Диссертация (1139725), страница 27
Текст из файла (страница 27)
Смесь охлаждали, затем с помощью 20 млводы переносили в делительную воронку вместимостью 250 мл и экстрагировали 40 мл эфира диэтилового в течение 2 мин. Эфирные извлечения последовательно фильтровали через бумажный фильтр с 2 г натрия сульфата безводного всухую колбу. Эфирное извлечение упаривали на роторном испарителе под вакуумом температуре 40 °C досуха, остаток растворяли в 15 мл спирта 95 % иколичественно с помощью 5 мл того же спирта переносили в мерную колбувместимостью 25 мл.
Объем раствора доводили тем же спиртом до метки и перемешивали (испытуемый раствор).Раствор СО юглона готовили по методике, описанной в разделе 4.3.2.Качественный анализ проводили методом ТСХ. Наносили 0,02 мл испытуемого раствора и 0,005 мл раствора СО юглона в виде полос шириной около20 мм на линию старта хроматографической пластинки, предварительно выдержанной в сушильном шкафу в течение 1 часа при температуре (100-105) °C,и хроматографировали по методике, описанной в главе 2.
Подвижная фаза: петролейный эфир – диэтиловый эфир (10 : 3,5).На хроматограмме испытуемого растворов обнаруживали зону адсорбциижёлтого цвета с Rf 0,8 (юглон). При выдерживании пластинки над парами аммиака окраска зоны, соответствующей юглону, становилась фиолетовой.Для количественного определения суммы нафтохинонов в пересчёте наюглон измеряли оптическую плотность испытуемого раствора на фотоэлектро-215колориметре КФК-3-01 при длине волны 440 нм в кювете с толщиной поглощающего слоя 10 мм. В качестве раствора сравнения использовали этиловыйспирт 95 %.Параллельно измеряли оптическую плотность стандартного раствора.Содержание суммы нафтохинонов в таблетках в пересчете на юглон (Х)рассчитывали по формуле (7):(7)где Ax – оптическая плотность испытуемого раствора;A0 – оптическая плотность испытуемого раствора;а0 – навеска юглона, г.Результаты анализа представлены в таблице 70.Таблица 70 – Содержание суммы нафтохинонов в пересчёте на юглон в таблетках ореха грецкого листьевХi, мкг/таб.fS2SРT(P,f)∆xε172,1; 174,0; 176,2;172,2; 170,1; 170,45172,55,272,296952,572,411,40Как следует из данных, представленных в таблице, относительная ошибкапредложенной методики не превышает 5 %.7.2.5 Разработка методик анализа БАД «Юглон», БАД «Веноспас» исмеси ЛРС для получения БАД «Веноспас»Для оценки возможности анализа суммы нафтохинонов в сложной смесиЛРС, а также комплексных экстракционных БАД изучали разработкиООО «Витаукт» (Россия, Республика Адыгея, Майкопский район ст.
Абадзехская) совместно с к. фарм. н. Корочинским А.В.:1. БАД «Юглон» представляет собой суммарный фитокомплекс в видежидкого концентрата на основе высококонцентрированного раствораэкстрактивных веществ из листьев и околоплодников ореха черного,полученного в соотношении ЛРС – готовый продукт 1 : 2 [26].2162. БАД «Веноспас», содержащей комплекс БАВ, выделенные из смесиЛРС: каштана конского плоды (30 %), лещины обыкновенной листья(30 %), винограда культурного семена (20 %), софоры японской бутоны (10 %), ореха черного листья (5 %), ореха черного плоды (5 %) [28].3. Смесь ЛРС для получения БАД «Веноспас»: каштана конского плоды(30 %), лещины обыкновенной листья (30 %), винограда культурногосемена (20 %), софоры японской бутоны (10 %), ореха черного листья(5 %), ореха черного плоды (5 %)Пробоподготовка для анализа БАД «Юглон» и «Веноспас»: около 5,0 г(точная навеска) субстанции помещают в коническую колбу вместимостью250 мл, прибавляют 100 мл воды, 10 мл раствора железа (III) хлорида, 40 мл кислоты хлористоводородной 8,3 %, перемешивают, присоединяют обратный холодильник и нагревают на водяной бане при температуре 60 °C в течение 1 часа.
Смесь охлаждали, затем количественно с помощью 20 мл воды переносили вделительную воронку вместимостью 250 мл и экстрагировали эфиром диэтиловым 5 раз порциями по 40 мл, каждый раз взбалтывая в течение 2 мин. Эфирные извлечения последовательно фильтровали через бумажный фильтр с 2 г натрия сульфата безводного с сухую термостойкую круглодонную колбу.
Эфирное извлечение упаривали при температуре 40 °C досуха, остаток растворяли в15 мл спирта 95 % и количественно с помощью 5 мл того же спирта переносилив мерную колбу вместимостью 25 мл. Объем раствора доводили тем же спиртом до метки и перемешивали (испытуемый раствор).Пробоподготовка для анализа смеси ЛРС для получения БАД «Веноспас»: около 2,0 г (точная навеска) смеси ЛРС, измельченного до размера частиц, проходящих сквозь сито с размером отверстий 2 мм, помещали в коническую колбу, прибавляли 100 мл спирта 20 % и перемешивали на магнитноймешалке в течение 1 ч.
