Диссертация (1139719), страница 67
Текст из файла (страница 67)
Разработаны методики определения β-каротина и токоферолов методом ТСХ, как одних изнаиболее фармакологически активных веществ БАВ, присутствующих в маслах, которые могутбыть использованы для других аналогичных объектов.3. Проведена оценка качества липидного комплекса МЭ, которая должна складываться из показателей, характеризующих накопление не только продуктов первичного окисления жиров (ПЧ и ИО А232 / А210), но более глубокого окисления липидов (АЧ, ТБЧ и ИО А232 / А270). Жирные масла-экстрагенты, используемые впроизводстве МЭ также должны проходить оценку качества липидного комплекса.4.
Определена АОА МЭ, обусловленная индивидуальным качественным и количественным составом БАВ исследуемых объектов. Наибольшая АОА отмечена для МЭ листьев крапивы двудомной при использовании в качестве экстрагента 95% этанола, а также для облепихового масла при использовании в качестве экстрагента 70% этанола.5. Подлинность, доброкачественность и безопасность прменения масел-экстрагентов и полученных МЭ целесообразно устанавливать по жирнокислотному и триглицеридному составам снормированием содержания транс-изомеров ЖК. Разработана методика идентификации МЭ спомощью ТСХ по количеству хроматографических зон с определенными значениями величинподвижности («отпечатки пальцев»).
Методом ГЖХ изучен ЖК-состав исследуемых МЭ и выявлено присутствие транс-жиров.6. Выявленные методом ИКС специфические полосы поглощения, обусловленные присутствием БАВ, а также перекисных соединений и транс-жиров, можно использовать в качестве идентификационных критериев при оценке их подлинности и доброкачественности.7. Представленный анализ забракованной продукции, в целом, показал востребованность изучаемой продукциии необходимость совершенствования подходов к оценке качества РМ и МЭ. Наименьшее количество забракованных позиций было выявлено по показателям физического и полного химического контроля: «Средняя масса», «Подлинность», «Чистота» и «Количественное содержание БАВ».
Этосвязано, в первую очередь, с недостатком доступных и достоверных методик определения БАВв РМ и МЭ на их основе, а также с отсутствием в период наблюдений современной НД. Однако,именно БАВ, обуславливают фармакотерапевтическую эффективность и безопасность МЭ.3538. Проведены испытания стабильности МЭ при хранении в режиме реального времени. Послевскрытия упаковки при хранении в условиях, указанных производителем на упаковке, содержание БАВ постепенно снижается. Такие нормируемые показатели, как ПЧ и другие показателиокисленности, претерпевают значительные изменения к 9 месяцам наблюдений. Таким образом,срок хранения МЭ должен определяться только на основании результатов исследования стабильности БАВ и липидного комплекса.
Для изучаемых образцов он не должен превышать 6месяцев.9. По результатам проведенных исследований подготовлен проект ФС «Облепиховое масло» ипредложены дополнения в ОФС ГФ XIII «Экстракты» в части оценки качества МЭ (Приложение 1).Таким образом, в результате комплекса исследований теоретически обоснованы и экспериментально подтверждены основные принципы методологических подходов к стандартизациии оценке качества ЛРС и полученных на его основе МЭ на двух моделях (жирномасличное ЛРС– МЭ и нежирномасличное ЛРС – МЭ), позволяющие использовать их для других аналогичныхобъектов (например, плоды шиповника – масло шиповника; плоды рябины обыкновенной – МЭ;трава зверобоя, череды, тысячелистника и др. – МЭ):-Проведение сквозной стандартизации в цепочке от исходного ЛРС до полученных на егооснове ЛРП;-ЛРС, используемое для производства как ЛРП, содержащих комплекс водорастворимыхБАВ (настои, отвары, экстракты), так и ЛРП, содержащих БАВ липофильной природы (МЭ),целесообразно стандартизировать по отдельным представителям каждой из групп (схема 3);- Использование свежего и замороженного сырья более перспективно для получения лекарственных форм, содержащих гидрофильный комплекс БАВ плодов.
