Диссертация (1140130), страница 18
Текст из файла (страница 18)
Значимость парных сравнений (р) частот встречаемостимикробов-ассоциантов у больных тяжелой формой ЭБВИ АсБв возрасте от 3 до 7 летМикробы-ассоциантыStreptococcus pyogenesStreptococcus pyogenes,Candida albicans, Staphylococcus aureus,Staphyloccus epidermidis,Streptococcus viridansStreptococcus viridansStreptococcus viridians,Staphyloccus epidermidis,Staphyloccus aureus, Candida albicans11-2-3-20,37--30,231-40,2311Примечание: р определяли с помощью точного биномиального теста с поправкойБонферрони-Холма.Таблица 4.12.
Значимость парных сравнений (р) частот встречаемостимикробов-ассоциантов у больных тяжелой формой ЭБВИ АсБв возрасте от 7 до 15 летМикробы-ассоциантыStreptococcus pyogenesStreptococcus pyogenes,Candida albicans, Staphylococcus aureus,Staphyloccus epidermidis, Streptococcus viridansStreptococcus viridansStreptococcus viridians,Staphyloccus epidermidis, Staphyloccus aureus,Candida albicans11-2-3-20,75--30,751-40,7511Примечание: р определяли с помощью точного биномиального теста с поправкойБонферрони-Холма.У детей в возрасте от 3 до 7 лет при среднетяжелой форме ЭБВИ АсБ(таблица 4.13) S. viridians (30,4%), а также S. рyogenes (27,8%) встречаличаще других бактерий, выделенных в монокультуре.
Следующими позначимости явились S. aureus (8,9%), S. epidermidis (5,1%) и C. albicans(5,1%). В ассоциации с другими микроорганизмами (C. albicans, S. aureus,110S. epidermidis, S. viridians) аналогично чаще выделяли S. рyogenes (10,1%),S. viridians (8,9%), реже – стафилококки (S. aureus – 2,5%, S. еpidermidis –1,2%). При тяжелой форме заболевания у младших пациентов высевалитолько стрептококки, при этом значительно чаще S.
рyogenes в монокультуре(58,8%),реже–S. viridians(11,8%).Вассоциациисдругимимикроорганизмами S. рyogenes и S. viridians обнаруживали в 17,6% и 11,8%случаев соответственно. Сравнивая частоты встречаемости различныхбактерий-ассоциантовЭБВИ присреднетяжелойитяжелойформахзаболевания у детей от 3 до 7 лет, достоверные различия обнаруживалитолько относительно S. pyogenes, который чаще выделяли при тяжелой формеболезни, чем среднетяжелой (p=0,02).
Обнаружение этого ассоцианта имелостатистически значимую связь с развитием тяжелой формы ЭБВИ АсБ (OR =3.64, 95% ДИ: 1.18 – 11.36).Сравнение частоты встречаемости микробов-ассоциантов у детей ввозрасте от 7 до 15 лет при среднетяжелой форме ЭБВИ АсБ (таблица 4.14)выявило, что в монокультуре значительно чаще встречали S. рyogenes(27,3%), S. aureus (24,2%) и S. viridians (18,2%), реже – S. pneumoniae (3,0%),S. epidermidis (6,1%) и C.
albicans (6,1%). В микробной ассоциации чащевыделяли S. viridians (15,1%). При тяжелой форме заболевания у детейданной возрастной группы чаще высевали S. рyogenes в монокультуре(66,7%), значительно реже – S. viridians (11,1%) и S. еpidermidis (11,1%). Всочетании с другими микроорганизмами (S. epidermidis, S. aureus, C. albicans)обнаруживалиS. viridians (11,1%).
Сравнение частоты встречаемостиразличных бактерий-ассоциантов ЭБВИ у старших детей в зависимости отформы тяжести заболевания выявило, что S. рyogenes встречали у детей стяжелой формой тяжести (p=0,049).Таблица 4.13. Частота встречаемости микробов-ассоциантов у больных ЭБВИ АсБв возрасте от 3 до 7 лет с учетом формы тяжестиМикробы-ассоциантыСреднетяжелая формаn%Тяжелая формаn%OR[95 % ДИ]3,64[1,18; 11,36]p2227,81058,8Streptococcus pyogenes,Candida albicans, Staphylococcus aureus,Staphyloccus epidermidis, Streptococcus viridans810,1317,61,89[0,39; 7,87]0,40Streptococcus viridans2430,4211,80,31[0,05; 1,34]0,141,37[0,19; 7,68]Streptococcus viridians,Staphyloccus epidermidis, Staphyloccus aureus, Candidaalbicans78,9211,8Staphylococcus aureus78,9--Staphylococcus aureus,Staphyloccus epidermidis, Pseudomonas aeruginosae22,5--Staphyloccus epidermidis45,1--Staphyloccus epidermidis,Candida albicans11,2--Candida albicans45,1--Streptococcus pneumoniae----79100,017100,0Всего0,00[0,00; 2,73]0,00[0,00; 16,39]0,00[0,00; 5,28]0,00[0,00; 88,29]0,00[0,00; 5,28]0,00[0,00; Inf]0,020,660,351,001,001,001,001,00Примечание: p – достоверность различий частоты встречаемости микробов-ассоциантов у больных среднетяжелой и тяжелой формамизаболевания в возрасте от 3 до 7 лет (точный тест Фишера);“inf” – показатель невозможности оценки ДИ111Streptococcus pyogenes112Таблица 4.14.
