Диссертация (1141264), страница 8
Текст из файла (страница 8)
Газовую хроматографию можно применять вкомплексе с другими методами для идентификации компонентов сложныхсмесей.Вкачествепримераможнопривестисочетаниегазовойхроматографии с инфракрасной и масс-спектрометрией [Lindon J. S. et al.,2000].43В зарубежных фармакопеях метод газовой хроматографии в анализепроизводныхбензимидазоловпреимущественноиспользуетсядляопределения остаточных органических растворителей.Согласно Европейской и Британской Фармакопеям для определенияостаточных органических растворителей в субстанции омепразола методомгазо-жидкостной хроматографии в качестве газа-носителя рекомендуетсяиспользовать азот, неподвижная фаза – кварцевая колонка длиной 30 м ивнутреннимдиаметром0,32полицианопропилфенилдиметилсилоксана.ммсВпокрытиемкачествеиздетекторарекомендуется использовать пламенно-ионизационный [EP, 2005; BP, 2009].Вкачествепримеранефармакопейногоспособаопределенияпроизводных бензимидазола методом газожидкостной хроматографии можнопривести следующую методику.Бемитил можно определять методом газожидкостной хроматографии вусловиях: неподвижная фаза – 5 % силикон ХЕ-60 на хезасорбе AW-HMDS0,200 мм (Чехия), температура колонки – 210 оС, температура испарителя –300 оС.
Газ-носитель – азот, скорость потока – 30 мл/мин. Рекомендованныйдетектор – пламенно-ионизационный. В этих условиях время удерживаниябемитила составляет 8 мин [Смирнова Л.А. и др., 2013].44ВЫВОДЫ ПО ГЛАВЕ 11.Проведенкраткийобзорфармакологическихсвойствпроизводных бензимидазола и имидазобензидазола, в их числе соединенияРУ 1205.
Показана перспективность фармацевтической разработки новыхоригинальныхпрепаратовнаосновеновогопроизводногоимидазобензимидазола РУ 1205.2.Анализ публикаций и монографий зарубежных фармакопей,посвященных разработке аналитических методов и контролю качествапроизводных бензимидазола показал, что для идентификации субстанцийпроизводных бензимидазола, в основном, используются спектральныеметоды анализа.
Основным методом является ИК-спектроскопия, но такжеиспользуется УФ-спектроскопия, реже ПМР-спектроскопия. Наряду соспектральными методами используются и прямые методы химическойидентификации в виде качественных реакций на функциональные группы.Для подтверждения подлинности бензимидазолов в лекарственных формахсогласно литературным данным часто используют УФ-спектроскопию,ВЭЖХ. При проведении испытания «Однородность дозирования» и теста«Растворения» лекарственных форм производных бензимидазола используютУФ-спектроскопию.3.Для анализа чистоты субстанций и лекарственных формпроизводныхбензимидазолаиспользуютсяметодытонкослойнойхроматографии и высокоэффективной жидкостной хроматографии (дляопределениясодержанияродственныхпримесей),атакжеметодгазожидкостной хроматографии (для определения содержания остаточныхорганических растворителей).4.Количественноеопределениесубстанцийпроизводныхбензимидазола чаще всего проводят методом кислотно-основного титрованияв неводной среде.Основными методами количественного анализапроизводных бензимидазола в лекарственных формах являются ВЭЖХ иУФ-спектрофотометрия.45ГЛАВА 2.
