Диссертация (1139719), страница 64
Текст из файла (страница 64)
Результаты приведены в таблице 223.337Таблица 223Данные ЖК-состава исследуемых МЭ [336]№п/п12345678912341234512Идентифицированная ЖКОблепиховоемаслоНасыщенные ЖК, %Кислота миристиноваяС 14:01,20Кислота пальмитиноваяС 16:036,20Кислота стеариноваяС 18:01,30Кислота маслянаяС 4:0Кислота каприловаяС 8:0Кислота пентадециловаяС15:0Кислота маргариноваяС 17:0Кислота арахиноваяС 20:0Кислота бегеноваяС 22:0Всего38,70Мононенасыщенные ЖК, %Кислота пальмитолеиновая С 16:1 (ω-9)31,0Кислота олеиноваяС18:1n9с (ω9,306)Кислота цис-10С 17:1гептадециловаяКислота гондоиноваяС 20:1(ω-9)Всего40,30ПНЖК, %Кислота линолеваяС18:2n6с15,00(ω-6)Кислота линоленоваяС18:36,00(ω-3)Кислота γ-линолеваяС18:3n6Кислота цис-8,11,14С20:3n6сэйкозатриеноваяКислота тимнодоноваяС20:5n3с5,8,11,14,17(ω-3)Всего21,00Транс-ЖК, %Кислота элаидиноваяС18:1n9tКислота линолэлаидиновая C18:2n6tВсего-МЭ листьев крапивыдвудомной0,075,993,900,170,010,010,040,150,6410,980,0822,740,090,1023,0163,720,081,410,060,1565,420,030,560,59Данные таблицы 223 демонстрируют, что состав ЖК облепихового масла представлен восновном пальмитиновой и пальмитолеиновой кислотами, что согласуется с данными научнойлитературы о присутствии значительного количества трипальмитолеина в глицеридном составемасла [260-262].
Набор ЖК полностью идентичен составу, указанному в НД на облепиховоемасло и препараты на его основе [352,354].338Соотношение ПНЖК ω-6 к ω-3 в изучаемом МЭ плодов облепихи составляет 4:1, чтосвидетельствует о целесообразности применения облепихового масла не только в качестверанозаживляющего и гастропротекторного средства, но и для коррекции нарушений липидногообмена. Соотношение ПНЖК ω-6 к ω-3 в МЭ листьев крапивы двудомной составляет 376:1.Кроме того, в данном МЭ выявлены в составе транс-изомеры ЖК, известные своими канцерогенными, кардиотоксическими и атерогенными свойствами. Транс-изомеры ЖК могут содержаться в МЭ фармацевтического назначения, подвергшихся технологической обработке (нагревание для улучшения процесса экстракции) [376], а также попадать в готовый продукт при использовании некачественных дешевых масел-экстрагентов.
Поэтому, назрела необходимостьнормирования МЭ, используемых в фармации в качестве вспомогательных веществ для получения различных ЛФ, на предмет отсутствия транс-жиров по аналогии пищевыми маслами[336].7.2.3.6. Определение антиоксидантной активности масляных экстрактовИсследования, посвященные определению АОА многих видов ЛРС и водных извлеченийдостаточно широко представлены в научной литературе последних лет [6], однако, АОА МЭ наих основе изучена недостаточно. Ранее АОА масла из зародышей пшеницы оценивали на модели Fe2+-индуцированного перекисного окисления липидов мембран липосом методом хемилюминесцентного анализа [6], что длительно, трудоемко, требует специального оборудования,больших затрат реактивов и материалов. Известно, что масляные извлечения из ЛРС содержатцелый комплекс БАВ, обладающих АОА (токоферолы, каротиноиды, ФЛ, флавоноиды и др.).Учитывая комплексность фармакологического эффекта МЭ, целесообразно было оценить АОАспиртовых извлечений из изучаемых объектов.В виду того, что степень извлечения различных АО, а значит и величина АОА МЭ зависит от концентрации использованных водно-спиртовых экстрагентов [170], целесообразно былоопределить АОА извлечений на основе 70% и 95% этанола.
АОА определяли титриметрическипо методике, разработанной Максимовой Т.В. с соавторами [196] (Глава 2, п. 2.3). Титрантомявлялись спиртовые извлечения (1:20) из исследуемых МЭ, полученные методом мацерации.Для этого навеску масла заливали требуемым объемом экстрагента, смесь энергично встряхивали в течение пяти минут, добиваясь тонкого эмульгирования масла в этаноле, а затем оставляли на сутки в защищенном от света месте в плотно укупоренном виде. Спиртовый экстрактотделяли от масла с помощью делительной воронки.
При комнатной температуре растворимость масла в этаноле пренебрежимо мала. Это позволяет экстрагировать БАВ этанолом непо-339средственно из масла, без предварительного разделения его на фракции омыляемых и неомыляемых липидов [170].В качестве растворов сравнения использовали такие известные АО, как рутин и кверцетин. Расчет показателя АОА (мг/г), которому соответствует концентрация БАВ восстанавливающего характера в пересчете на кверцетин и рутин, проводили по формуле [196]. Результатыпредставлены в таблице 224.№п/п12МЭТаблица 224АОА (мг/г) исследуемых МЭ (n=4; Р=95 %) [170]АОА извлечения на основе 70%АОА извлечения на основеэтанола95% этанолав пересчете на в пересчете на в пересчете на в пересчете накверцетинрутинкверцетинрутинОблепиховоемаслоМЭ листьев крапивы65,95±3,30139,20±6,9631,55±1,5666,59±3,3062,43±3,12131,78±6,59111,33±5,57235,00±11,75Из данных таблицы 224 следует, что МЭ листьев крапивы двудомной при использовании95% этанола в качестве экстрагента обладают более выраженной АОА.
