Диссертация (1139574), страница 20

Просмтор этого файла доступен только зарегистрированным пользователям. Но у нас супер быстрая регистрация: достаточно только электронной почты!

Текст из файла (страница 20)

В данную группу вошли пациенты с различнымиклиническими форма акне и степенью тяжести. Они получили полноценный курсИТ. В течение 5-ти-летнего диспансерного наблюдения наступил рецидив акне(N=25). Поэтому данная группа пациентов формировалась не сразу, апоследовательно на протяжении 5 лет.Клиническая характеристика ИТ-чувствительных больных акне (N=38)оценивалась на момент первичного обращения к врачу. Существенно, что ранееникто из них лечение ИТ не получал.лет).Возрасте больных был в пределах 17 до 44 лет (среднее 24,9±6,5, Mo 18131Женщин было в 2,5 раза больше (71,1%/27 против 28,9%/11).Длительность заболевания колебалась от 4 месяцев до 26 лет (среднеезначение 9,2±7,6, Mo 6 лет).Дебют акне приходился на 11-34 года (среднее значение 16,0±4,7, Mo 17лет).Генетическая предрасположенность к акне отмечена в 68,4% (26 больных)случаев.Значения ДИА колебались в пределах 6-14 баллов (среднее значение9,7±2,7, Mo 6,11,14).Клиническая характеристика ИТ-резистентных больных акне (N=25)оценивалась с учетом последовательности формирования группы.

У части из них(N=7) это сделано при первичном обращении, у остальных (N=18) в процессдиспансерного наблюдения за 5 лет. Рецидивы заболевания наиболее частовозникали на 1-2 году после клинического выздоровления (N=11), у остальных –через 3-5 лет (N=7).Возраст больных был в пределах 16 до 43 лет (среднее 25,8±7,2 Mo 23 лет).Женщин было в 5,2 раза больше (84,0%/21 против 16,0%/4).Длительность заболевания колебалась от 2 до 27 лет (среднее значение10,5±7,4 Mo 10 лет).Дебют акне приходился на 12-26 лет (среднее значение15,3±4,0 Mo 15 лет).Генетическая предрасположенность к акне отмечена в 88% (22 больных)случаев.Значения ДИА колебались в пределах 6-13 баллов (среднее значение8,4±1,6, Mo 9).Упациентовконтрольнойгруппыклиническиепроявленияакнеотсутствовали, как на момент сдачи крови, так и по данным анамнеза.Генетическое исследование крови проводилось анонимно.Выбрано 4 точечных полиморфизма, которые с наибольшей вероятностьювлияют на свойства кодируемого белка LCN2.

При проведении генетическогоисследования определяли наличие точечных мутаций:132rs11556770 G117T Gln39His – замена остатка глутамина в 39-м положениина гистидин;rs2232627 C361T Pro121Ser – замена пролина в 121-м положении на серин;rs79993583 C371T Thr124Met – замена треонина в 124-м положении наметионин;rs113469275 T595C Stop919Arg – замена стоп-кодона на аргинин.Для полиморфизма, связанного с заменой остатка глутамина в 39-мположении на гистидин (rs11556770 G117T Gln39His), мутантных аллелей необнаружено ни у одного из пациентов. По-видимому, такие аллели в принципеочень редки.В случае полиморфизмов, связанных с заменой пролина в 121-м положениина серин (rs2232627 C361T Pro121Ser) и треонина в 124-м положении на метионин(rs79993583 C371T Thr124Met), картина иная. В первом случае обнаружен одинмутантный аллель в форме гетерозиготы у одного из пациентов, резистентных кИТ, и ни одного мутантного аллеля у пациентов ИТ-чувствительной иконтрольнойэтотгруппы.полиморфизмПоэтомуимееткакое-тотрудноотношениесказать,кчтоИТ-резистентности.Учитывая редкость данной мутации, можно полагать, что достоверныерезультаты о ее значимости в определении чувствительности/резистентности акнек ИТ могут быть получены при увеличении объема выборки больных.

