Диссертация (1140633), страница 15
Текст из файла (страница 15)
В ходе работы нами проведено гемокультивирование 46 аликвот крови,отобранных из образцов аутоэритроцитной массы из ПК и донорскойэритроцитной массы, заготовленных в ОГХК. Результаты бактериологическиханализов были отрицательны во всех случаях. Это, очевидно, говорит о высокомуровне контроля за соблюдением санитарно–эпидемиологического режима навсех этапах заготовки, хранения и обработки компонентов крови.Наряду с этим, непосредственно перед трансфузией, производилосьопределение степени гемолиза в образцах отмытой аутоэритроцитной массы изПК путем анализа на свободный гемоглобин с последующим расчетом степенигемолиза. В результате работы выявлено, что при среднем уровне свободногогемоглобина 19,2 ± 5,8 г/л в образце определялся гемолиз >1%, в то время как приуровне свободного гемоглобина 4,4 ± 2,3 г/л степень гемолиза была ниже 1%.Всего исследовано 115 образцов.
За время исследования гемолиз был выявлен в24 образцах аутологичной эритроцитной массы, которая подверглась утилизации.Крометого,понятиеподразумеваетабсолютнуюнежелательныхэффектов«безопасностьминимизациютрансфузийуаутотрансфузии»,илиполноеноворожденныхнесомненно,исключениедетей.Входеисследования нами предполагался учет вероятных реакций и осложнений,93которые могли бы проявиться после переливания как аутологичной, так идонорской эритроцитной массы. Однако за период исследования были отмеченылишь транзиторные посттрансфузионные реакции: снижение диуреза (4 в Гр. 1против 2 в Гр.
2) в течение 3 часов после переливания (диурез менее 1 мл/кг/ч), атакже фебрильная реакция с максимальным подъемом температуры тела до 37,5 ̊С(у 4 новорожденных в Гр. 1 и 3 – в Гр. 2). Имевшие место реакции купировалисьсамостоятельно в течение нескольких часов, не требуя специальной терапии.Исходя из вышеизложенного, можно заключить, что переливание отмытойаутологичной эритроцитной массы из ПК новорожденным в послеоперационномпериоде является безопасным методом аутотрансфузии, исключающим серьезныепосттрансфузионные осложнения.4.2 Описание метода заготовки и применения аутологичных эритроцитов изпуповинной крови для коррекции анемии у новорожденныхВ ходе нашего исследования в 2008 году была разработана и в 2011 годуутверждена медицинская технология «Заготовка, хранение и применениеаутологичной эритроцитной массы из пуповинной крови для терапии анемии уноворожденных». В дальнейшем, в результате анализа статистики по заготовке,хранению и утилизации пуповинной крови и, основываясь на нашем опытепрактического применения данного метода, совместно со специалистами ОГХКмедицинская технология в 2013 году была оптимизирована и успешноприменяется в ОХРИТН.Сущность методикизаключается в сбореаутологичнойкрови изплацентарной части пуповины в специально предназначенные для этогоодноразовые пластиковые трансфузионные системы, хранении в течение 21 дня,разделении цельной аутопуповинной крови перед трансфузией в закрытомконтуре на плазму и эритроцитную массу путем центрифугирования споследующим отмыванием эритроцитной массы в стерильном физиологическом94растворе и применением полученной отмытой аутологичной эритроцитной массыиз пуповинной крови у новорожденных детей с целью терапии анемии.Предлагаемая методика предназначена для врачей акушеров-гинекологов,неонатологов, трансфузиологов либо гематологов, работающих в перинатальныхцентрах, родильных домах, детских многопрофильных больницах, а также настанцияхпереливаниякровииливотделенияхтрансфузиологиимногопрофильных лечебных учреждений.Краткое описание этапов оптимизированного метода представлено ниже,болееполнаяверсиятехнологиисодержитсявразделе«Приложения»(Приложение 2):1 этап.
Заготовка пуповинной кровиДлясборапуповиннойкровипослерожденияребенкапуповинуклеммировали и пересекали. В стерильных условиях производили пункцию веныдистальной (плацентарной) части пуповины специальной иглой, входящей всостав системы для сбора и фракционирования пуповинной крови и производилизабор пуповинной крови. Затем пластиковый мешок с пуповинной кровьюмаркировался и передавался для хранения в отделение гравитационной хирургиикрови.2 этап.
Закладка на хранение и выбраковка образцов ПКВ отделении гравитационной хирургии крови проводилось контрольноевзвешивание полученного из родильного отделения пластикового мешка с кровьюи его регистрация. Образцы, массой менее 60 г утилизировались, о чем вносиласьсоответствующаязаписьвжурнал.Пригодныедляпереливанияпромаркированные образцы аутологичной пуповинной крови закладывались нахранение в специально предназначенный для этого медицинский холодильник на21 день. В случае истечения данного срока хранения, кровь подвергаласьутилизации, о чем производилась соответствующая запись в журнал.953 этап.
