Диссертация (1139676), страница 35
Текст из файла (страница 35)
Тест-штамм B.cereus 96 иопытные штаммы B.cereus также проявили чувствительность к соединению, МПКисследованных опытных штаммов B.cereus составила 125-1000 мкг/мл (таблица6.9). Проведенное исследование позволяет дать заключение о противомикробнойактивности пирролохинолона 1D относительно S.pyogenes и B.cereus in vitro.233Таблица 6.9 – Показатели МПК соединения 1D для опытных штаммовмикроорганизмов (метод серийных разведений в Мюллер-Хинтон бульоне)ШтамммикроорганизмаS.pyogenes(n=51)B.cereus (n=22)3,900МПК (мкг/мл)7,8 15,6 31,25 62,5 125,0 250,0 500,0 750,0 1000,000091588560000355362,3-Диметил-6-(трифторметил)-1,9-дигидро-8H-пирроло[3,2-h]хинолин-8он (1D) обладает противомикробной активностью в отношении исследуемых тестштаммов и опытных штаммов S.pyogenes и B.cereus in vitro.Значимогоэффектавотношенииизученныхграмотрицательныхмикроорганизмов in vitro не наблюдается.Относительно тест-штаммов микроорганизмов соединение с лабораторнымшифром 4D проявило следующую активность: для S.aureus 25923 АТСС – МПКисследуемого соединения составила 125 мкг/мл, для E.coli 25922 АТСС – 125мкг/мл, для P.aeruginosa 27853 АТСС – более 250 мкг/мл, для S.pyogenes 1238АТСС – 125 мкг/мл, B.cereus 96 – 125 мкг/мл (таблица 6.10).234Таблица 6.10 – Чувствительность тест-штаммов микроорганизмов ксоединению 4D (метод серийных разведений в Мюллер-Хинтон бульоне)250,0S.aureus25923АТСС+/-E.coli25922АТСС+/-125,0+/-1+/-1++++/-1+/-162,5+++++++31,3+++++++15,7+++++++++++7,9+++++++++++3,9+++++++++++++++1,96+++++++++++++++0,98++++++++++++++++/-+/-+/-+/-+/-питательной среде, мкг/млКонцентрация веществ вТест-культура«Отрицательный»контрольПримечание: –1P.aeruginosa27853 АТСС++S.pyogenes B.cereus123896АТСС+/+/-титр активности, «+++» – диффузное помутнение МХБ;«++» – умеренное помутнение МХБ; «+» – слабое помутнение МХБ; «+/-» –отсутствие помутнения МХБ (как в «отрицательном контроле»); «0» – отсутствиероста при пересеве на МХА.Изучаемое соединение в исследуемых дозах способно подавлять рост кактест-штаммовисследуемыхграмположительныхграмотрицательных (таблица 6.11).микроорганизмов,таки235Таблица 6.11 – Антибактериальная активность соединения 4D относительнотест-штаммов микроорганизмов (диско-диффузионный метод)Тест-штамм микроорганизмаЗона задержкироста (мм)Активностьсоединения 4DStaphylococccus aureus 90618активноStaphylococcus aureus 43300 АТСС16активноStreptococcus pyogenes 19615 АТСС16активноStreptococcus pneumoniae 4961916активноATCCEnterococcus faecalis 19433ATCC17активноEscherichia coli M-1718активноSalmonella enteritidis 5765 ATCC16активноShigella sonnei S-форма 2017активноCitrobacter freundii 101/5716активноKlebsiella pneumoniae 13883 АТСС16активноProteus vulgaris «Цветков»16активноPseudomonas aeruginosa 45316активноПримечание: соединение высокоактивно – полное отсутствие роста вдиаметре >25 мм; соединение активно – полное отсутствие роста в диаметре 16-25мм; соединение малоактивно – полное отсутствие роста в диаметре 10-15 мм;соединение неактивно – задержка роста не наблюдается.Пирролохинолон 4D в исследуемых дозах способно подавлять рост какопытныхштаммовисследуемыхграмположительныхмикроорганизмовStaphylococcus spp.