Для изготовления МЭ возможно использовать сырье как в свежем и замороженном, так и в высушенном виде;-Выбор метода для стандартизации ЛРС и ЛРП должен осуществляться с учетом взаимноговлияния и комплексного характера различных групп БАВ в растительных объектах;-Разработка нормативов на ЛРС и МЭ в зависимости от состава БАВ должна включать нетолько общепринятые критерии качества, но и показатели безопасности применения;-Научное и экспериментальное обоснование возможных способов консервации и сроковхранения ЛРС и ЛРП.354Схема 3.
Методологический подход к стандартизации и оценке качества ЛРС и МЭ на его основе355ОБЩИЕ ВЫВОДЫ1. В результате комплекса исследований теоретически обоснован и экспериментально подтвержден методологический подход к стандартизации и оценке качества ЛРС и МЭ на его основе,базирующийся на принципе сквозной стандартизации.2. Выявлено влияние полярности элюента на хроматографическую подвижность основных действующих липофильных и гидрофильных БАВ растительных объектов (α-токоферола, βкаротина, эргокальциферола, полифенольных соединений, аминокислот, органических кислот,простых сахаров) и закономерности их поведения в тонком слое сорбента.
Представлены уравнения, описывающие процесс элюирования БАВ, что позволяет прогнозировать их разделениеметодом ТСХ.3. Впервые разработаны оригинальные, защищенные патентами РФ, унифицированные экспресс-методики количественной оценки содержания БАВ методом ВЭТСХ. Данные методикиапробированы на исследуемых образцах ЛРС и МЭ на его основе и могут быть использованыдля стандартизации других объектов с аналогичным составом БАВ.4. Разработаны и валидированы методики количественного определения основных групп БАВ,защищенные патентами РФ (каротиноидов, флавоноидов, дубильных веществ, токоферолов,аминокислот, хлорофиллов, органических кислот, антоцианов, углеводов, сахаров, некоторыхмакроэлементов и витаминов), в листьях крапивы двудомной, в плодах облепихи крушиновидной различных способов консервации.5.
Методами ВЭЖХ-ДМД-МС, капиллярного электрофореза, ВЭТСХ, УФ-СФМ изучен качественный и количественный состав БАВ исследуемого ЛРС. Определены показатели качестваЛРС, используемого для производства МЭ.6. Методами ТСХ, ГЖХ, ИКС, УФ-СФМ изучен качественный и количественный состав БАВМЭ (каротиноидов, токоферолов, хлорофиллов, ПНЖК, флавоноидов и др.). Расширен переченьпоказателей качества МЭ и разработаны методики для сквозной стандартизации ЛРС и МЭ посодержанию основных БАВ, определяющих свойства МЭ.7. Разработаны экспресс-методики подтверждения подлинности и оценки качества изучаемогоЛРС, МЭ по хроматографическому профилю БАВ (метод «отпечатков пальцев») с применениемТСХ.3568. Изучена стабильность БАВ в плодах облепихи крушиновидной различных способов консервации и МЭ по основным нормируемым показателям при хранении в режиме реального времени.
Обоснованы оптимальные сроки и условия их хранения.9. На основании проведенных исследований по определению безопасности применения ЛРС иМЭ на двух моделях (жирномасличное и нежирномасличное ЛРС), предложены дополнительныекритерии для оценки качества ЛРС, масел-экстрагентов и МЭ на их основе.10. На основании полученных результатов разработаны: проекты ФС «Облепихи крушиновидной плоды», «Облепихи крушиновидной свежие плоды» и «Облепиховое масло», а также дополнения и изменения к ОФС «Тяжелые металлы» ГФ РФ XIII изд. (приняты к рассмотрениюФГБУ «НЦЭСМП»).