Можно предположить,что это обусловлено АО фенольной природы (токоферолы, флавоноиды, каротиноиды), которые содержатся, как в ЛРС, используемом при получении этого МЭ, так и в маслахэкстрагентах [376]. Степень экстракции токоферолов, по литературным данным, достигает максимального значения при использовании концентрированного этанола. Тогда как каротиноиды,а именно фракция каротинов, которыми богато облепиховое масло, слабо извлекаются 95%этанолом [365].При получении извлечений на основе 70% спирта этилового, наибольшее значение АОАбыло установлено для облепихового масла (таблица 224). Можно предположить, что в данномслучае, антиоксидантный эффект связан с присутствием каротинов (α-, β-каротины, ликопин),ксантофиллов (зеаксантин, лютеолин) и флавоноидов (рутин, нарциссин, изокверцитрин), которые легко извлекаются данным экстрагентом [170].7.2.4. Идентификация масляных экстрактов методом ТСХОпределение подлинности жирных масел длительное время проводят по ЖК-составу методомГЖХ [245,333,365].
В последнее время, для изучения качественного и количественного состава триглицеридов все чаще применяется метод ВЭЖХ [260-262]. В ЕФ [400-403] изложен простой, доступный и экспрессный способ идентификации РМ методом ТСХ, позволяющий однозначно установить340вид масла. При обзоре отечественной литературы, подобных работ не обнаружено. В связи с чем были проведены исследования по разработке ТСХ-методики идентификации МЭ.Подготовку образцов МЭ для хроматографирования осуществляли, как описано в Главе 2(п.
2.12.8). Первоначально осуществляли подбор подходящего детектирующего реагента. Прииспользовании в качестве проявителя 10% спиртового раствора ФМК, получались яркие и четкие зоны [288,360,365, 366]. Этот же проявитель предложен в методике ЕФ [400-403].В таблице 225 представлены элюенты, использованные в работе для разделения[360,365,366]. Показано, что на разделение зон на хроматограммах оказывает влияние, как величина полярности элюента, так и качественный и количественный состав подвижной фазы, ввиду того, что в системах с одинаковыми значениями полярности (№ 3 и № 8) получаются разные хроматографические картины.В системах № 1, 6-8 не происходит разделение хроматографических зон масел, а наблюдается только одно пятно, вытянутое по оси ординат.
Установлено, что наилучшее разделение икачество зон наблюдается в элюирующей системе № 4 со значением полярности 0,13 ед. (таблица 225).Хроматографирование проводили, как описано в Главе 2 (п. 2.12.8). Исследование методом ТСХ растворов изучаемых МЭ в хлороформе было установлено, что хроматографическийпрофиль различных масел отличается друг от друга. Полученные хроматограммы МЭ представлены на рис. 185.Таблица 225Характеристика изученных элюирующих систем [288,360,365]№Подвижная фазаСоставРп/п1Г02Г - Эт10:0,10,053Г - Эт10:0,20,14Г - Эт10:0,250,135Г - Эт10:0,30,156Г-Х10:0,20,087Г-А10:0,20,118Г - Бн29:10,1Г – гексан; Эт – этанол; А – ацетон; Бн – бензол; Х – хлороформ.Рис. 185 показывает, что на хроматограммах МЭ обнаруживается семь хроматографических зон, со значениями величин Rf = 0,1±0,005; 0,16±0,003; 0,22±0,02; 0,27±0,03; 0,44±0,02;0,51±0,01; 0,98±0,01.
При исследовании облепихового масла идентифицировалось семь зон свеличинами Rf=0,08± 0,006; 0,16±0,02; 0,21±0,02; 0,25±0,02; 0,37±0,02; 0,42±0,01; 0,98±0,01, которые являются характерными в данной подвижной фазе для данного МЭ [360, 365].34112Рис. 185. Хроматографический профиль изучаемых объектов (1 – МЭ листьев крапивы двудомной; 2 – облепиховое масло)На хроматограмме в месте нанесения пробы на линии старта проявляется пятно. Такимобразом, можно предположить, что хроматографический профиль растворов МЭ является специфической характеристикой и может быть рекомендован для идентификации масел и МЭ поколичеству зон с определенными значениями величин Rf компонентов.В выбранной элюирующей системе наблюдается удовлетворительное разделение хроматографических зон, так как значение селективности сорбции превышает единицу (таблица 226).Возникает также необходимость провести анализ рафинированных масел-экстрагентов (подсолнечного, соевого и оливкового масел), используемых для производства МЭ в промышленных условиях [157,376] дляустановления вида масла, на основе которого были получены изучаемые МЭ.Таблица 226Параметры разделения зон в элюирующей системе №4 (на примере МЭ листьев крапивы двудомной) [360,365]№*Величина Rf±0,02К10,109,020,165,330,223,640,272,750,441,360,511,070,980,02*- № зоны на хроматограмме (рис.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