(n=47 из 51 исследованного), Streptococcus spp. (n=56 из 59исследованных),Enterococcusграмотрицательныхspp.микроорганизмов(n=15),такEscherichiaиопытныхcoli(n=11штаммовиз12исследованных), Salmonella spp. (n=16 из 17исследованных), Shigella sonnei (n=3),Citrobacter freundii (n=9 из 10 исследованных), Enterobacter spp. (n=24 из 25исследованных), Klebsiella spp. (n=12 из 17 исследованных), Proteus spp. (n=13 из16 исследованных), Morganella morganii (n=3), Pantoea agglomerans (n=6 из 8исследованных), Hafnia alvei (n=2), Acinetobacter baumani (n=11), Pseudomonasaeruginosa (n=13 из 15 исследованных) (таблица 6.12).236Таблица 6.12 – Антибактериальная активность соединения 4D относительноопытных штаммов микроорганизмов (диско-диффузионный метод)Штамм микроорганизма1Staphylococcus aureus (n=9)Staphylococcus epidermidis (n=18)Staphylococcus warneri (n=7)Staphylococcus saprophyticus(n=10)Staphylococcus haemolyticus(n=7)Штаммов Streptococcus spp.(n=51)Streptococcus pyogenes (n=10)Streptococcus pneumonia (n=7)Streptococcus salivarius (n=7)Streptococcus uberis (n=5)Streptococcus mitis (n=8)Streptococcus agalactia (n=6)Streptococcus sanguinis (n=6)Streptococcus mutans (n=10)Штаммов Streptococcus spp.(n=59)Enterococcus faecalis (n=8)Enterococcus faecium (n=7)Штаммов Enterococcus spp.(n=15)Salmonella enteritidis (n=13)Salmonella typhimurium (n=4)Штаммов Salmonella spp.
(n=17)Enterobacter cloaceae (n=7)Enterobacter aerogenes (n=7)Enterobacter gergoviae (n=4)Enterobacter amnigenes (n=7)Штаммов Salmonella spp. (n=25)Klebsiella pneumoniaе (n=10)Klebsiella oxytoca (n=7)Штаммов Klebsiella spp. (n=17)Proteus vulgaris (n=8)Зона задержки роста / Количествоштаммов микроорганизмов≤ 10 мм 11-15 мм 16-25 мм ≥ 25 мм234527117719--7--447--1113107757551056---8715--111132511241677462475127---23712Proteus mirabilis (n=8)Штаммов Proteus spp. (n=16)Escherichia coli (n=12)Shigella sonnei (n=3)Citrobacter freundii (n=10)Morganella morganii (n=3)Pantoea agglomerans (n=8)Hafnia alvei (n=2)Acinetobacter baumani (n=11)Pseudomonas aeruginosa (n=15)Примечание: соединение высокоактивно3231122– полное4561311393621113отсутствие роста вдиаметре >25 мм; соединение активно – полное отсутствие роста в диаметре 16-25мм; соединение малоактивно – полное отсутствие роста в диаметре 10-15 мм;соединение неактивно – задержка роста не наблюдается.Таким образом, пирролохинолон с лабораторным шифром 4D проявилширокий спектр противомикробной активности, как в отношении исследованныхграмположительных, так и в отношенииисследованных грамотрицательныхмикроорганизмов in vitro.
Исследуемое соединение способно задерживать ростStaphylococcus aureus 43300 АТСС (MRSA). Для опытных штаммов Staphylococcusspp. – МПК изучаемого соединения составила 125-1000 мкг/мл, для E.coli – 1251000 мкг/мл, для P.aeruginosa – 500-1500 мкг/мл, для Streptоcoccus spp. – 62,51000 мкг/мл, B.cereus – 125-1000 мкг/мл (таблица 6.13).Таблица 6.13 – Показатели МПК соединения 4D для опытных штаммовмикроорганизмов (метод серийных разведений в Мюллер-Хинтон бульоне)ШтамммикроорганизмаS.pyogenes(n=54)S.mitis (n=34)S.agalactiae(n=31)3,9000МПК (мкг/мл)7,8 15,6 31,25 62,5 125,0 250,0 500,0 750,0 1000,00002915621100000016149745311212238ШтамммикроорганизмаS.bovis (n=30)S.uberis (n=35)S.salivarius(n=30)S.sanguinis(n=34)S.mutans (n=38)S.pneumoniae(n=26)ШтаммовStreptococcusspp.