Объекты и методы исследованияОбъекты исследований представляли собой образцы субстанции новогоотечественного κ-опиоидного анальгетика РУ 1205 серий 1-013, 56, 58, 59,60, 214, 217, 828, 010512, 020512, исходное вещество – 2-аминобензимидазолипромежуточныепродуктыморфолиноэтилбензимидазолифторфенацил)бензимидазолия,егобромидасинтеза–2-амино-1-2-амино-1-морфолиноэтил-3-(4-такжееготвердаядозированнаялекарственная форма – таблетки, покрытые пленочной оболочкой, 10 мг,серий 20213, 30213, 40213, 50213, 60213.Синтез субстанции РУ 1205 осуществлен в ЗАО «ЭМПИЛС-ФОХ»(Ростов-на-Дону,Россия).Образцытехническойсубстанциидляисследований предоставлены ЗАО «ЭМПИЛС-ФОХ».Очистка образцов субстанции путем кристаллизации была проведенаколлективом группы технологии синтеза лекарственных средств химикотехнологической лаборатории опытно-технологического отдела ФГБНУ«НИИ фармакологии имени В.В.
Закусова» (руководитель группы – ведущийнаучный сотрудник, кандидат химических наук – Авдюнина Н.И.).По химической структуре препарат представляет собой дигидрохлорид2-(4-фторфенил)-9-морфолиноэтилимидазо[1,2-α]бензимидазола.FNNN2HClOH2CCH2С21Н23Cl2FN4ONМ.м.
437,34Рис. 6. Структурная формула РУ 120546Свидетели технологических примесей 2-аминобензимидазола (примесь1) и 2-амино-1-морфолиноэтилбензимидазола (примесь 2) получены в группетехнологиисинтезалекарственныхсредствхимико-технологическойлаборатории опытно-технологического отдела ФГБНУ «НИИ фармакологииимениВ.В.Закусова».Бромид2-амино-1-морфолиноэтил-3-(4-фторфенацил)бензимидазолия (примесь 3) предоставлен ЗАО «ЭМПИЛСФОХ».NNH2NNNH2H2CNH1H2CNO2OH2CCFNNH2BrNH2CH2CNO3Рис. 7. Технологические примеси РУ 1205 (1 – 2-аминобензимидазол, 2- 2-амино-1-морфолиноэтилбензимидазол и 3 - бромид 2-амино-1морфолиноэтил-3-(4-фторфенацил)бензимидазолия)Твердая дозированная лекарственная форма – таблетки РУ 1205,покрытые пленочной оболочкой, 10 мг, получены коллективом лабораторииготовых лекарственных форм опытно-технологического отдела ФГБНУ«НИИ фармакологии имени В.В.
Закусова» (зав. лабораторией – д.ф.н.,профессор К.В. Алексеев).47Твердая дозированная лекарственная форма РУ 1205 представляласобой двояковыпуклые таблетки почти белого цвета, покрытые пленочнойоболочкой, дозировкой 10 мг и средней массой таблетки 210 мг.Состав таблеток РУ 1205 (патент №2545861 от 02.10.2013), покрытыхпленочной оболочкой (на одну таблетку):0,0100 г (0,01105 г в пересчете наРУ 1205сухое вещество)Вспомогательные вещества:Лактоза (USP)0,02000 гЛудипресс (Eur.
Ph)0,16695 гМагния стеарат (ТУ 6-09-16-1553-90) 0,00200 гОболочка:До получения таблетки с оболочкойОпадрай (Opadry 200 f280000) (USP)массой 0,210 гИзучение основных фармакопейных показателей качества субстанциии таблеток РУ 1205, покрытых пленочной оболочкой, разработку методиканализа, установление сроков годности и научно-обоснованных нормкачества проводили в аналитической группе химико-технологическойлаборатории опытно-технологического отдела ФГБНУ «НИИ фармакологииимени В.В.
Закусова».Микроскопическийанализсубстанциипроводилсяспомощьюмикроскопа Eclipse 50i (Nikon, Япония).УФ-спектры получены на спектрофотометре UV-1700 (Shimadzu,Япония).ИК-спектрыисследованияполученыотделахимиивгруппефизико-химическихлекарственныхсредствФГБНУметодов«НИИфармакологии имени В.В. Закусова» (Рук. отдела – профессор, член-корр.РАН Т.А. Гудашева, анализ выполнен к.х.н. Ф.С. Байбуртским) надвухлучевом ИК-спектрометре Vertex 70 (Bruker, ФРГ).48ПМР-спектры были получены в группе физико-химических методовисследованийотделахимиилекарственныхсредствФГБНУ«НИИфармакологии имени В.В. Закусова» (Рук. отдела – профессор, член-корр.РАН Т.А.
