Диссертация (1139719), страница 65
Текст из файла (страница 65)
185)L1,71,51,32,11,348,0342В подобранных выше условиях получены хроматограммы масел – экстрагентов (рис. 186). Данныерасчета величины Rf представлены в таблице 227. Установлено, что при производстве исследуемых МЭбыло использовано рафинированное подсолнечное масло.Рис. 186. Хроматографический профиль масел-экстрагентов, наиболее часто используемых припроизводстве МЭ (1 – МЭ листьев крапивы двудомной; 2 –подсолнечное масло рафинированное; 3 –соевое масло рафинированное; 4 –оливковое масло рафинированное; 5 - подсолнечноемасло нерафинированное)Однако, ни в одном из рафинированных масел зон со значениями Rf =0,44±0,02 и 0,51±0,01(таблица 227) не обнаружено. В соевом и оливковом рафинированных маслах обнаруживаютсялишь их слабые следы, что, вероятно, связано с разрушением в процессе рафинации некоторыхБАВ липофильной природы, которые появляются вновь в МЭ, по-видимому, из исходного ЛРС,использованного при его производстве.Таблица 227Хроматографический профиль масел-экстрагентов, используемых при производстве МЭ вэлюирующей системе № 4 [360,365]№Масла-экстрагентыВеличина Rf±0,02п/п1Подсолнечное масло нерафинированное0,14; 0,24; 0,36; 0,42; 0,52; 0,982Подсолнечное масло рафинированное0,1; 0,16; 0,22; 0,27; 0,983Соевое масло рафинированное0,12; 0,22; 0,35; 0,984Оливковое масло рафинированное0,1; 0,22; 0,33; 0,98Разработанная методика идентификации МЭ методом ТСХ была сравнена с методикой,предлагаемой ЕФ 6.0 [400-403].
Основные характеристики методик представлены в таблице228.На основании данных таблицы 228 можно сделать вывод о том, что разработанная методика имеет некоторые преимущества по сравнению с методикой, рекомендованной ЕФ 6.0. Во-343первых, предлагаемая методика позволяет проводить определение при минимальном наборепростых и доступных реактивов и материалов, что делает ее приемлемой для любой лаборатории.Таблица 228Сравнительная характеристика разработанной методики идентификации МЭ методом ТСХ сметодикой, рекомендованной ЕФ 6.0№РазработаннаяПоказательМетодика ЕФ 6.0 [400-403]п/пметодика [360,365,366]1Время анализа30-40 мин60-70 минРаствор масла в хлороформе Раствор масла в метиленхло2Пробоподготовка0,1 г/млриде 0,007 г/млСиликагелевые пластинки Пластинки с модифицированТип пластин для3марки «Sorbfil» 10×15 см сным С18 силикагелем дляТСХполимерной подложкойВЭТСХ 10×10 смДиэтиловый эфир;4Подвижная фазаГексан-этанол (10:0,25) Метиленхлорид-уксусная кислота-ацетон (20:40:50)5Высота пробега12-13 см0,5 см; 8 см6Проявитель10 % спиртовый раствор ФМКВо-вторых, методика является более экспрессной, так как при ее использовании времяанализа сокращается приблизительно в два раза.
Кроме того, немаловажным фактом являетсято, что использованные в работе растворители (хлороформ, гексан и этанол) относятся ко II иIII классам токсичности соответственно в отличие от метиленхлорида, предлагаемого ЕФ [400403], который принадлежит к особо опасному I классу токсичности. В-третьих, принципиальноеотличие предложенной методики заключается в использовании более дешевых пластин, покрытых силикагелем (нормально-фазовый вариант ТСХ).В ЕФ в данном случае применяется обращено-фазовая ТСХ на октадецилсилане (болеедорогие пластинки). Необходимо подчеркнуть, что разработанная методика подразумевает использование оборудования отечественного производителя. Таким образом, разработанная методика идентификации МЭ с применением хроматографии в тонком слое сорбента по индивидуальному виду хроматографического профиля является экспрессной и доступной.
Данный подход к стандартизации и оценке качества МЭ может быть использован при разработке НД наМЭ.7.2.5. Изучение БАВ масляных экстрактов методом ИК – спектроскопииИК–спектроскопия давно и успешно используется для изучения химической структурывеществ и их стабильности при хранении. Колебательные спектры БАВ служат богатым источником информации о строении молекул органических соединений [28,29,127,150,162,208,344246,343]. Сложность изучаемой проблемы обусловлена тем, что РМ и, особенноМЭ, содержатцелый комплекс различных групп БАВ.
В таких сложных открытых биологических системах,как МЭ из растений, безусловно, БАВ образуют ассоциаты, конгломераты или др. образованияв результате их взаимодействия между собой. В научной литературе практически отсутствуетинформация о характере связей между компонентами МЭ, что обусловливает актуальность изучаемого вопроса. Водородная связь принадлежит к одному из видов таких «ассоциативных взаимодействий». Важным диагностическим критерием, подтверждающим образование даннойсвязи, является появление значительных смещений максимумов поглощения в ИК-спектрахизучаемых объектов [365,368, 369].
