ155некоторыеисследователиотмечаютподавлениеэкспрессииглутатионпероксидазыи супероксид-дисмутазы, что может усиливать токсический эффект свободных радикаловв структурах мозга [Bayadas G.
et al., 2006].Данные об увеличении уровня общего ГЦ в плазме крови при пероральном введенииL-метионина согласуются с полученными нами результатами о содержании продуктовперекисного окисления липидов (ТБК-реактивных продуктов), а также нитритов в сывороткекрови, при этом влияние потребления L-метионина на уровень Fe2+/H2O2-индуцированнойхемилюминесценции в сыворотке крови в ходе экспериментов нами обнаружено не было.Так, при исследовании в сыворотке крови уровня вторичного продукта перекисного окислениялипидов малонового диальдегида было обнаружено его достоверное (U=502,5; p<0,01)повышение при метиониновой нагрузке, указывающее на активацию перекисных процессовв крови (рисунок 3.29). Аналогичные данные были описаны нами ранее, причем было показано,16*14мкмоль/л121086420контрольL-метионин* – различие с показателем в контрольной группе достоверно (p<0,01; U-тест)Рисунок 3.29 – Влияние хронического воздействия L-метионинана содержание малонового диальдегида в сыворотке крови самок крысна стадии проэструса (M±m, n=36-46)что наиболее заметное повышение уровня малонового диальдегида наблюдалось во временноминтервале с 9:30 ч до 10:10 ч ЦВ [Арутюнян А.
В. и соавт., 2012].Известно, что ГЦ обладает способностью эффективнее других аминотиолов, при переходев форму дисульфида или связываясь с эндогенными тиолами, отдавать электроны кислороду,превращая последний в супероксид-анион. Супероксид-анион уже непосредственно участвует156в процессах перекисного окисления липидов. В результате происходит усиленное образованиепродуктов свободнорадикального метаболизма [Жлоба А. А., Никитина В. В., 2004].Полученные нами результаты согласуются с данными других исследователей, которыеуказывают на то, что при возрастании уровня общего ГЦ наблюдается увеличение содержаниямалонового диальдегида, карбонильных производных и диеновых конъюгатов в плазме кровикрыс и кроликов [Yalçinkaya-Demirsöz S.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
