Диссертация (1141264), страница 7
Текст из файла (страница 7)
Длина волны детектирования – 250 нм[BP, 2009].Содержание родственных примесей в субстанции мебендазола такжепроводят на колонке, заполненной сорбентом С18, размером 100 х 4,6 мм, 3мкм. Анализ проводят в градиентном режиме элюирования со скоростьюпотока 1,2 мл/мин при использовании в качестве подвижной фазы А –раствор аммония ацетата с концентрацией 7,5 г/л, подвижной фазы Б –ацетонитрил.
Аналитическая длина волны детектора - 250 нм [EP, 2005; BP,2009].Количественное определение антигельминтного средства мебендазол втаблетках согласно Фармакопее США проводят на колонке размером 300 ×3,9мм,заполненнойсорбентомС18спредколонкой.Колонкатермостатируется при 30 °С. Подвижная фаза в изократическом режимеэлюирования – смесь метанола и 0,05М раствора калияфосфатадвузамещенного (рН 5,5) в объемном соотношении 60: 40. Длина волныдетектирования – 247 нм, скорость потока подвижной фазы – 1,5 мл/мин[USP 29 – NF 24, 2009].Определение количественного содержания мебендазола в таблеткахпри проведении испытания «Растворение» проводят методом ВЭЖХ в38следующих условиях: колонка, заполненная сорбентом L7(С8), размером 300× 4,6 мм; подвижная фаза представляет собой смесь ацетонитрила ибуферного раствора (3: 7).
Буферный раствор готовят следующим образом: 8г натрия гидроксида растворяют в 2 л воды, добавляют 3 г натриялаурилсульфата и перемешивают, затем добавляют 20 мл ортофосфорнойкислоты, доводя значение pH до 2,5. Скорость подвижной фазы 1 мл/мин,длина волны детектирования – 254 нм [USP 29 – NF 24, 2009].В литературе также можно найти и нефармакопейные методикиопределения производных бензимидазолов с помощью ВЭЖХ.К примеру, существует методика количественного определенияомепразолавсубстанцииметодомВЭЖХсиспользованиемкулонометрического детектора.
Анализ предложено проводить на колонкеPhenomenex Luna С18 размером 250 × 4,6 мм, 5 мкм, в качестве подвижнойфазы использовали смесь ацетонитрил – 0,01 М раствор натрия фосфата с рН7,6 (36:64), скорость потока подвижной фазы 1,0 мл/мин. Напряжение нааналитической ячейке составляло + 900 мВ [Sluggett G. W., 2001].Определение мебендазола и его родственных соединений в таблетках исуспензиях успешно проведен на стальной колонке длиной 250 мм ивнутренним диаметром 4,6 мм, заполненной сорбентом Spherisorb S5 ODS 1размером частиц 5 мкм. В качестве мобильной фазы предлагалосьиспользовать смесь 0,05 М раствора калия фосфата однозамещенного,метанола и ацетонитрила в соотношении 5:3:2.
Скорость потока – 1 мл/мин,колонка не термостатируется. Время удерживания мебендазола в данныхусловиях составляет порядка 7 минут [Al-Kurdi Z., et al., 1999].Другая методика анализа мебендазола в таблетках предполагаетиспользование обращенно-фазовой ВЭЖХ с колонкой Shodex C8 длиной 250мм и внутренним диаметром 3,6 мм. В качестве подвижной фазыпредлагается использовать смесь ацетонитрила, триэтиламина и 0,05 Мнатрия фосфата однозамещенного в соотношении 40: 1,5: 60, доведенную дорН 6,8 разбавленной ортофосфорной кислотой [Argekar A. P., et al., 1997].39Омепразол и домперидон в субстанциях и лекарственных формахпредложено определять в следующих условиях: колонка С18 размером 250 ×4,6 мм, с использованием подвижной фазы, содержащей 0,1% растворфосфорной кислоты – метанол – ацетонитрил в объемном соотношении 2:6:2,прискоростиподвижнойфазы1мл/минбезтермостатирования.Аналитическая длина волны спектрофотометрического детектора - 300 нм[Sivasubramanian L., Anilkumar V., 2007].Анализ домперидона и его трех метаболитов после их извлечения избиологического материала был разработан на колонке Ultrasphere ODS(Beckman Coulter) размером 250 × 4,6 мм, 5 мкм.