Интенсивность сдвига характеристических пиков определяется видом и степенью ассоциации БАВ (димеры, кольца, пространственные сетки, полиассоциаты и т.д.) в образце.Для изучения взаимодействий БАВ в МЭ, нами был использован метод ИКС. Анализпроводили на ИК – спектрометре с Фурье-преобразованием «Vertex 70» с приставкой полногоотражения и последующей обработкой программой OMNIC или GRAMS 4/32 (глава 2, п.2.12.7).7.2.5.1. Изучение характеристических полос поглощения α-токоферола в ИК-областиПробоподготовку и регистрацию ИК-спектра α-токоферола проводили по методике, описанной в главе 2 (п. 2.12.7).
Вид полученного спектра представлен в Приложении 3 (рис. 4). Отнесение характеристических частот поглощения в ИК-спектре стандартного образца αтокоферола представлено в таблице 229.Таблица 229Характеристика данных ИК-спектра стандартного образца α-токоферола[127,150,162,208,246,343]Тип колебаний и структурный фрагмент1Диапазон частот колебаний2Свободная –ОН группаКолебания свободной О-Н группы,3750-3700валентные3Интенсивность4--ν, см-1 на спектреФенольный гидроксил в межмолекулярных водородных связяхКолебания О-Н в межмолекуляр3650-3450 (димеры);3634ных водородных связях, валентные 3400-3200 (полиассоциа3482ты)Группы С-СН3 и С-СН2Колебания связей С-С, валентные2960-28502949; 28912735Сил.Сил.или3451Деформационные колебаниягрупп, ассиметрическиеДеформационные колебаниягрупп, симметрическиеКолебания связи С=С ароматического ядра, валентныеСимметрические и ассиметрическиеколебания валентных связей С-О-231460-145014641380-13001379; 13421314Группа -НС=СНгруппа полос2000-1600Группа С-ОН4Оч.
сил.1682Сл.1280-1010126312151011Сил.Фрагмент токола1162Структура пирана1169Сил.1090; 816Оч. сил.926; 866739; 692648; 613Сил. илиср.1097; 813=СН группаКолебания ароматических СН-групп,деформационные900-700На ИК-спектрограмме α-токоферола полосы поглощения в диапазоне частот 900-700 см-1обусловлены деформационными колебаниями ароматических СН-групп. В области частот 13801300 см-1 расположены симметрические деформационные колебания групп С – СН3 и С – СН2.Интенсивность светопоглощения при 1379 см-1 зависит от полноты метилирования бензольногокольца в молекуле токоферола.В диапазоне частот около 1460-1450 см-1 полоса поглощения обусловлена ассиметрическими деформационными колебаниями групп С – СН3 и С – СН2. Полосы поглощения в области частот 1280-1010 см-1 связаны с симметрическими и ассиметрическими колебаниями валентных связей С-О-С-группы [127,150,162,208,246,343].Максимум поглощения при 1169 см-1 характерен для деформационных колебаний свободной ОН-группы фенола.
Валентные колебания свободного фенольного гидроксила находятся, по литературным данным [127,150,162, 208,246,343], в диапазоне частот 3750-3700 см-1. Посведению многих авторов [127,150,162,208,246,343], полосы поглощения, сдвинутые в интервал3650-3200 см-1, характеризуют наличие ОН-группы в межмолекулярных водородных связях.Такие смещения обусловлены тем, что при образовании водородной связи силовая постояннаясвязи О – Н уменьшается, а полоса может сдвигаться до 3500-2500 см-1 [28,29].
Чем прочнеевозникающее взаимодействие, тем ниже частота колебаний [28,29]. Максимумы поглощения наИК-спектре α-токоферола при 3634 и 3482 см-1 (рис. 4, Приложение 3) соответствуют валент-346ным колебаниям фенольного гидроксила в межмолекулярных водородных связях. Результатырасчета термодинамических характеристик [377] выявленных связей, таких как энергия (Е Н,ккал/моль) и длина (R, Ǻ), представлены в таблице 230.Таблица 230Результаты расчета термодинамических характеристик межмолекулярных водородных связейпо данным ИКС в структуре α-токоферола [28,29,369]Смещение частотыЭнергия связи№Частота,Длинапоглощения,п/псм-1связи,Ǻ-1кДж/мольккал/мольсм13634664,671,122,8252348221815,423,682,79Выявленные межмолекулярные водородные связи, согласно данным авторов [28,29], относятся к типу слабых связей, так как энергия их не превышает 5 ккал/моль, а длина более 2,7Ǻ.
В случае фенолов, данные связи могут способствовать образованию цепей, димеров, колецили пространственных сеток [28,29].По данным ИКС, в структуре α-токоферола образуются димеры с характерными частотами поглощения при 3650-3450 см-1, тогда как формирование полиассоциатов с участием фенольных гидроксилов α-токоферола привело бы к появлению широкой полосы в диапазоне3400-3200 см-1 [365, 368,369].Предполагаемая модель образования димеров α-токоферола в субстанции за счет межмолекулярной водородной связи представлена на рис. 187.Рис. 187. Модель взаимодействия двух молекул α-токоферола при образовании межмолекулярной водородной связиМаксимумы в интервале 1340-1320 см-1 обусловлены симметрическими деформационными колебаниями групп С – СН3 и С – СН2.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
