Диссертация (1141275), страница 18
Текст из файла (страница 18)
Recovery =100,20 % , что также удовлетворяет критерию приемлемости.Определение правильности методикиКритерий приемлемости: величина относительной систематической ошибкиизмерений (δ, %) при анализе модельных растворов с содержанием активноговещества 80 %, 90 %, 100 %, 110 %, 120 % не должна превышать 3 %.Статистическая оценка выхода аналитической процедуры в зависимости отсодержания анализируемого вещества должна находиться в интервале 97 – 103 %(recovery).Тест выполнен одним аналитиком. Модельные растворы готовили согласнотаблице 52.
Результаты измерений представлены в таблице 55.Таблица 55Результаты определения правильности методики№%X исхDX фактrecovery, %δ, %180 %3,60,1603,699,550,45280 %3,60,1613,6100,060,06380 %3,60,1613,699,860,14490 %4,10,1814,1100,060,06590 %4,10,1814,099,860,14690 %4,10,1854,1102,062,067100 %4,50,2014,599,960,048100 %4,50,2044,6101,361,369100 %4,50,2024,5100,360,3610110 %5,00,2204,999,460,5411110 %5,00,2204,999,460,5412110 %5,00,2204,999,660,3413120 %5,40,2415,499,860,14136№%X исхDX фактrecovery, %δ, %14120 %5,40,2355,397,462,5415120 %5,40,2405,499,460,5499,900,62Следовательно, величина относительной систематической ошибки (δ =0,62 %) не превышает 3 % и удовлетворяет критерию приемлемости.
Recovery =99,90 % также удовлетворяет критерию приемлемости.Определение повторяемостиКритерийприемлемости:величинаотносительногостандартногоотклонения (RSD) не должна превышать 2 %.Определение содержания суммы оксикоричных кислот осуществляетсясогласно методике.Тест выполнен одним аналитиком. Повторяемость оценивали в условияходной лаборатории, на одном приборе, в тот же день, с использованием одних итех же реактивов. Модельные растворы готовили пяти уровней содержаниясуммы оксикоричных кислот: 80 %, 90 %, 100 %, 110 %, 120 % в трехповторностях. Результаты измерений представлены в таблице 56.Таблица 56Результаты определения повторяемости методики№%X исхDX факт180 %3,60,1603,6280 %3,60,1613,6380 %3,60,1613,6490 %4,10,1814,1590 %4,10,1814,0690 %4,10,1854,1RSD, %137№%X исхDX факт7100 %4,50,2014,58100 %4,50,2044,69100 %4,50,2024,510110 %5,00,2204,911110 %5,00,2204,912110 %5,00,2204,913120 %5,40,2415,414120 %5,40,2355,315120 %5,40,2405,4RSD, %0,03Следовательно, величина относительного стандартного отклонения вусловиях повторяемости (RSD = 0,03 %) не превышает 2 % и удовлетворяеткритерию приемлемости.Оценка межоперационной точностиКритерий приемлемости: величина относительного стандартногоотклонения (RSD) не должна превышать 3 %.Определение межоперационной точности выполнен в одной лабораторииразными аналитиками в разное время в условиях воспроизводимости.
Каждыйаналитик выполнил анализ 9 частей одного и того же образца.Определение содержания суммы оксикоричных кислот производилисогласно разработанной методике. Результаты приведены в таблице 57.Таблица 57Результаты определения межоперационной точности методикиАналитик,№Концентрация отцелевой, %Лаборатория1100 %1X исхDX факт4,50,2014,5RSD, %138Аналитик,№Концентрация отцелевой, %Лаборатория2100 %3X исхDX факт14,50,1974,4100 %14,50,2044,64100 %14,50,1984,45100 %14,50,1954,46100 %14,50,2014,57100 %14,50,1954,48100 %14,50,2094,79100 %14,50,1974,41100 %24,50,1954,42100 %24,50,2014,53100 %24,50,2014,54100 %24,50,2044,65100 %24,50,2014,56100 %24,50,1994,47100 %24,50,2024,58100 %24,50,2014,59100 %24,50,2004,5RSD, %0,08Таким образом, величина относительного стандартного отклонения вусловиях межоперационной точности (RSD = 0,08 %) не превышает 3 %, чтоудовлетворяет критерию приемлемости.Определение точности методаКритерий приемлемости: величина относительного стандартногоотклонения (RSD) не должна превышать 3 %.139В качестве стандартного образца использована смесь с содержанием суммыоксикоричных кислот 4,5 мг/табл.Валидацияметодиклабораторногоанализапредставляетточностьаналитической процедуры как меру соответствия между серией результатов,полученных многократным анализом однородной пробы при заданных условиях.Точность оценивали повторяемостью и межоперационной точностью.
Методикапо результатам исследований «повторяемость» «межоперационная точность»соответствует точности аналитической процедуры.Установлено, что величина относительного стандартного отклонения вусловиях повторяемости (RSD = 0,03 %) и в условиях межоперационной точности(RSD = 0,08 %) не превышает 3 %, что удовлетворяет критерию приемлемости.Таким образом, методика количественного определения содержания суммыоксикоричных кислот спектрофотометрическим методом в экспериментальныхсоставах таблеток для рассасывания соответствует критериям приемлемости.Заданные критерии удовлетворяют установленным требованиям.4.4. Исследование высвобождения БАВ из модельных составов таблеток(показатель «Растворение»)Разработанные методики анализа таблеток для рассасывания позволилипровести исследование высвобождения БАВ по показателю «Растворение».Определение проводили для водорастворимых компонентов - суммыоксикоричных кислот в пересчете на цикориевую кислоту.