Гудашева, анализ выполнен к.х.н. В.П. Лезиной) на ПМРспектрометре АС – 250 (Bruker, ФРГ).Для определения рН растворов и потенциометрического титрованиябыли использованы рН-метр Seveneasy S20 (Mettler Toledo, Швейцария) сэлектродом для неводного титрования DGi116-Solvent комбинированным(Mettler Toledo, Швейцария) и иономер универсальный ЭВ-74 (Заводизмерительных приборов, СССР) c электродами ЭСЛ-43-07 и ЭВЛ-1М3(Завод измерительных приборов, СССР).Тест «Растворение» проведен на приборе «Лопастная мешалка» PT-DT70 (Pharmatest, Германия).ДляпроведенияхроматографическогоанализаметодомВЭЖХиспользовали жидкостной хроматограф System Gold HPLC (Beckman, США)с градиентным насосом (модель 127) и спектрофотометрическим детекторомс изменяемой длиной волны (модель 166); программное обеспечение –«Мультихром 1.5» (Амперсенд, Россия).Хроматографическое разделение изучаемых соединений проводили наколонках Hypersil BDS C18 5 мкм 150 × 4,6 мм (Thermo Scientific, США),сорбент С18 с размером частиц 5 мкм) и Hypersil BDS C18 5 мкм 250 × 4,6мм (Thermo Scientific, США), сорбент С18 с размером частиц 5 мкм) визократическом и градиентном режимах соответственно.Также при разработке методик использовались колонки GraceSmart RP18 3 мкм, 150 × 4,6 мм (W.
R. Grace & Co.-Conn., США), сорбент С18 сразмером частиц 3 мкм), Luna C18 (2) 5 мкм 150 × 4,6 мм (Phenomenex,США), сорбент С18 с размером частиц 3 мкм).Анализметодомгазожидкостнойхроматографии(определениеостаточных органических растворителей) выполняли на хроматографе Chrom5 (Лабораторные приборы, ЧССР); детектор пламенно-ионизационный;49программное обеспечение – «Экохром» (ООО «Прибор», Россия). Дляанализа использовали стеклянную набивную колонку размером 2,4 м × 3 мм,заполненную сорбентом 15% Carbowax 1500 на твердом носителе ChromatonN-AW-DMCS (0,200 – 0,250 мм).Определение остаточных органических растворителей в субстанциипроводили по методике, ранее разработанной в аналитической группеопытно-технологического отдела ФГБНУ «НИИ фармакологии имени В. В,Закусова» [Коночкина М.Е.
и др., 2010].Хроматографические условия:- газожидкостной хроматограф с пламенно-ионизационным детектором(Chrom 5);- колонка стеклянная размером 2,4 м × 3 мм, заполненная сорбентом15% Carbowax 1500 на твердом носителе Chromaton N-AW-DMCS (0,200 –0,250 мм) или аналогичная;- температура испарителя: 160 ºС;- температура детектора: 130 ºС;- программа термостатирования колонки: 70 °С в течение 4 минут,затем подъем до 120 °С со скоростью 20 °С в минуту, затем 120 °С в течение6 минут;- газ-носитель: азот (40 мл/мин);- скорость водорода: 40 мл/мин;- скорость воздуха: 400 мл/мин;- внутренний стандарт: н-бутанол;- объем вводимой пробы: 1 мкл.Методика была валидирована по показателям «специфичность»,«линейность» и «пределы обнаружения».Ниже воспроизведены данные о параметрах разделения и результатывалидации, необходимые для подтверждения возможности использованияметодики в наших исследованиях.50Методика позволяет разделить при совместном присутствии: ацетон, 2пропанол, этилацетат, этанол, н-бутанол (см.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
