Диссертация (1141412), страница 12
Текст из файла (страница 12)
Моносахариды открывались в виде красно-коричневых зон абсорбции.Такимобразом,сдостовернымиобразцамисахароввтравекульбабыосеннейидентифицировали глюкозу, в траве кульбабы шершавоволосистой - глюкозу и фруктозу.533.1.2 Результаты анализа связанных сахаровДля подтверждения присутствия гликозидов проводили реакции с реактивом Фелинга ираствором α-нафтола 20% [глава 2, раздел2.2.2]. Выпадение большего количества осадков привзаимодействии с жидкостью Фелинга, после предварительного проведения гидролизакислотой серной 5%, свидетельствует о присутствии связанных сахаров в траве кульбабыкульбабы осенней и кульбабы шершавоволосистой. Появление колец вишнево-красного цвета сраствором α-нафтола свидетельствует о наличие сахаров в форме гликозидных соединений всырье изучаемых растений.Для выделения полисахаридов к концентрированным водным извлечениям добавлялиспирт этиловый 96% [глава 2, раздел 2.2.2], в результатечего происходило образованиерыхлых осадков.
Полученные осадки отделяли от жидкой среды, промывали спиртом этиловым96% и высушивали на воздухе. К растворам, оставшимся после отделения полисахаридныхосадков, прибавляли жидкость Фелинга и раствор меди сульфата.Положительные реакции свидетельствуют о наличии в траве кульбабы осенней и в травекульбабы шершавоволосистой полисахаридов.3.2 Результаты анализа азотсодержащих соединений3.2.1 Результаты анализа азотистых основанийАзотистые основания играют важную роль в физиологических реакциях организма.Холин является составной частью наиболее распространенных фосфолипидов - лецитина исфингомиелина, проявляет липотропное действие [7, 163].Холин и бетаин оказывают влияние на деятельность нервной системы, связанную сформированием и функционированием условных рефлексов, а также на процессы возбужденияи торможения [7], что говорит о целесообразности изучения азотистых оснований в травекульбабы осенней и кульбабы шершавоволосистой.Качественное обнаружениеПрисутствиеазотистыхоснованийвтравекульбабыосеннейикульбабы54шершавоволосистой в водных извлечениях доказывали качественными реакциями и методомбумажной хроматографии [глава 2, раздел 2.2.3].При проведении качественных реакций с раствором кислоты фосфорновольфрамовой 3%происходило помутнение извлечений, с реактивом Манделина наблюдалось появление кольцакрасно-коричневого цвета на границе двух сред, с раствором кислоты хлористоводородной 0,2н и бриллиантовым зеленым 0,1% -окрашивание растворов в зеленый цвет.Хроматограммы помещали в эксикатор, в котором проводили их проявление йоднымипарами.
При нанесении водных извлечений из травы кульбабы осенней на хроматографическуюбумагу установлено наличие 3 соединений (Rf 0,28, Rf 0,45, Rf 0,80), а при нанесении водныхизвлечений травы кульбабы шершавоволосистой - 6 соединений (Rf 0,13, Rf 0,22, Rf 0,32, Rf0,51, Rf 0,67, Rf 0,80), относящихся к азотистым основаниям (рисунок 4).Rf 0,80Rf 0,67Rf 0,51Rf 0,45Rf 0,32Rf 0,28Rf 0,22Rf 0,13АРисунок 4 - Схема хроматограммы водныхизвлечений из травы кульбабы осенней икульбабы шершавоволосистойА - водное извлечение из травы кульбабыосеннейБ - водное извлечение из травы кульбабышершавоволосистойСистема растворителей: н-бутанолкислота уксусная – вода (4:1:2)–БКоличественное определениеСодержание азотистых оснований устанавливали методом фотоэлектроколориметрии[глава 2, раздел 2.2.3]. Содержание суммы азотистсодержащих соединений в траве кульбабыосенней составило 0,075±0,001%, в том числе холина – 0,055±0,001%; в траве кульбабышершавоволосистой – 0,096±0,003%, в том числе холина – 0,067±0,002%.3.2.2 Результаты анализа аминокислотного составаАминокислоты в составе белков и ферментов участвуют практически во всех55физиологических процессах организма.
Аминокислоты не только являются структурнымисоставляющими белков и ферментов, но и находятся в свободном виде в тканях растений иклеточном соке в качестве резерва. Они участвуют в различных обменных процессах.Тирозин и фенилаланин – основные составляющие синтеза флавоноидов в растениях.Для глутаминовой кислоты свойственна функция переноса при переаминировании, дляметионина - при переметелировании [226].Глутаминовая кислота активирует ферменты антиоксидантной защиты, стимулируетиммунный ответ [74].Метионин участвует в синтезе биогенных аминов, синтезе цистеина, глутатиона итаурина [74].Аспарагиновая кислота обладает иммуноактивными свойствами за счет ускоренияпроцессов антителобразования, повышает физическую активность и выносливость [168, 189].Значительное количество аминокислот играет существенную роль в развитии сахарногодиабета. Метионин способен усиливать сердечную деятельность за счет улучшения обменныхпроцессов в миокарде; сравнимый инотропный эффект присущ также и лейцину.
