Диссертация (1141371), страница 24
Текст из файла (страница 24)
2.12,свидетельствуют, что при интраназальном введении препарата налоксон оченьбыстро и с одинаковой скоростью для всех доз всасывается в кровь (Tmax,Сmax/АUС0t). Скорость абсорбции налоксона при интраназальном введениивыше, чем при внутримышечном примерно в 1,5 раза. Налоксон приинтраназальном введении также, как и при внутривенном введении,непродолжительно циркулирует в крови и быстро элиминирует: MRT составляет36,54 мин; 34,56 мин и 32,04 мин; T1/2 – 70,91 мин, 52,85 мин и 28,91 минсоответственно для дозы 0,6 мг/кг, 1,2мг/кг и 1,8 мг/кг. Абсолютнаябиодоступность налоксона имеет тенденцию к снижению при введениимаксимальной из тестируемых доз и составляет соответственно 32,48 %, 31,22 %и 22,16 % (в пересчете на дозу 0,6 мг/кг), или 32,48 %, 62,43 % и 66,47 % с учетомвведенной дозы. Таким образом, абсолютная биодоступность налоксона приинтраназальном введении кроликам составляет около 30 %.Таблица 2.12Основные фармакокинетические параметры налоксонапри внутривенном, внутримышечном и интраназальном введении кроликамФармакокинетическиеконстантыСmax (C0), нг/млСmax/DТmax, минКel, мин-1Т1/2, минMRT, минClТ, мл/мин кгАUС0t, нг мин/млАUС0, нг мин/млСmax/АUС0t, мин-1f, % (АUС0t / D)f, % (АUС0t)в/в (0,6)240,20––0,021831,8332,84110,615184,735541,99–100100Путь введения (дозы, мг/кг)в/м (0,6)и/н (0,6)и/н (1,2)78,7934,8774,97131,3258,1262,4855100,00980,01310,024070,9152,8528,9148,8336,5434,5677,84233,95346,865273,641684,113236,847708,382564,673459,580,01490,02070,0232101,7132,4831,22101,7132,4862,43и/н (1,8)88,3449,0750,017839,0232,04478,393446,293762,250,025622,1666,47Для оценки линейности фармакокинетики налоксона при изменении дозыпостроены графики зависимости максимальной концентрации от дозы и площадипод кривой «концентрация-время» от дозы (рис.
2.3 и 2.4). Как видно изприведенных графиков, на участке доз 0÷1,2 нг/мл величины С max и AUCвозрастают пропорционально дозе. При дальнейшем повышении дозы увеличениезначений Сmax и AUC идет более медленно. Возможно, у кроликов наблюдаетсяпроцесс насыщения всасывания налоксона при повышении интраназальных доз160более 1,2 мг/кг.Рис. 2.3. Зависимость площади под фармакокинетической кривой от дозыналоксона при интраназальном введении препарата Налоксон спрей назальный.Рис. 2.4.
Зависимость максимальной концентрации от дозы налоксона приинтраназальном введении препарата Налоксон спрей назальный.В целом, анализ полученных данных свидетельствует, что фармакокинетиканалоксона характеризуется быстрым всасыванием его в кровь с последующейбыстрой элиминацией.Абсолютная биодоступность налоксона при интраназальном введениикроликам составляет около 30 % (при введении равных доз) и пропорциональновозрастает при двукратном увеличении дозы препарата.Таким образом, учитывая безопасность, простоту и удобствоинтраназального способа введения, а также полученные данные офармакокинетике исследуемой лекарственной формы налоксона можно161заключить, что разработанный препарат Налоксон спрей назальный (ОАО«Мосхимфармпрепараты» им.