Предтрансфузионная обработка образцов ПКПривозникновенииклиническойситуации,требующейтрансфузииэритроцитной массы новорожденному ребенку, и наличии заготовленнойаутологичной ПК на хранении, по заявке врача ОХРИТН, образец ПК подвергалсяспециальной предтрансфузионной обработке и контрольному лабораторномуисследованию с последующей передачей компонента «отмытая аутоэритроцитнаямасса из пуповинной крови» в отделение для выполнения аутотрансфузииноворожденному.4 этап. Клиническое применение аутологичной отмытой эритроцитноймассы из ПК.В соответствии с требованиям Приказа Минздрава РФ от 2 апреля 2013 г. N183н «Об утверждении правил клинического использования донорской крови и(или) ее компонентов» (далее - Приказ), на основании отечественных имеждународных руководств по трансфузионной терапии новорожденных, намибыли разработаны и применены в практике ОХРИТН показания к переливаниюаутоэритроцитной массы из пуповинной крови(Приложение 1).
Передпереливанием в ОХРИТН контейнер с аутологичной отмытой эритроцитноймассой из ПК , согласно требованиям Приказа, проходил обязательные процедурывизуальной оценки и пробы на совместимость. Непосредственно передпереливанием контейнер с отмытой аутологичной эритроцитной массой из ПКсогревался , в ламинарном шкафу производился набор компонента в одноразовыйстерильный шприц, после чего к шприцу присоединялась инфузионная система.Трансфузия проводилась через шприцевой инфузионный насос.
Скоростьтрансфузиисоответствоваларекомендуемойвнеонатальнойпрактикеисоставляла 5 мл/кг/час. В течение переливания и последующих часов послепроводилсямониторинггемодинамическихпоказателейвизуальная и количественная оценка диуреза, термометрия.иоксигенации,96ВЫВОДЫ1.Полученная в результате применения разработанной и оптимизированнойметодики заготовки, хранения и обработки аутологичной пуповинной крови,отмытая аутологичная эритроцитная масса из пуповинной крови поколичественномуотмытуюикачественномудонорскуюэритроцитнуюсоставумассузначительнокровизапревосходитсчетналичияаутологичных лейкоцитов, а также достоверно более высокого уровнягематокрита (р˂0,01), гемоглобина (р˂0,001) и эритроцитарных индексов MCV, MCH, MCHC (р˂0,001).2.Результаты популяционного и функционального анализа клеток пуповиннойкрови показали, что терапевтический эффект от переливания аутологичнойпуповинной крови пациентам первых дней жизни может определяться нетолько присутствием в ней эритроцитов, но и высоким содержаниемжизнеспособныхклетокиммуннойсистемы,атакжеприсутствиемфункционально активных гемопоэтических стволовых клеток.3.Не выявлено достоверного снижения абсолютного содержания эритроцитов,при хранении образцов пуповинной крови в течение 4 недель притемпературе +4 ̊С.
Однако функциональная активность клеток иммуннойсистемы и гемопоэтических стволовых клеток критически снижается с 3суток хранения до полной утраты их способности к формированию колонийпосле 14 дней хранения.4.Применение аутоэритроцитной массы из пуповинной крови новорожденнымдетям в послеоперационном периоде позволяет в 88% случаев отказаться отиспользования донорских компонентов крови, причем эффективностьпримененияменьшихобъемоваутоэритроцитов(11,60±1,38мл/кг)сопоставима с эффективностью бóльших объемов (20,84±3,01 мл/кг)донорских эритроцитов, традиционно используемых при трансфузияхноворожденным детям в послеоперационном периоде.975.Доказано, что после трансфузии отмытой аутоэритроцитной массы изпуповинной крови новорожденным детям в раннем послеоперационномпериоде в сравнении с применением донорской эритроцитной массыдостоверно сокращаются сроки проведения традиционной искусственнойвентиляции легких (р=0,007, p<0,01), значительно сокращаются сроки снятияпослеоперационных швов после заживления раны первичным натяжением(р=0,0006, p<0,001), продолжительность полного парентерального питаниясокращается в 1,8 раза, а сроки начала энтерального кормления – в 2,1 раза,достоверно сокращается количество койко-дней (р=0,017; р<0,05).6.Оптимизированная методика заготовки и хранения пуповинной кровиявляется доступным и безопасным методом аутодонорства в неонатологии, априменение аутоэритроцитной массы из пуповинной крови - безопасным ивысокоэффективнымметодомаутотрансфузииноворожденных детей в послеоперационном периоде.втерапиианемии98ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ1.Методика заготовки, хранения и применения аутологичной эритроцитноймассы из пуповинной крови для терапии анемии новорожденных детейрекомендуется для использования в условиях перинатального центра и/илиучреждения родовспоможения при наличии в них подразделения службы крови.2.Разработанные показания к трансфузии аутоэритроцитной массы изпуповинной крови (Приложение 1) рекомендованы к применению для терапиианемии новорожденных детей в послеоперационном периоде.