Подвижная фазапредставляла собой смесь, содержащую натрия цитрат двузамещенный (10мМ,рН3,4),метанол,ацетонитрил,триэтиламинвсоотношении54,6:34,7:9,9:0,8. Скорость потока – 1,0 мл/мин. В качестве детекторапредлагалось использование флуориметрического детектора и УФ детекторапри длине волны 254 нм [Michaud V., 2007].Разделение лансопразола, омепразола и натрия пантопразола ипродуктов их кислотного гидролиза предлагается проводить на колонкеNovaрak C18 размером 150 × 3,9 мм в подвижной фазе, содержащей 0,05Мраствор калия дигидрофосфата, метанол и ацетонитрил в объемномсоотношении 5: 3: 2. Способ детектирования - УФ-спектрофотометрия,аналитическая длина волны – 280 нм [El-Sherif Z. A., et al., 2006].Аналитическоеразделениелансопразола,егоэнантиомеровиродственных соединений проводят на колонке Chiralpak IA размером 250 ×4,6 мм в подвижной фазе: метилтретбутиловый эфир – EA – этанол – DEA(60: 40: 5: 0,1).
Скорость подвижной фазы – 1 мл/мин, колонкатермостатируется при 25 оС. Аналитическая длина волны УФ-детектора – 285нм.Полупрепаративное разделение рацемической смеси лансопразолапроводят на колонке Chiralpak IA размером 250 × 10 мм в подвижной фазе:метилтретбутиловый эфир – EA – этанол – DEA (60: 40: 5: 0,1). Скорость40подвижной фазы – 4 мл/мин, колонка термостатируется при 25оС.Аналитическая длина волны УФ-детектора – 310 нм [Cirilli R., et al., 2009].Хроматографическая чистота афобазола в субстанции и лекарственныхформах определяется методом ВЭЖХ в следующих условиях: колонкаPhenomenex Luna C 18(2) размером 250 × 4,6 мм, 5 мкм. Подвижная фазапредставляет собой смесь ацетонитрила, метанола и 0,02М раствор калиягидрофосфата pH 7,3 в соотношении 100: 100: 240 по объему [Милкина С. Е.и др., 2006; Грушевская Л. Н., Авдюнина Н.
И., Пятин Б. М., 2011].Количественное определение бемитила по литературным даннымпроводили на колонке фирмы «Элсико» Separon SG-X С18 размером 250 × 4мм, 5 мкм. В качестве жидкой фазы использовали смесь, содержащуюацетатный буфер с рН 3,6 и ацетонитрил в равных соотношениях. Скоростьпотока составляла 1 мл/мин, а аналитическая длина волны – 280 нм.Чувствительность данной методики оказалась в 10 раз выше ранеесуществующих методик и позволяет определять бемитил диапазонеконцентраций от 1 нг/мг до 100 г/мл.Определение дибазола в аналогичных условиях, но с использованием вкачестве аналитической длины волны – 254 нм, также показало хорошиерезультаты.
Время удерживания дибазола составило 16 минут [Смирнова Л.А. и др., 2013].В работах сотрудников ВолгГМУ описаны условия определенияпроизводныхимидазобензимидазолавбиологическихпробахспредварительной экстракцией ацетонитрилом.К примеру, эноксифол и продукт его окисления в биологических пробахопределяют на колонке, заполненной сорбентом С18, размером 250 × 4,6 мм,5мкм. Подвижная фаза представляла собой смесь ацетонитрила и ацетатногобуфера с рН 5,0 в соотношении 60:40. Использовался флуоресцентныйдетектор, где длина волны возбуждения составляла 270 нм, а длина волныэмиссии 330 и 410 нм.