Глициноказывает гиполипидемический эффект, увеличивает работоспособность и уменьшаетпсихоэмоциональное возбуждение, обладает выраженным антиоксидантным действием [144,158, 161].Существуют сведения об участии аминокислот в процессах нервной регуляции,поддержании сосудистого тонуса [105, 109, 217].Тем не менее, до настоящего времени лекарственные растения не применяются вкачестве доступных источников аминокислот.
В связи с этим нами проведено исследованиекачественного и количественного состава свободных и связанных аминокислот в сырьеизучаемых видов растений рода кульбаба.Наличие аминокислот в извлечениях из травы кульбабы осенней и кульбабышершавоволосистой устанавливали с помощью качественной реакции с раствором нингидрина0,1% [глава 2, раздел 2.2.3], при нагревании полученных растворов наблюдали появлениекрасно-фиолетового окрашивания.С помощью хроматографического метода [глава 2, раздел 2.2.3] в траве кульбабыосеннейикульбабышершавоволосистойобнаруженыследующиеаминокислоты:аспарагиновая и глутаминовая кислоты, серин, треонин, пролин, глицин, цистеин, аланин,валин, тирозин, изолейцин, метионин, лейцин, фенилаланин, лизин, гистидин, аргинин.Для подтверждения результатов анализа водных извлечений из травы кульбабы осеннейи кульбабы шершавоволосистой методом бумажной хроматографии проведено определение56состава и количественного содержания аминокислот на автоматическом анализатореаминокислот ААА 339 (Mikrotechna, Чехия) методом ионообменной хроматографии [глава 2раздел 2.2.3].
С целью определения содержания связанных аминокислот, предварительнопроводили кислотный гидролиз [глава 2, раздел 2.2.3].Результаты определения качественного состава и количественного содержанияаминокислот приведены в таблице 2.Таблица 2 – Содержание свободных и связанных аминокислот в траве кульбабы осеннейи кульбабы шершавоволосистойКонцентрацияКонцентрациясвободных,связанных,№Название аминокислотмг/100 мгмг/100 мгАБАБ1Аспарагиновая кислота0,280,232Треонин*0,030,020,190,133Серин0,030,030,180,204Цистеин0,090,070,610,535Глицин0,100,080,570,566Аланин0,040,051,050,967Валин*0,020,030,190,208Метионин*0,150,109Изолейцин*0,080,060,520,4310 Лейцин*0,030,040,580,6011 Тирозин0,010,020,180,1312 Фенилаланин*0,020,010,320,2613 Гистидин0,050,030,250,2014 Лизин*0,030,040,930,8915 Аргинин0,090,061,120,93Сумма аминокислот0,620,547,126,35Сумма незаменимых аминокислот0,210,202,882,61Примечание: А - сырье кульбабы осенней, Б - сырье кульбабы шершавоволосистой, * незаменимые аминокислоты.Из данных, приведенных в таблице 2, следует, что в траве кульбабы осенней содержаниесуммы свободных аминокислот составляет 0,62 мг/100 мг, в том числе 0,21мг/100мг - сумманезаменимых аминокислот, а в траве кульбабы шершавоволосистой 0,54 мг/100 мг и 0,20мг/100 мг соответственно.Содержание суммы связанных аминокислот в траве кульбабы осенней составляет 7,12мг/100 мг, в том числе 2,88 мг/ 100 мг - сумма незаменимых аминокислот, а в траве кульбабышершавоволосистой 6,35 мг/100 мг и 2,61 мг/100 мг соответственно.573.3 Результаты анализа дубильных веществ3.3.1 Результаты качественного обнаружения дубильных веществРезультаты качественных реакций: с растворомжелатина 1% и раствором кислотыхлористоводородной 10% наблюдали выпадение осадка, который растворялся при добавленииизбытка реактива; с формальдегидом и кислотой хлористоводородной образовывалсякирпично-красный осадок, с раствором бромной воды 0,5% сразу же образовывался желтыйосадок, с раствором железно-аммонийных квасцов 1% - черно-зеленое окрашивание [глава 2,раздел 2.2.4], свидетельствуют о наличии в кульбабе осенней и кульбабе шершавоволосистойдубильных веществ, главным образом конденсированной природы.3.3.2 Результаты количественного определения дубильных веществКоличественное содержание в траве кульбабы осенней и кульбабы шершавоволосистойдубильных веществ [глава 2, раздел 2.2.4] составляет 4,74±0,16% и 4,28±0,18% соответственно.3.4 Результаты анализа органических кислот3.4.1 Результаты качественного обнаружения органических кислотВ последнее время органические кислоты находят применение в медицине, так какобладают широким спектром действия: антисептическим, антиоксидантным, оказываютблагоприятное влияние на процесс пищеварения, снижают рН среды, способствуют созданиюнеобходимого состава микрофлоры кишечника [49, 130].
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