Частота встречаемости микробов-ассоциантов у больных ЭБВИ АсБв возрасте от 7 до 15 лет с учетом формы тяжестиМикробы-ассоциантыСреднетяжелая формаn%Тяжелая формаn%OR[95 % ДИ]5,09[1,01; 28,29]pStreptococcus pyogenes927,3666,7Streptococcus pyogenes,Candida albicans, Staphylococcus aureus,Staphyloccus epidermidis, Streptococcus viridans----0,00[0,00; Inf]1,00Streptococcus viridans618,2111,10,57[0,02; 5,14]1,00Streptococcus viridians,Staphyloccus epidermidis, Staphyloccus aureus,Candida albicans515,1111,10,71[0,03; 7,60]1,00Staphylococcus aureus824,2--Staphylococcus aureus,Staphyloccus epidermidis, Pseudomonas aeruginosae----Staphyloccus epidermidis26,1111,1Staphyloccus epidermidis,Candida albicans----Candida albicans26,1--Streptococcus pneumoniae13,0--Всего79100,017100,00,171,000,521,001,001,00Примечание: p – достоверность различий частоты встречаемости микробов-ассоциантов у больных среднетяжелой и тяжелой формамизаболевания в возрасте от 7 до 15 лет (точный тест Фишера);“inf” – показатель невозможности оценки ДИ.1120,00[0,00; 1,82]0,00[0,00; Inf]1,90[0,06; 27,14]0,00[0,00; Inf]0,00[0,00; 13,07]0,00[0,00; 69,67]0,049113Обнаружение этого микроба-ассоцианта у данной категории больных имелостатистически значимую связь с развитием тяжелой формы ЭБВИ АсБ (OR =5.09, 95% ДИ: 1.01 – 28.29).4.2.
Характеристика патогенных свойств микробов-ассоциантовДля установления этиологической значимости микроорганизмов вразвитии заболевания необходимо определять показатели их высеваемости ипатогенныйпотенциал.Всвязисэтим,проведеноопределениегемолитической, лецитиназной, плазмокоагулазной, ДНК-азной активностивыделенных штаммов бактерий-ассоциантов ЭБВИ, а также их способностииндуцировать апоптоз макрофагов мышей.Во исполнение данной задачи изучены штаммы микробов-ассоциантов(S. pyogenes, S.
viridans, S. aureus, S. epidermidis, P. aeruginosa, K. pneumoniae,E. coli), выделенные со слизистой ротоглотки больных ЭБВИ в возрасте от 3до 15 лет. Все исследованные штаммы бактерий-ассоциантов ЭБВИ(S. viridans, S. epidermidis, K. pneumoniae, S. pneumoniae, P. aeruginosae) быливыделены в диагностически значимом количестве (более 105 КОЕ/мл). Всеисследованные штаммы S.
pyogenes обладали выраженной гемолитическойактивностью (обширные зоны бета-гемолиза на кровяном агаре). ШтаммыS. viridans формировали незначительные зоны альфа-гемолиза. ШтаммыS. aureusбылиплазмокоагулазо-илецитиназоположительны.Приопределении фермента ДНК-азы оказалось, что высокая степень егоактивности (более 6 мм на среде с ДНК) обнаружена у 80% штаммовS.
аureus.Все исследованные микроорганизмы (табл. 4.15), выделенные от больныхЭБВИ, в разной степени обладали способностью индуцировать процесспрограммированной клеточной гибели макрофагов белых мышей. Количествоклеток с апоптозом колебалось в пределах от 18,7±5,4% до 58,6±6,8% приисследовании микробных взвесей в разведении 1:10; от 11,2±4,3% до11456,0±6,8%вразведении1:100.Сравнительныйанализрезультатовапоптогенной активности микробов-ассоциантов ЭБВИ, выделенных сослизистой оболочки ротоглотки показал, что наиболее высоким патогеннымпотенциалом обладал S.
pyogenes (58,6±6,8%). Это могло быть обусловленоналичием у S. pyogenes токсинов, О- и S-стрептолизинов, поверхностныхбелков-адгезинов,ферментовпатогенности.АпоптогеннаяактивностьS. viridans была ниже (42,5±6,7%), но превышала таковую S. аureus(21,2±5,4%), P. aeruginosae (20,5±5,1%), S. epidermidis (18,7±5,4%). Следуетотметить, что из всех исследованных микробов-ассоциантов дозозависимыйэффект апоптогенной активности был отмечен только у S. viridans.Таблица 4.15.
Апоптогенный эффект микробов-ассоциантов Эпштейна-Баррвирусной инфекции в отношении макрофагов мышей.ВидStreptococcus pyogenesStreptococcus viridansStaphylococcus aureusPseudomonas aeruginosaeStaphylococcus epidermidisКоличество клеток с апоптозом (%±m)Разведение 1:10Разведение 1:10058,6±6,8**56,0±6,9**42,5±6,7*25,4±6,1*,21,2±5,4* **13,6±4,7*, **20,5±5,1*, **11,2±4,3*, **18,7 ±5,4*,**19,3±5,6*, **Примечание: *- достоверность различий между показателями апоптоза, индуцированногоS. pyogenes и аналогичными показателями других микроорганизмов при одинаковыхразведениях; **- достоверность различий между показателями апоптоза, индуцированногоS.
viridans и аналогичными показателями других микроорганизмов при одинаковыхразведениях.По результатам нашего исследования установлено, что бактериальнаямикрофлора способна влиять на процесс программированной клеточнойгибели иммунокомпетентных клеток. Наиболее выраженный апоптогенныйэффект выявлен у S. pyogenes, следующим по значимости в альтерацииперитонеальных макрофагов отмечен S. viridans.Наоснованиипроведенногоисследованиявыявлено,чтомикроорганизмы-ассоцианты ЭБВИ обладали факторами патогенности(гемолитическая, лецитиназная, плазмокоагулазная, ДНК-азная активность), а115также способностью воздействовать на клетки иммунной системы, вызываяапоптоз макрофагов.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
