Диссертация (1141264), страница 6
Текст из файла (страница 6)
Обнаружение зон адсорбции проводят в УФ-свете при длиневолны 254 нм [EP, 2005; BP, 2009].1.2.3.2.Высокоэффективная жидкостная хроматографияЖидкостнаяхроматография–этометодразделениявеществ,основанный на различии в их распределении между двух несмешивающихсяфаз, в которых подвижная фаза – жидкость, которая движется сквозьнеподвижную фазу, находящуюся в хроматографической колонке.ВфармацевтическоманализеметодВЭЖХиспользуетсядлякачественного и количественного анализа лекарственных средств, особенночасто – для определения примесей, а также применяется в клинических ифармакокинетических исследованиях, связанных с анализомвеществсоединений в биологических матрицах [Стыскин Е. Л.
И др., 1986; КрыловЮ. Ф. И др., 1987; Арзамасцев А. П. И др., 1989; Садек П., 2006; ГФ XIII,2015].В фармацевтической практике, в основном, используется обращеннофазовый режим ВЭЖХ, при котором разделение соединений происходит нанеполярном сорбенте с применением полярного элюента. В качествесорбентов наиболее часто используют пористые силикагельные частицыдиаметром от 3 до 10 мкм, химически модифицированные октадецильнымигруппами [Gazdag M.
et al., 1988].33Подвижной фазой при проведении анализа методом обращено-фазовойВЭЖХ в основном являются смеси воды, ацетонитрила и метанола, а также(реже) тетрагидрофурана. К этим смесям могут быть добавлены буферныеили ион-парные реагенты (соли фосфорной, серной или уксусной кислот идр.). Используемые смеси позволяют легко проводить детектирование ирастворяют практически любые фармакологически активные соединения иих примеси [Gazdag M. et al., 1989; Садек П., 2006].Методы детектирования – УФ-спектрофотометрия (наиболее часто), атакже флюориметрия.
Также используют электрохимические и массспектрометрические детекторы [Luypaert J. et al., 2007].Описание анализа производных бензимидазола методом ВЭЖХ частовстречается в научной литературе.Согласно Фармакопее США условия хроматографирования приколичественном определении альбендазола в лекарственном препаратесуспензия для приема внутрь следующие: колонка, заполненная сорбентомL1(C18) размером 250 × 4 мм.
Подвижная фаза – смесь 1200 мл метанола ибуферного раствора Na2HPO4 (11 г на 800 мл воды). Длина волныдетектирования – 308 нм, скорость потока подвижной фазы – 2 мл/мин [USP29 – NF 24, 2009].Определение количественного содержания альбендазола в таблеткахпроводят в следующих условиях: стальная колонка, заполненная сорбентомC18 размером 250 × 4,6 мм; подвижная фаза – смесь 600 мл метанола ибуферного раствора (NH4)2HPO4 (0,5 г в 400 мл воды «для хроматографии»),аналитическая длина волны спектрофотометрического детектора – 254 нм[USP 29 – NF 24, 2009].В Британской Фармакопее условия хроматографирования при оценкесодержания родственных примесей альбендазола следующие: колонка,заполненная сорбентом С18 размером 250 × 4,6 мм, 5 мкм.
Подвижная фаза –смесь 700 мл метанола и 300 мл водного раствора однозамещенного фосфата34аммония с концентрацией вещества 1,67 г/л. Скорость потока – 0,7 мл/мин,длина волны детектирования – 254 нм.Оценку содержания родственных примесей астемизола проводят вусловиях градиентной ВЭЖХ на колонке, заполненной сорбентом С18,размером 100 × 4,6 мм, 3 мкм. Подвижная фаза А представляет собой водныйраствор тетрабутиламмония сульфата однозамещенного в концентрации 17г/л, подвижная фаза B – ацетонитрил.
Длина волны детектирования – 278 нм,скорость потока подвижной фазы – 1,5 мл/мин. Астемизол элюируется на 9минуте. В качестве внутреннего стандарта для количественной оценкииспользуется раствор кетоконазола.Количественное определение субстанции и капсул лансопразола смодифицированным высвобождением, согласно Фармакопее США проводятв следующих условиях: колонка, заполненная сорбентом С18 размером 250 ×4,6 мм, 5 мкм, режим элюирования – изократический, подвижная фаза –смесь вода – ацетонитрил – триэтиламин в объемном соотношении 60: 40: 1,значение рН подвижной фазы составляет 7,0.
Длина волны детектирования –258 нм, скорость потока подвижной фазы – 1 мл/мин [USP 29 – NF 24, 2009].Определение примесей в субстанции лансопразола по даннымФармакопеи США проводят на колонке, заполненной сорбентом С18,размером 150 × 4,6 мм, 5 мкм. Определение рекомендовано проводить вградиентном режиме элюирования: подвижная фаза А – вода, подвижнаяфаза Б – смесь ацетонитрила, воды и триэтиламина в объемном соотношении160: 40: 1, значение рН доводят до 7,0 с помощью ортофосфорной кислоты.Длина волны детектирования – 285 нм.Количественная оценка содержания лансопразола в лекарственнойформе капсулы с замедленным высвобождением проводится в тех жеусловиях [USP 29 – NF 24, 2009].Наличие примесей в субстанциях бенперидола и дроперидола методомВЭЖХ определяют в свежеприготовленных растворах в тех же условиях, чтои анализ чистоты астемизола, при длине волны детектора – 275 нм.
