Диссертация (1140633), страница 14
Текст из файла (страница 14)
При этом, криоконсервируемыестволовые клетки составляют всего лишь 0,01% от ядросодержащих клетокпуповинной крови, в то время как остальной объем крови (эритроциты,тромбоциты, плазма) подвергается утилизации. Тем не менее, пуповинная кровьявляется ценным источником компонентов для трансфузии, что было показано входе нашей работы и это мнение согласуется с выводами зарубежных коллег.Для получения отмытой аутологичной эритроцитной массы из ПК намииспользовалась разработанная и оптимизированная в ходе работы методика позаготовке, хранению и обработке аутологичной ПК.Результатысравнительногоклиническогоанализаотмытойаутоэритроцитной массы из ПК и цельной ПК после заготовки ожидаемо выявилистатистически достоверно более высокие значения показателей гемограммы вобразцах отмытой аутоэритроцитной массы из ПК.Вместестем,сравнительныйклиническийанализотмытойаутоэритроцитной массы из ПК и отмытой донорской эритроцитной массы такжепоказал различие в составе и количестве переливаемых клеток.
Поскольку всеобразцы донорской эритроцитной массы для применения у новорожденных детейпризаготовкеподвергаютсялейкотромбофильтрации,ааутологичнаяэритроцитная масса сохраняет свой лейкоцитарный пул, в составе отмытойаутоэритроцитной массы из пуповинной крови определяются лейкоциты.Однако, важным результатом исследования следует считать то, что ваутологичном компоненте достоверно высокими оказались значения гематокрита(р˂0,01), гемоглобина (р˂0,001) и эритроцитарных индексов - MCV, MCH, MCHC88(р˂0,001) в сравнении не только с цельной аутопуповинной кровью, но и сдонорской отмытой эритроцитной массой.Таким образом, нами было продемонстрировано, что в результатеприменения разработанной и оптимизированной технологии обработки ПКаутологичная отмытая эритроцитная масса из ПК по качественному иколичественному составу клеток значительно превосходит отмытую донорскуюэритроцитную массу.В нашей работе также проведено исследование изменений структурнофункционального состояния и жизнеспособности клеток нефракционированнойПК в результате хранения в условиях, стандартно применяемых для храненияэритроцитной массы.
Проведенная нами работа подтвердила данные о высокойсохранности аутоэритроцитов при длительном хранении цельной аутологичнойпуповинной крови. Между тем, результаты популяционного и функциональногоанализаклетокпоказали,чтотерапевтическийэффектотпереливанияаутологичной ПК пациентам первых дней жизни может определяться не толькоприсутствиемвнейаутологичныхэритроцитов.Высокоесодержаниежизнеспособных клеток иммунной системы, а также присутствие функциональноактивных ГСК позволяет предположить, что в достижении конечного результатамогут быть задействованы иные механизмы.Во–первых,реинфузияаутологичныхклетокпозволяетизбежатьиммунологических реакций и угнетения кроветворения, описанных в ответ наприменение клеток донорской крови, что представляется немаловажным дляпациентовсанемиейнедоношенныхилиперенесшиххирургическоевмешательство (острую кровопотерю) в раннем постнатальном периоде.Во–вторых, среди растворимых факторов, секретируемых клетками ПК invitro и in vivo, присутствуют многочисленные цитокины и факторы, способныенапрямую или опосредованно стимулировать гемопоэз.И, наконец, нормализация кроветворения и восстановление показателейпериферической крови могут быть связаны непосредственно с хоумингом89аутологичныхГСКвсуществующиекроветворные«ниши»ипрямымувеличением численности ростков кроветворения.Оценивая эффективность трансфузий отмытой аутологичной эритроцитноймассы из ПК и отмытой донорской эритроцитной массы в послеоперационномпериодеспозициилабораторныхкритериев,мысравнилипоказателигемоглобина и гематокрита новорожденных детей в 6 временных точках: дотрансфузии, спустя сутки, на 1, 2, 3 и 4 неделе после трансфузии.
При этом,значения гемоглобина и гематокрита в 1-й и во 2-й группе исследования передтрансфузией были достоверно равны (р˂0,05).В результате, в обеих группах показатели гемоглобина и гематокритаожидаемо возросли в первые сутки после переливания. Уровни гемоглобина игематокрита в следующих временных точках проявляли умеренное снижениезначений в течение месяца, однако в группе детей, которым переливаласьаутологичная эритроцитная масса из ПК, уровень гемоглобина и коррелирующийс ним уровень гематокрита оставались более высокими по сравнению споказателями в группе, где новорожденным детям проводилась трансфузиядонорской эритроцитной массы.Кроме того, результаты работы показали, что у 68 детей (88%) объемперелитой отмытой аутоэритроцитной массы из ПК был достаточным длякупирования анемии и восстановления целевых показателей гемоглобина игематокрита.