Затем смесь выдерживали в течение 15 мин и фильтровали через бумажный фильтр «красная лента», декантируя извлечение с ЛРС.Операцию повторяли еще 2 раза в тех же условиях. Фильтрат упаривали на роторном испарителе под вакуумом при температуре 85-90 °C до достижения217объема около 50 мл. Остаток количественно с помощью 20 мл воды переносилив коническую колбу со шлифом вместимостью 250 мл, прибавляли 10 мл раствора железа (III) хлорида, 40 мл кислоты хлористоводородной разведенной8,3 %, присоединяли обратный холодильник и нагревали на водяной бане притемпературе 60 °C в течение 1 часа.
Смесь охлаждали, затем количественно спомощью 20 мл воды переносили в делительную воронку вместимостью 250 мли экстрагировали эфиром диэтиловым 5 раз порциями по 40 мл, каждый развзбалтывая в течение 2 мин. Эфирные извлечения последовательно фильтровали через бумажный фильтр с 2 г натрия сульфата безводного с сухую термостойкую круглодонную колбу.
Эфирное извлечение упаривали при температуре40 °C досуха, остаток растворяли в 15 мл спирта 95 % и количественно с помощью 5 мл того же спирта переносили в мерную колбу вместимостью 25 мл.Объем раствора доводили тем же спиртом до метки и перемешивали (испытуемый раствор).Качественный анализ проводили методом ТСХ.Наносили 0,02 мл испытуемого раствора и 0,005 мл раствора СО юглона ввиде полос шириной около 20 мм на линию старта хроматографической пластинки, предварительно выдержанной в сушильном шкафу в течение 1 часа притемпературе (100-105) °C, и хроматографировали по методике, описанной вглаве 2. Подвижная фаза: петролейный эфир – диэтиловый эфир (10 : 3,5).
Нахроматограммах испытуемых растворов обнаруживали зоны адсорбции жёлтого цвета с Rf 0,8 (юглон). При выдерживании пластинки над парами аммиакаокраска зон, соответствующих юглону, становилась фиолетовой. Результатыанализа представлены в таблице 71.Таблица 71 – Результаты идентификации юглона ТСХОбразцы ЛРСRf в смесях растворителей123БАД «Юглон»0,80,80,4БАД «Веноспас»0,80,80,4Смесь ЛРС для БАД «Веноспас»0,80,80,4СО юглона0,80,80,4218Таким образом, во всех исследуемых образцах идентифицирован юглон.Для количественного определения суммы нафтохинонов в пересчёте наюглон измеряли оптическую плотность испытуемых растворов на фотоэлектроколориметре КФК-3-01 при длине волны 440 нм в кювете с толщиной поглощающего слоя 10 мм.
В качестве раствора сравнения использовали спирт этиловый 95 %.Если оптическая плотность превышала 0,8, испытуемый раствор разводили спиртом этиловым 95 % и вычисляли коэффициент разведения (К).Параллельно измеряли оптическую плотность стандартного раствора.Содержание суммы нафтохинонов в ЛРП в пересчете на юглон (Х) в процентах рассчитывали по формуле (8):(8)где A – оптическая плотность испытуемого раствора;A0 – оптическая плотность стандартного раствора Б;a – навеска ЛРС, г;a0 – навеска юглона, г;К – коэффициент разведения испытуемого раствора;W – влажность ЛРС, %.Результаты анализа представлены в таблице 72.Таблица 72 – Содержание суммы нафтохинонов в БАД «Юглон», БАД «Веноспас» и смеси ЛРС для получения БАД «Веноспас»БАДХi, %0,19; 0,18; 0,20;БАД «Юглон»0,19; 0,20; 0,190,0206; 0,0201;БАД0,0207; 0,0214;«Веноспас»0,0209; 0,0198Смесь ЛРС0,041; 0,043;для получения0,043; 0,045;БАД0,040; 0,041«Веноспас»fxs210-7sРT(P,f)50,1994,250,0031952,570,0079 4,1250,0210,530,0002952,570,0006 2,9150,0424,90,0007952,570,002∆xε4,57Как следует из данных, представленных в таблице, относительная ошибкапредложенной методики не превышает 5 %.2197.3 Усовершенствование методики анализа лекарственногорастительного препарата «Аллохол, таблетки, покрытые оболочкой»Листья Urtica dioica – единственное ЛРС, включённое в ГФ XIII, в испытаниях качества которого предусмотрен хроматографический анализ филлохинона, однако методика количественного анализа не приводится.
Описаны методики анализа филлохинона методами хроматоспектрофотометрии, ВЭЖХ [47,94, 107]. Мы предприняли попытку разработать методику определения филлохинона в листьях Urtica dioica, подходящую для рутинного анализа.7.3.1 Анализ фракций, полученных из листьев Urtica dioicaДля подбора условий пробоподготовки из листьев Urtica dioica последовательно выделяли фракции по схеме, описанной в главе 2 (рисунок 14). Послеудаления растворителя каждую фракцию взвешивали и определяли её процентное отношение к навеске ЛРС (рисунок 83).Рисунок 83 – Фракции листьев Urtica dioica (% от массы ЛРС)Для идентификации основных групп БАВ получали раствор каждойфракции по следующей методике: около 0,1 г фракции помещали в мернуюколбу вместимостью 25 мл, добавляли соответствующий растворитель, растворяли при перемешивании, доводили до метки и перемешивали.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