Время35удерживания бенперидола в приведенных условиях составляет около 6,5минут, дроперидола – около 7 минут. По данным Фармакопеи США,определениеродственныхпримесейиколичественноеопределениедроперидола в инъекционном растворе проводят на колонке, заполненнойсорбентом С18, размером 250 × 4,6 мм, 10 мкм. В качестве подвижной фазыиспользуют смесь метанол – вода – боратный буферный раствор (растворборной кислоты (31 г в 1000 мл воды), значение рН которого доводят до 7,0 спомощью раствора натрия гидроксида (1:5)) в объемном соотношении – 700:280: 20. Режим элюирования изократический, скорость потока подвижнойфазы – 1 мл/мин, длина волны детектирования – 280 нм [USP 29 – NF 24,2009].Качественный и количественный анализ цианокоболамина выполняютв следующих условиях: колонка, заполненная сорбентом С8, размером 250 ×4,6 мм, 5 мкм в изократическом режиме элюирования.
В качестве подвижнойфазыиспользуютсмесьметанолаирастворанатрияфосфатадвузамещенного, доведенного до pH 3,5 ортофосфорной кислотой, вобъемном соотношении 26,5: 73,5. В качестве детектора используетсяспектрофотометрический детектор с аналитический длиной волны 361 нм[BP, 2009].Хроматографические условия определения домперидона малеата спомощью метода ВЭЖХ следующие: режим элюирования – градиентный,колонка, заполненная сорбентом С18, размером 100 × 4,6 мм, 3 мкм.
Вкачестве подвижной фазы А используют раствор ацетата аммония сконцентрацией 5 мг/мл, подвижной фазы В – метанол. Скорость потока 1,5мл/мин, длина волны детектирования – 280 нм [BP, 2009].Анализ хроматографической чистоты оксфендазола проводят наколонке, заполненной сорбентом С18, размером 250 х 4,6 мм, 5 мкм, вкачестве подвижной фазы используют смесь ацетонитрил – раствор натрияпентансульфоната с концентрацией 2 мг/мл (рН 2,7) в объемном36соотношении 36: 64. Длина волны детектирования – 254 нм, скорость потокаподвижной фазы 1 мл/мин [EP, 2005; BP, 2009].СогласноФармакопееСШАколичественноеопределениеоксфендазола в лекарственной форме суспензия для приема внутрьпроводится в следующих условиях: предколонка, заполненная сорбентом L2,стальная колонка 250 × 4,6 мм, заполненная сорбентом L1 (C18), подвижнаяфаза – смесь 225 мл ацетонитрила и 800 мл раствора натрия ацетата в воде сконцентрацией 2,5 мг/мл (значение pH раствора доводят до 4,75±0,1 спомощью уксусной кислоты ледяной).
Длина волны детектирования – 254нм, скорость потока – 1 мл/мин [USP 29 – NF 24, 2009].Условия хроматографирования при оценке содержания примесей всубстанциях омепразола и омепразоланатрия следующие: колонка,заполненная сорбентом С8, размером 150 х 4,0 мм, 5 мкм, подвижная фаза:смесь ацетонитрил – раствор динатрия гидрофосфата с концентрацией 1,4 г/л(рН 7,6), режим элюирования изократический, скорость потока подвижнойфазы – 1 мл/мин, длина волны детекторования - 280 нм [EP, 2005; BP, 2009].По данным Фармакопеи США определение содержания примесей иколичественное определение в субстанции омепразола следует проводить наколонке, заполненной сорбентом С8, размером 150 х 4,6 мм, 5 мкм визократическомрежимеэлюированиясиспользованиемвкачествеподвижной фазы смесь фосфатный буфер с рН 7,6 – ацетонитрил в объемномсоотношении 3:1, скорость потока – 0,8 мл/мин, длина волны детектирования– 280 нм [USP 29 – NF 24, 2009].Хроматографический анализ омепразола в капсулах рекомендуетсяпроводить на такой же колонке, но в градиентном режиме элюирования.Подвижная фаза А – щелочной раствор глицина в воде с концентрацией 3мг/мл, подвижная фаза Б – смесь ацетонитрила и метанола в объемномсоотношении85:15,скоростьпотока1,2детектирования – 305 нм [USP 29 – NF 24, 2009].мл/мин,длинаволны37Определение примесей в субстанции фенбендазола проводят наколонке, заполненной сорбентом С8, размером 150 х 4,6 мм, 5 мкм.
Режимэлюирования градиентный, подвижная фаза А: вода – метанол – уксуснаякислота в объемном соотношении 70: 30: 1, подвижная фаза Б: метанол –вода – уксусная кислота в объемном соотношении 70: 30: 1, скорость потока1 мл/мин, длина волны детектирования – 280 нм [USP 29 – NF 24, 2009].Анализ хроматографической чистоты флубендазола рекомендованопроводить на колонке, заполненной сорбентом С18, размером 100 х 4,6 мм, 3мкм, колонку термостатируют при 40 °С. Анализ проводят в градиентномрежиме элюирования со скоростью потока 1,2 мл/мин при использовании вкачестве подвижной фазы А – раствор аммония ацетата с концентрацией 7,5г/л, подвижной фазе Б – ацетонитрил.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