Известно,что в случайной популяции людей гетерозиготный генотип встречается реже,чемуодногочеловекаиз100.(базаданныхNCBI–dbSNP–https://www.ncbi.nlm.nih.gov/projects/SNP/snp_ref.cgi?rs=2232627).Более интересная ситуация выявлена при замене треонина в 124-мположении на метионин (rs79993583 C371T Thr124Met). В этой ситуациимутантный аллель в форме гетерозиготы также найден у того же ИТрезистентного пациента, анализируемого выше. В то же время этот мутантныйаллель найден также и у одного пациента контрольной группы, причем в формегомозиготы. Известно, что для этого полиморфизма частота встречаемостивслучайнойпопуляциилюдеймутантногоаллелявформе133гетерозиготы составляет примерно 2 случая на 100 человек, а мутантныеаллели в форме гомозиготы чрезвычайно редки (база данных NCBI – dbSNP –https://www.ncbi.nlm.nih.gov/projects/SNP/snp_ref.cgi?rs=79993583). По-видимому,и в этом случае необходимо исследование большей выборки больных,различающихся по чувствительности/резистентности к ИТ.Иная картина наблюдается с полиморфизмом, связанным с удлинениемполипептидной цепи липокалина-2 на 94 аминокислотных остатка (rs113469275T595C Stop919Arg) (Таблица 13).Таблица 13 – Результаты полиморфизма rs113469275 T595C Stop919Arg(замена стоп-кодона на аргинин)rs113469275 T595C Stop919ArgГруппы пациентовнормаTT*% мутациймутантныйCT**CC***Контрольная группа (N=30)28206,7ИТ-чувствительные (N=38)344010,5ИТ-резистентные (N=25)1410/40%1/4%44,0*ТТ – нормальный геном, **СТ – гетерозиготные мутации, ***СС – гомозиготные мутацииМутантные аллели в виде замещения стоп-кодона на аминокислоту аргинин(rs113469275 T595C Stop919Arg) в форме гетерозиготы найдены во всех трехгруппах пациентов.

В опытных группах (N=63) данная мутация выявлена у 15(23,8%) больных. Использование критерия Колмогорова-Смирнова показаловзаимосвязь между наличием мутантной аллели в виде замещения стоп-кодона нааминокислоту аргинин (rs113469275 T595C Stop919Arg) в форме гетерозиготы упациентов с ИТ-резистентностью (р<0,05). Встречаемость гетерозиготныхмутаций у ИТ-резистентных пациентов была достоверно в 6 раз (40% против6,7%) выше в сравнении с лицами контрольной группы и в 3,8 раза – в сравнениис ИТ-чувствительными больными (40% против10,5%,).

Только у одного изпациентов ИТ-резистенной группы мутантный аллель обнаружен в гомозиготнойформе. Таким образом мутантный ген в группе ИТ-резистентных пациентоввстречался у 44% больных.134Очевидно, данный вид мутации имеет непосредственное отношение к ИТрезистентности. К сожалению, частота его встречаемости в случайной популяциилюдей неизвестна. Наличие таких мутантных аллелей у некоторых пациентовконтрольной группы можно объяснить по-разному. Во-первых, эти пациентымогут оказаться в действительности также ИТ-резистентными.

На моментисследования пациенты обследовались анонимно и дальнейшая их судьба нам неизвестна. Во-вторых, наличие упомянутого мутантного аллеля скорее всегоявляется не единственной причиной ИТ-резистентности, а лишь обстоятельством,резко повышающим вероятность возникновения ИТ-резистентного фенотипа.Таким образом, данный полиморфизм является пока наилучшим критериемгенетического маркера ИТ-резистентности.Сопоставление результатов генетического исследования с особенностямиклиники акне свидетельствует, что у всех пациентов с мутантным аллелемrs113469275 T595C Stop919Arg, независимо от чувствительности/резистентностик ИТ (N=15), регистрировалась средняя степень тяжести заболевания, у всех 8пациентов с поздними акне оно носило стойкий характер.