Дополнительные трансфузии донорской эритроцитной массыпотребовались только 9 новорожденным детям (12%). При этом, важно отметить,что средний объем перелитой отмытой аутоэритроцитной массы из ПКноворожденным Гр. 1 был почти в два раза меньше (11,1 ± 4,2 мл/кг), чем объемотмытой донорской эритроцитной массы (20,4 ± 8,2 мл/кг). Такая разница вобъемах, переливаемых эритроцитсодержащих компонентов связана, с однойстороны, с лимитом забора аутологичной ПК при рождении, а с другой –стандартнымиобъемами,традиционноиспользуемымидонорской эритроцитной массы (15–20 мл/кг).припереливании90Сравниваяклиническуюэффективностьтрансфузийаутологичнойэритроцитной массы из ПК и донорской эритроцитной массы, проведенных враннем послеоперационном периоде (с 1 по 6 сутки), мы проанализировалинесколько клинически значимых показателей, определяющих дальнейшее течениереабилитационного периода и качество выхаживания новорожденного ребенка.
Кним относятся: продолжительность различных видов респираторной терапии,кардиотонической терапии, сроки восстановления пассажа по желудочно–кишечному тракту и продолжительности проведения полного парентеральногопитания, сроки возобновления/начала энтерального кормления, сроки снятияпослеоперационных швов и сроки госпитализации (койко-дни).Поскольку все новорожденные дети в раннем послеоперационном периоденуждаются в респираторной поддержке различной степени интенсивности иинвазивности, в ОХРИТН применяются следующие методы респираторнойтерапии:дотациядополнительногокислородавкувез,неинвазивнаяреспираторная поддержка методом назального СРАР, традиционная ИВЛ сприменением различных режимов вентиляции, высокочастотная осцилляторнаяИВЛ. При сравнении продолжительности послеоперационного применения этихвидов респираторной терапии после трансфузии аутоэритроцитной массы изпуповинной крови и донорской эритроцитной массы нами было выявленостатистически значимое различие (р=0,007, p<0,01) в продолжительностипроведениятрадиционнойинвазивнойИВЛ,поостальнымметодамреспираторной терапии достоверных различий нами выявлено не было.В кардиотонической терапии в послеоперационном периоде нуждаласьтолько часть детей, включенных в исследование.
В терапии применяласьвнутривенная капельная продленная инфузия Допамина 4% и Добутрекса 2,5%(от 5 до 10 мкг/кг/мин). По продолжительности послеоперационного примененияэтих препаратов у новорожденных детей после трансфузии аутоэритроцитноймассы из пуповинной крови и донорской эритроцитной массы не было выявленостатистически значимых различий.91Важным признаком благоприятного течения послеоперационного периодаявляется заживление операционной раны первичным натяжением с последующимудалениемпослеоперационныхшвов.Присравнениивремениснятияпослеоперационных швов было установлено, что детям, перенесшим трансфузиюаутоэритроцитной массы из ПК, швы снимали в среднем на 8,9 ± 1,6 сутки, в товремя как детям из группы,где проводилось переливание донорскойэритроцитной массы, эту процедуру проводили в среднем на 19,3 ± 8,8 суткипосле операции, что явилось значительным статистически значимым различием(р=0,0006, p<0,001).Воценкетеченияпослеоперационногопериодатакжезначимымифакторами являются: время восстановления пассажа по кишечнику, началоэнтеральногокормления,продолжительностьпроведенияполногопарентерального питания.
При сравнении этих параметров между группами былоустановлено, что лишь восстановление пассажа по желудочно-кишечному трактустатистически значимо не различалось в двух группах, тогда как средниезначения продолжительности проведения ППП и сроков начала энтеральнойнагрузки в группах были различными. Так, продолжительность проведения ПППв послеоперационном периоде у новорожденных детей в основной группе всреднем была почти в два раза меньше, чем в группе сравнения (8,9 ± 6,6 сутокпротив 16,4 ± 8,3 суток) и энтеральная нагрузка, соответственно, начиналась вболее ранние сроки (5,1 ± 3,4 против 10,8 ± 8,2 послеоперационные сутки).Поскольку значимым показателем, оценивающим эффективность лечения ивыхаживания новорожденных детей, является срок госпитализации (койко-день),нами было проведено сравнение данного показателя в группах.
Установленостатистически значимое различие между двумя группами по срокам пребыванияпациентов в стационаре. Общее для всех групп новорожденных детей количествокойко-дней составило в среднем 37,8 ± 17,5, при этом в Гр. 1 их количествооказалось достоверно ниже (р=0,017; р<0,05), чем в Гр. 2: 34,5 ± 14,5 против 44,12± 23,7.92Таким образом, на основании клинико-лабораторных данных с высокойстепенью достоверности нами было доказано преимущество трансфузии (даже сиспользованием меньших объемов) аутологичной эритроцитной массы из ПК всравнении с донорской эритроцитной массой. На наш взгляд, данный эффект отприменения аутологичной эритроцитной массы из ПК обусловлен ее клеточнымсоставом.Оценивая эффективность аутотрансфузии эритроцитной массы из ПК,нельзя забывать о необходимости обеспечения безопасности ее применения.Принимая во внимание, что существует риск бактериального загрязнения вовремя забора пуповинной крови, мы использовали закрытые системы для сбора ихранения пуповинной крови, которые практически исключают бактериальнуюконтаминацию при соблюдении стерильности во время процедуры заготовкикрови.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