Исследованияпроводили по методике ГФ XIII.Полученные результаты представлены в таблице 42.Таблица 42Результаты определения высвобождения БАВ из таблетокВремяСодержание суммы фенолрастворения карбоновых кислот в пересчете наВысвобождение, %цикориевую кислоту, мг140Состав №4Состав №8Состав №4Состав №815 мин0,8±0,010,98±0,0140,1749,2130 мин0,9±0,011,28±0,0145,2264,3245 мин0,95±0,011,47±0,0147,7473,8760 мин0,98±0,011,89±0,0149,2195,00Полученные результаты свидетельствуют, что по показателю «Растворение»экспериментальный состав № 8 в сравнении с составом № 4 является лучшим,высвобождая за 60 мин водорастворимых БАВ 95% от содержания их в таблетке.Для подтверждения высвобождения БАВ растительных экстрактов изтаблеток, в опытах in vitro проведено исследование их специфической активности.4.5. Изучение специфической активности таблеток для рассасывания вопыте in vitroПроведено исследование антимикробной, противовоспалительной ииммуностимулирующей активности.Антимикробная активностьМетод серийных разведенийВ результате сравнительных исследований установлено, что таблетки,содержащие эвкалимин и эстифан, обладают бактериостатической активностью вотношении Staphylococcus aureus 209-P в концентрации 31,2 мкг/мл (таблеткиэкспериментального состава № 4) и 15,6 мкг/мл (таблетки состава № 8), вотношении Esherichia coli АТСС 25922 в концентрации 1500 мкг/мл (все составы),Proteus vulgarisATCC 6896 и Pseudomonas aeruginosaАТСС 9027 в концентрации1000 мкг/мл (все составы) (Таблица 58).141Escherichia coliATCC 25922Proteus vulgarisATCC 6896PseudomonasaeruginosaТаблетки состава № 431,21500100010004000500Плацебо таблеток № 4н/ан/ан/ан/ан/ан/аТаблетки № 815,61500100010001000500Плацебо таблеток № 8 (в пересчетена лимонную кислоту)200020002000н/а2000част.
20002000Лимонная кислота (вспомогательноевещество – корригент вкуса)200020001000200020002000ХарактеристикапрепаратаMicrosporumcanis 352Staphylococcusaureus 209 PATCC 9027Candida albicansATCC 10231Таблица 58Антимикробная активность экспериментальных составов таблетокПримечание: н/а – не активно в тех же условиях опытаОбразцы таблеток плацебо экспериментального состава № 8 обладаютслабой бактериостатической активностью в отношении всех изученных штаммовбактерий в концентрации 2000 мкг/мл (в пересчете на концентрацию лимоннойкислоты в таблетке), что полностью коррелирует с бактериостатическойактивностью самой лимонной кислоты.Более высокая антифунгальная активность установлена у таблеток состава№ 8 в отношении Candida albicans АТСС 10231 в концентрации 1000 мкг/мл, утаблеток составов № 4 ‒ 4000 мкг/мл и в отношении Microsporum canis 3/84 вконцентрации 500 мкг/мл (у всех трех составов).Таблетки плацебо не проявили какой-либо антифунгальной активности втех же условиях опыта в отношении Candida albicans АТСС 10231 и Microsporumcanis 3/84, кроме таблеток плацебо № 8 (слабая антифунгальная активность вотношении Microsporum canis 3/84).142Метод диффузии в агарПроведенные исследования антимикробной активности таблеток длярассасывания методом диффузии в агар (метод "агаровых пластин") позволиливыявить таблетки с наиболее активным действием на грамположительныебактерии рода Staphylococcus.
При нанесении таблеток непосредственно наповерхность застывшего агара установлено, что все изученные таблетки даютзоны задержки роста, при этом наибольшая зона (8 мм) установлена у таблетоксостава № 8 (Таблица 59).Таблица 59Антимикробная активность таблеток, содержащих эвкалимин и эстифан, длярассасывания в полости ртаЗона задержки роста, ммИсследуемые объектыStaphylococcusaureus 209 PCandida albicansATCC 10231Таблетки состава № 44,50Плацебо таблеток № 400Таблетки состава № 88,00Плацебо таблеток № 800Таким образом, таблетки экспериментального состава под №8 являютсяперспективной лекарственной формой антимикробного действия для местногоприменения при воспалительных заболеваний полости рта.Противовоспалительная активностьС помощью ферментных биотест-систем, разработанных в ВИЛАР наоснове индуцибельной NO-синтазы и ксантиноксидазы, в условиях in vitro143исследована сравнительная противовоспалительная активность растительныхэкстрактовэхинацеипурпурной(эстифана)иэвкалиптапрутовидного(эвкалимин), а также экспериментальной фармацевтической композиции (смесирастительныхэкстрактовэстифаниэвкалимин1:1)враствореивтаблетированной форме.Противовоспалительнуюингибирующемудействиюактивностьнаэкстрактов,скоростьоценивалиферментативнойпореакции,катализируемую индуцибельной NО-синтазой и по активности ксантиноксидазыусловиях in vitro.Для проведения исследования были приготовлены 60% водно-спиртовыерастворы индивидуальных растительных экстрактов эстифан, эвкалимин, ихсмеси в соотношении 1:1, а также таблетированная форма, включающая обакомпонента в том же соотношении.Противовоспалительнуюконцентрации 0,2; 1,0; и 2,0активностьрастворовисследоваливмг/мл.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