Время удерживания эноксифола составляло около 4,5мин, а продукта его окисления около 5,9 минут [Смирнова Л. А. и др., 2013].41Хроматографическийанализсубстанцииритмидазола (РУ353)проводили в следующих условиях: колонка фирмы «Элсико» Separon SGXС18 размером 100 × 4 мм, 5 мкм. В качестве подвижной фазы визократическом режиме элюирования использовали смесь ацетонитрила и0,1М ацетатного буфера с рН 5,0 в объемном соотношении 70: 30. Скоростьпотока 0,5 мл/мин.
Детектирование проводили при длине волны 280 нм.Время удерживания ритмидазола в условиях анализа составляло около 15минут [Смирнова Л. А. и др., 2013].Хроматографический анализ субстанции амфедазола выполняли наколонке фирмы «Элсико» Separon SGX С18 размером 150 мм × 4 мм, 5 мкм.В качестве подвижной фазы в изократическом режиме элюирования так же,как и для анализа ритмидазола использовали смесь ацетонитрила и 0,1 Мацетатного буфера с рН 5,0 в соотношении 70: 30.
Скорость потока 0,5мл/мин. Детектирование производили при длине волны 280 нм. Времяудерживания в условиях анализа составляло около 21 минуты [Смирнова Л.А. и др., 2013].Былипредложеныследующиеусловияхроматографическойидентификации соединения РУ 64: колонка Biosil ODS 5S размером 100 × 4мм, 5 мкм; подвижная фаза – смесь ацетонитрила и ацетатного буфера с pH5,0 в объемном соотношении 70: 30. Скорость потока при определениисоставила 1 мл/мин, а для детектирования использовали УФ-детектор саналитической длиной волны 265 нм.
В данных условиях время удерживанияРУ 64 составило около 15 минут [Смирнова Л. А. и др., 2013].Определение препарата диабенол предлагалось проводить на колонкеСиласорб С18 размером 150 × 2 мм, 7 мкм. В качестве подвижной фазы былавыбрана смесь ацетонитрила и ацетатного буфера с pH 5,0 в равныхпропорциях. Скорость элюирования – 1 мл/мин, при этом давление в колонкедостигало 126 бар.
Детектирование проводили при 280 нм. Времяудерживания диабенола составило 25 минут [Смирнова Л. А. и др., 2013].42Соединение РУ 1205 при определении в биологических пробах спредварительнойэкстракциейацетонитриломхроматографировалинаколонке SUPELCOSIL LC-18 (100 х 4,6 мм, 5 мкм). Элюент при анализе визократическом режиме представлял из себя смесь ацетонитрила и растворакалия фосфата двузамещенного с концентрацией 50 мМоль и рН 6,7 вобъемном соотношении 1:1.
РУ 1205 детектировали при длине волны 205 нм.Время удерживания составляло около 8,7 мин [Смирнова Л. А. и др., 2012;Смирнова Л. А. и др., 2013; Спасов А. А. и др. 2014].1.2.3.3. Газожидкостная хроматографияМетод газожидкостной хроматографии (ГЖХ) - высокоэффективныйметод хроматографии, к основным преимуществам которого можно отнестибыстроту анализа, высокую точность, чувствительность и возможностьавтоматизации [Гольберт К. А. и др., 1990; Гиошон Ж.
и др, 1991; Сноу Н.,2003].СпомощьюметодаГЖХмогутбытьпроанализированыфармакологически активные вещества с молекулярной массой меньше 400любогоагрегатногосостояния,удовлетворяющиеопределеннымтребованиям: летучесть, термостабильность, инертность. ГЖХ — основойметод определения содержания остаточных органических растворителей влекарственных средствах [Сноу Н., 2003; USP 29 – NF 24, 2009].Еще одним преимуществом метода имеется возможность путемподборасоответствующихсорбентовилидериватизацииисходныхсоединений регулировать в широких пределах относительную летучестьразделяемых компонентов.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