Н.А. Семашко») может рассматриваться какальтернатива инъекционным препаратам налоксона при необходимостинеотложного доврачебного купирования острых интоксикаций опиатами и можетбыть рекомендован для доклинических фармакологических и токсикологическихисследований.»162ПРИЛОЖЕНИЕ 6163Выдержка из отчета: «ДОКЛИНИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕОБЩЕТОКСИЧЕСКОГО ДЕЙСТВИЯ ПРЕПАРАТА НАЛОКСОН СПРЕЙНАЗАЛЬНЫЙ(Экспериментальная часть)1. ИЗУЧЕНИЕ ОСТРОЙ ТОКСИЧНОСТИ1.1.
Материалы и методы исследованийПри проведении экспериментальных исследований руководствовалисьметодическими указаниями по изучению общетоксического действияфармакологических веществ [13,14].Исследования проведены на крысах линии Вистар обоего пола с исходноймассой тела 270-280 г (самцы) и 250-260 г (самки). Экспериментальные группыживотных насчитывали по 5 самцов и 5 самок.
Всего в экспериментеиспользовано 10 крыс.Животные были получены из питомника лабораторных животных ЧП«Дали-2001» (г. Киев). В период карантина и во время эксперимента животныенаходились в виварии при температуре воздуха 18-20 оС, относительнойвлажности 50-60 %, естественном световом режиме «день-ночь», в стандартныхпластиковых клетках, на стандартном пищевом рационе [12-14].Исследуемый препарат изучали при назальном введении, котороеосуществляли с помощью дозирующей насадки-распылителя дробно (10 введенийпо 1,0 мг по налоксона гидрохлориду с интервалом 45 мин между введениями).Суммарная доза препарата по налоксона гидрохлориду в среднем составляла36,6 мг/кг для самцов и 39,4 мг/кг для самок.Критериями суждения о токсичности исследуемого препарата служиликлиническая картина интоксикации, выживаемость животных, динамика массытела крыс (исходные данные, 3, 7, 14 суток).
Оценку влияния препарата нафункциональное состояние печени проводили в конце эксперимента по рядубиохимических показателей крови. Все биохимические исследования проведеныпри использовании диагностических наборов фирмы «Филисит Диагностика»(Украина). Содержание общего белка в крови определяли биуретовым методом,альбумин – по реакции с бромкрезоловым зеленым, показатель тимоловой пробы– по методу осадочных проб [15].Наблюдение за животными проводили в течение 2-х недель. На 14-е суткипосле воздействия препарата крыс подвергали эвтаназии методом щадящейдекапитации.
При вскрытии по Rое [16] была проведена макроскопическая оценкасостояния внутренних органов и определена их относительная масса.Все полученные экспериментальные данные обрабатывали методомвариационной статистики. В отчете принят уровень значимости р 0,05.Вычисление статистической значимости в случае номинальных переменныхпроводили, используя однофакторный дисперсионный анализ и дисперсионныйанализ для экспериментов с повторным измерением. Проверку гипотезы о равенстведвух средних проводили с помощью t-критерия Стьюдента для связанных выборок[17, 18].1641.2.
Результаты исследованийВ результате проведенных исследований установлено, что после каждоговведения у животных отмечалось снижение двигательной активности,заторможенность в течение 5-10 мин, затем животные начинали передвигаться поклетке, умываться, пить воду, есть корм. В дальнейшем состояние и поведениекрыс не отличалось от состояния и поведения интактных животных.Гибели животных, а также отклонений в их общем состоянии и поведении втечение периода наблюдений не отмечалось (табл. 1.1).Таблица 1.1Параметры токсичности исследуемого препаратаПрепаратПолживотныхКоличествоживотныхНалоксонспрейСамцыСамки55Доза, мг/кг(по налоксонагидрохлориду)36,639,4Летальность,%00Влияние исследуемого препарата на динамику массы тела крыспредставлено в таблице 1.2.
Анализ полученных данных показал, что послеострого воздействия исследуемого препарата, начиная с 7-х суток, было отмеченодостоверное увеличение массы тела экспериментальных животных по сравнениюс исходными данными.Таблица 1.2Динамика массы тела крыс при остром воздействии исследуемого препаратаПрепаратПериодМасса тела крыс, гнаблюдения, суткисамцысамкиНалоксон0273,0 2,00254,0 1,87спрей3285,0 5,00258,0 1,227283,0 3,391260,0 1,58114309,0 4,851262,0 2,5511Примечание: – р 0,05 относительно исходных данных.Результаты биохимических исследований (табл.