(n=312)S.aureus (n=33)S.epidermidis(n=25)S.haemolyticus(n=33)ШтаммовStaphylococcusspp. (n=91)E.coli (n=30)P.aeruginosa(n=25)B.cereus (n=15)3,9000МПК (мкг/мл)7,8 15,6 31,25 62,5 125,0 250,0 500,0 750,0 1000,00001266501000175542200012782100000119103100000000020101541416110100001417749271080000000000201578312110000001710231000005225662000000000015080511161800000841111,2,3,9-Тетраметил-6-(трифторметил)-1,9-дигидро-8H-пирроло[3,2h]хинолин-8-он (4D) обладает широким спектром противомикробной активностии выраженной антибактериальной активностью в отношении изученных штаммовкак грамположительных, так и грамотрицательных микроорганизмов in vitro.Пирролохинолон 4D способен замедлять или подавлять рост и размножениеклинических штаммов S.aureus, S.epidermidis, S.saprophyticus, S.haemolyticus,S.warneri, S.pyogenes, S.pneumoniae, S.salivarius, S.uberis, S.mitis, S.agalactiae,S.sanguinis, S.mutans, E.
faecalis, E.faecium,S.sonnei,C.freundii,E.cloaceae,E.coli, S.enteritidis, S.typhimurium,E.aerogenes,E.gergoviae,E.amnigenes,E.hormaechei, K.pneumoniaе, K.oxytoca, P.vulgaris, P.mirabilis, M.morganii, H.alvei,P.agglomerans, A.baumani, P.aeruginosa.239Соединение 4D обладает способностью подавлять рост и размножениеклинического штамма M.tuberculosis, чувствительного к противотуберкулезнымпрепаратам, в дозе 250 мкг/мл [130].Группа соединений, полученных на основе замещенных 7-аминоиндоловпоказала различную противомикробную активность.
Наиболее активнымиоказались соединения с лабораторными шифрами HD и 4D, проявившие широкийспектрдействияиспособнызадерживатьростиразмножениеграмположительных и грамотрицательных микроорганизмов, M.tuberculosis.Циклический амид HD в дозе от 117 мкг/мл способен подавлять рост иразмножение P.aeruginosa.
Изучаемый циклический амид HD активен вотношении антибиотикоустойчивых штаммов S.aureus, E.coli и P.aeruginosa.Соединения с лабораторными шифрами HD и 4D не уступают по активностипрепаратамсравнениядиоксидину,нитрофурантоину,фосфомицинуимирамистину.В рамкахисследованадальнейшегоостраяисследованиятоксичностьбиологических свойств была6-гидрокси-2,3-диметил-6-(трифторметил)-1,6,7,9-тетрагидро-8H-пирроло[3,2-h]хинолина-8-она (HD) и 1,2,3,9-тетраметил-6(трифторметил)-1,9-дигидро-8H-пирроло[3,2-h]хинолин-8-он (4D).При внутрибрюшинном введении соединения с лабораторным шифром HDдля самцов мышей LD50 составила 1753 (1565÷1963) мг/кг, LD16 – 1306 мг/кг, LD84– 2032 мг/кг, для самок мышей LD50 – 1649 (1472÷1847) мг/кг, LD16 – 1247 мг/кг,LD84 – 1966 мг/кг. Для самцов крыс LD50 составила 1511 (1337÷1707) мг/кг, LD16 –1013 мг/кг, LD84 – 1838 мг/кг, для самок крыс LD50 – 1380 (1221÷1560) мг/кг, LD16– 1010 мг/кг, LD84 – 1675 мг/кг.Перед гибелью животных, через 15-20 мин после введения исследуемогосоединения наблюдалось сходная картина острого токсикоза.При внутрижелудочном введении мышам LD50 для самцов составила 1994(1780÷2233) мг/кг, LD16 – 1521 мг/кг, LD84 – 2390 мг/кг, для самок мышей LD50 –2041 (1822÷2286) мг/кг, LD16 – 1610 мг/кг, LD84 – 2334 мг/кг.240При внутрижелудочном введении крысам в максимально возможномобъеме и максимально возможной концентрации для данного способа введениясоединение HD не вызывало гибель экспериментальных животных, вследствиечего определение средней смертельной дозы не представлялось возможным.При накожном нанесении исследуемого соединения в максимальновозможной концентрации амид HD не вызывал гибель животных, вследствие чегоопределение LD50 при накожном нанесении не представлялось возможным.По классификации токсичности веществ [79] изучаемое соединение HDотносится к практически нетоксичным соединениям.При внутрибрюшинном введении соединения с лабораторным шифром 4Dдля самцов мышей LD50 составила 464 (400÷538) мг/кг, LD16 – 316 мг/кг, LD84 –643 мг/кг, для самок мышей LD50 – 359 (309÷416) мг/кг, LD16 – 251 мг/кг, LD84 –478 мг/кг.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