Наследственнуюпредрасположенность к акне имели 80% с генетической мутацией (критерийВилкоксона, р<0,05, Н0 опровергается и связь доказана) больных. При разрешенииакне-элементов в процессе терапии рубцы у этих пациентов не формировались.Последний факт подтвержден еще одним клиническим наблюдением – приналичии келоидных рубцов у 8 больных из группы пациентов, обследованных сиспользованием генетического метода, мутантный аллель rs113469275 T595CStop919Arg не выявлен.135Глава 3.7.

Иммунологические исследования при акнеХарактеристикаконтингентабольных.Общеизвестно,чтовоспалительный процесс при акне запускает иммунологический ответ, вчастности активацию эффекторов врожденного иммунитета. В настоящемисследовании сделан акцент на динамику некоторых показателей врожденногоиммунитета до и после лечения ИТ у пациентов с акне средней и тяжелойстепеней.Иммунологическое исследование проведено у 124 больных, в том числе у25 с вульгарными папуло-пустулезными акне тяжелой степени, 23 – свульгарными папуло-пустулезной акне средней степени, 17 – с конглобатнымиакне, 10 – с инверсными акне 2 степени тяжести, 24 –с поздними акне тяжелойстепени и 25 – с поздними акне средней степени.3.7.1. Показатели врожденного иммунитета у пациентов со средней и тяжелойстепенью акне до леченияЭкспрессия TLRs рецепторов.

Для оценки участия в патогенезе акнеэффекторов врожденного иммунитета при воспалении в зависимости от степенитяжести нами была изучена экспрессия TLRs в морфологических элементах кожи(папулах, пустулах, узлах). У пациентов с конглобатными акне исследовали узлы,при вульгарных акне – папулы и пустулы, при инверсных акне – узловатокистозные элементы кожи (таблица 14).Ниже на рисунках 66-68 представлено графическое изображение данныхтаблицы отдельно для TLR2,4,9 при акне тяжелой степени до лечения. Показателиэкспрессии TLR2,4,9 в биоптатах кожи, взятых из различных морфологическихэлементов во всех случаях отличались от таковых у лиц контрольной группы.136Таблица 14 – Число TLRs-экспрессирующих клеток в биоптатах кожи приразличных клинических формах акне тяжелой степени до леченияКлинические формы акнеЧисло/морфологические элементы кожи больных (N)Узлы (конглобатные акне)Папулы и пустулы (вульгарные ипоздние акне тяжелой степени)Узловато-кистозные элементы(инверсные акне 2 степени)Контроль1749TLRs-экспрессирующиеклеток (M±σ)TLR2TLR4TLR91,8±0,9* 2,0±0,8* 1,9±1,1*3,8±1,2* 4,1±0,2* 3,4±0,6*102,2±0,9*1,8±0,66,3±0,7*101,3±0,41,5±0,71,1±0,1Примечание: тест Манна-Уитни для независимых выборок.

Метод определения показателя –проточная цитофлуориметрия. σ ‒ среднеквадратичное отклонение; n – число больных.*достоверность различий с контролем, p<0,05Рисунок 66 – Значения ТLR2экспрессирующихклетоквбиоптатахвзятыхизкожи,узлов при конглобатных акне(КА), папул и пустул (ППЭ) привульгарныхпапуло-пустулезных и поздних акнетяжелой степени (ВиПАТС) иузловато-кистозныхэлементов(УКЭ) при инверсных акне 2степени(ИА2ст).КГ–контрольная группа.Выявлены достоверные отличия в экспрессии TLR2 у пациентов со всемиклиническими формами акне тяжелой степени по сравнению с контролем(1,3±0,4) (р<0,05).

Характеристики

Список файлов диссертации