1.3) показали, что препаратв исследованных дозах не влиял на функциональное состояние печени:содержание общего белка, альбумина и показатель тимоловой пробы в сывороткекрови животных соответствовали показателям интактных животных.Таблица 1.3Биохимические показатели сыворотки крови крыспосле острого воздействия исследуемого препаратаПоказателиОбщий белок, г/лАльбумин, г/лТимоловая проба, ед.Контрольная группасамцысамки71,79 ± 3,3075,58 ± 3,8831,78 ± 1,8330,79 ± 1,671,53 ± 0,331,13 ± 0,18Налоксон спрейсамцысамки72,47 ± 2,6879,63 ± 4,3932,65 ± 1,9931,15 ± 2,401,63 ± 0,441,28 ± 0,33Патоморфологическое исследование крысПатоморфологическое исследование, проведенное через 14 дней послеприменения препарата в дозах 36,6 мг/кг для самцов и 39,4 мг/кг для самок (по165налоксона гидрохлориду), включало в себя аутопсию, макроскопическоеисследование внутренних органов крыс.
После эвтаназии животные былитщательно обследованы на предмет видимых патологических признаков. Поданным вскрытия отклонений от нормы выявлено не было. Шерсть блестящая,опрятная, лимфатические узлы не увеличены. Видимые слизистые оболочкиблестящие, бледно-розовые, гладкие. Все макроскопически исследованные органы(сердце, легкие, тимус, желудок, печень, почки, надпочечники, поджелудочнаяжелеза, селезенка, половые железы) имели обычные размеры, цвет иконсистенцию.
Относительная масса внутренних органов крыс, получавшихисследуемый препарат (табл. 1.4), оставалась в пределах физиологической нормы[15].Таблица 1.4Коэффициенты масс внутренних органов крыспосле острого воздействия исследуемого препаратаОрганыСердцеЛегкиеПеченьСелезенкаНадпочечникиПочка леваяПочка праваяЯичко левоеЯичко правоеТимусКоэффициенты массСамцыСамки0,36 ± 0,020,35 ± 0,020,73 ± 0,040,85 ± 0,053,27 ± 0,113,28 ± 0,180,35 ± 0,010,39 ± 0,050,023 ± 0,0010,037 ± 0,0010,34 ± 0,010,37 ± 0,020,35 ± 0,010,37 ± 0,020,57 ± 0,020,57 ± 0,020,13 ± 0,020,13 ± 0,011.3. ВыводыНа основании результатов изучения острой токсичности исследуемогопрепарата Налоксон спрей назальный можно сделать выводы, препарат в дозах36,6 мг/кг для самцов и 39,4 мг/кг для самок по налоксона гидрохлориду:- не вызывает гибели животных;- не оказывает токсического влияния на общее состояние, поведение,потребление пищи и воды, массу тела крыс;- не влияет на параметры, характеризующие белковый обмен: содержаниеобщего белка, альбумина и показатель тимоловой пробы в сыворотке кровиэкспериментальных животных;- не вызывает видимых изменений внутренних органов крыс;- не влияет на абсолютную и относительную массу внутренних органов.2.
ИЗУЧЕНИЕ СУБХРОНИЧЕСКОЙ ТОКСИЧНОСТИЦелью данных исследований являлось изучение общетоксического действияпрепарата Налоксон спрей назальный в субхроническом опыте на половозрелыхкрысах в течение 7 суток при назальном применении. При проведенииэкспериментов руководствовались методическими указаниями [13, 14].1662.1. Материалы и методы исследованийИсследования проведены на половозрелых крысах линии Вистар обоего пола,с исходной массой тела 245-275 г (самцы) и 225-255 г (самки). Все животные былираспределены на группы.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