Внесены дополнения в ОФС ГФ РФ XIII изд. «Экстракты», касающиесяпоказателей оценки качества МЭ, которые будут включены в ОФС.1.4.1.0021.15 «Экстракты».Практические рекомендации. В результате проведенных исследований установлено, чтовысушенные цельные и измельченные плоды облепихи крушиновидноймогут быть рекомендованы к промышленному выпуску в качестве поливитаминного средства для получения отваровв домашних условиях. Срок хранения замороженных плодов облепихи крушиновиднойможетбыть продлен до 9 месяцев.
Рекомендуемый срок хранения МЭ не должен превышать 6 месяцевс момента вскрытия упаковки при соблюдении условий хранения, указанных производителемна упаковке. Перечень показателей, отражающий содержание экотоксикантов в ЛРС, используемом для получения МЭ, кроме общих критериев должен содержать специфические нормативы.Перспективы дальнейшей разработки темы. Разработанные подходы к оценке качестваисходного ЛРС могут послужить основой для дальнейшей разработки новых ЛРП на основефитокомпозиций и их последующей стандартизации с оценкой качества на основе предложенного методологического подхода.357Список использованных сокращенийАК – аминокислота;ЖАК – железо-аммонийные квасцы;АО – антиоксиданты;ЖК – жирная кислота;АОА – антиоксидантная активность;ЖРВ – жирорастворимые витамины;ААС – атомно-абсорбционная спектроско-ИФА – иммуноферментный анализ;пия;ИО – индекс окисленности;АсК – аскорбиновая кислота;КМАиФАМ - количество мезофильныхАЦ – антоциановые соединения;аэробных и факультативно-анаэробныхАЧ – анизидиновое число;микроорганизмов;БАВ – биологически активные вещества;КОЕ/г – колонии образующие единицыБАД – биологически активная добавка;на 1 грамм;БГКП – бактерии группы кишечной па-КЭ – капиллярный электрофорез;лочки;КЧ – кислотное число;ВФС – временная фармакопейная статья;ЛРС – лекарственное растительное сырье;ВЭЖХ – высокоэффективна жидкостнаяЛП – лекарственный препарат;хроматография;ЛР – лекарственное растение;ВЭЖХ-ДМД-МС-ВЭЖХсдиодно-ЛРП – лекарственный растительный препа-матричным и масс-селективным детектора-рат;ми;ЛС – лекарственные средства;ВЭТСХ – высокоэффективная тонкослойнаяЛФ – лекарственная форма;хроматография;МО – микроорганизмы;ГЖХ – газожидкостная хроматогрфия;МТ – микотоксины;ГОСТ – государственный стандарт;МЭ – масляный экстракт;ГКК – гидроксикоричные кислоты;НД – нормативная документация;ГСО – государственный стандартный обра-ОК – органические кислоты;зец;ОП – остаточные пестициды;ГФ – государственная фармакопея;ОФС – общая фармакопейная статья;ГХ/МС – газовая хроматография с масс-ПДК – предельно допустимая концентра-детектором;ция;ГХЦГ – гексахлорциклогексан;ПНЖК – полиненасыщенная жирная кисло-ДВ – дубильные вещества;та;ДДТ – дихлордифенилтрихлорметилметан;ПОЛ – перекисное окисление липидов;ЕФ – Европейская фармакопея;ПП – показатель преломления;358Пл – плотность;ФМК – фосфорномолибденовая кислота;РМ – растительное масло;ФП – фитопрепарат;РН – радионуклиды;ФС – фармакопейная статья;РЧ - родановое число;ФСП – фармакопейная статья предприятия;РСО – рабочий стандартный образец;ЦЧ – цветовое число;СФМ – спектрофотометрия;ЧГ - число Генера;ТБЧ – тиобарбитуровое число;ЧО – число омыления;ТЗ – температура затвердевания;ЧП - число Поленске;ТМ – тяжелые металлы;ЧРМ - число Рейхерта-Мейселя;ТСХ – тонкослойная хроматография;ЭВ – экстрактивные вещества;ТУ – технические условия;ЭЧ – эфирное число.ФЛ – фосфолипиды;359Список литературы:1.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
