Диссертация (1139568), страница 14
Текст из файла (страница 14)
Площадь выпадения волос на кожеволосистой части головы оценивалась по методике визуального сопоставлениясуммарной площади очагов выпадения волос у пациента со схематичнымизображением скальпа и площади его поверхности, разделенной на четыреквадранта, предложенной Olsen E.A. et al. (2004) [137] (рисунок 1).Рисунок 1. Схема оценки площади выпадения волос [137]68В соответствии с используемой классификацией [137] применяласьследующая градация площади выпадения волос на скальпе (S):S0 – волосы сохраненыS1 – площадь потери волос до 25%S2 – площадь потери волос 26% – 50%S3 – площадь потери волос 51% – 75%S4 – площадь потери волос 76% – 99%а – площадь потери волос 76% – 95%в – площадь потери волос 96% – 99%S5 – площадь потери волос 100%Степень вовлечения в патологический процесс кожи туловища и конечностей (В)оценивалась по следующим признакам:В0 – волосы сохраненыВ1 – частичное выпадение волосВ2 – 100% выпадение волосИзменение ногтевых пластин учитывалось по параметрам:N0 – изменение ногтей отсутствуетN1 – частичное изменение ногтейа – дистрофия/трахионихия всех 20 ногтевых пластин.Диагноз тотальная алопеция устанавливался в том случае, если клиническийфенотип пациента соответствовал S5В0.
В случае полной утраты волос наволосистой части головы и частичном выпадении волос на коже туловища иконечностей (S5В1), выставлялся диагноз тотальная алопеция/универсальнаяалопеция. Диагнозу универсальной алопеции соответствовал клиническийфенотип S5В2. Кроме того, в том случае, если площадь очагов поражения наволосистой части головы превышала 40%, то использовался термин субтотальнаяалопеция [34] (рисунок 2).
В целом оценка степени тяжести ГА проводилась сучетом площади поражения волосистой части головы. При площади облысения до6925% диагностировалась легкая степень тяжести болезни, 25% - 50% – средняястепень тяжести ГА, свыше 50% – тяжелая степень тяжести [1].На основании клинического осмотра также определялись стадии ГА.Прогрессирующая стадия диагностировалась при наличии зоны «расшатанныхволос», определяемых ручной эпиляцией волос по периферии очагов поражения.Стационарная стадия устанавливалась в том случае, если зона «расшатанныхволос» не определялась. Стадия регресса диагностировалась, если в очагеалопецииотмечалсяроствеллюсаичастичныйросттерминальныхпигментированных волос [34].ДРисунок 2 – Клинические признаки гнездной алопеции у пациентки Ю.В., 37лет с диагнозом: Гнездная алопеция.
Субтотальная форма. Ониходистрофия(единичные точковидные углубления (обозначены стрелками), лейконихии),S4аВ0N1. Расчет площади потери волос на скальпе: А. 99%×0,18=17,8%; Б. 100%×0,18=18%; В.95%×0,40=38%; Г. 75%×0,24=18%. Площадь потери волос=17,8%+18%+38%+18%=91,8%70Диагностикагнезднойалопециидополняласьобнаружениемдерматоскопических признаков заболевания: «желтых точек», соответствующихперифолликулярному воспалению, «черных точек» (кадаверизированные волосы),веллусных волос и волос в виде «восклицательного знака» с использованиемкамеры «Aramo GS» (ARAM HUVIS Co., Ltd, Южная Корея) (рисунок 3) [38, 203].Рисунок 3 – Дерматоскопические признаки гнездной алопеции.
А – «желтыеточки», волос в виде «восклицательного знака»; В – «черные точки»(кадаверизированные волосы), веллусные депигментированные волосы (×60,камера Aramo SG)С целью исключения сопутствующей патологии и выявления возможныхизменений на системном уровне было выполнено лабораторно-инструментальноеобследование пациентов с ГА. Объем лабораторно-инструментальных методовисследования включал микроскопическое исследование чешуек кожи и волос наналичие патогенных грибов; серологического исследования для исключениясифилиса; клинического анализа крови; иммунограммы; биохимического анализакрови(альбумин,общийбелок,холестерин,общийбилирубин,аланинаминотрансфераза (АЛТ), аспартатаминотрансфераза (АСТ), щелочнаяфосфатаза, мочевина; сахар, сывороточное железо, креатинит); определениесывороточныхконцентрацийгормонов,позволяющихоценитьфункциющитовидной железы (тиреотропного гормона гипофиза (ТТГ), тироксинасвободного (Т4 своб.), трийодтиронина свободного (Т3 своб.)) и антител ктиреопероксидазе (АТ к ТПО); выполнение ультразвукового исследования71внутренних органов и щитовидной железы, фиброгастродуоденоскопии (ФГДС) всочетаниисHelicobacterморфологическимpylori(H.иpylori).биохимическимКонсультацииметодомсмежныхобнаруженияспециалистов(гастроэнтеролога, эндокринолога, отоларинголога, стоматолога) выполнялись попоказаниям.На основе данных клинического анализа крови пациентов и группысравнения были рассчитаны интегральные гематологические показатели: индекслейкоциты – СОЭ (ИЛСОЭ), лимфоцитарно-гранулоцитарный индекс (ИЛГ),индекс соотношения нейтрофилов и моноцитов (ИСНМ), индекс соотношениялимфоцитов и моноцитов (ИСЛМ) и индекс соотношения нейтрофилов илимфоцитов (ИСНЛ) по представленным ниже формулам [60]:ИЛСОЭ ИЛГ лимфоц.
(%) СОЭ,100лимфоц. (%) 10,мц. (%) юн. нейт. (%) п. нейт. (%) с. нейт. (%) эоз. (%) баз. (%)ИСНМ п. нейт. (%) с. нейт. (%),моноц. (%)ИСЛМ лимфоц. (%),моноц. (%)ИСНЛ п. нейт. (%) с. нейт. (%), гделимфоц. (%)лимфоц. (%) – относительное количество лимфоцитов,мц. (%) – относительное количество миелоцитов,юн. нейт.
(%) – относительное количество юных нейтрофилов,п. нейт. (%) – относительное количество палочкоядерных нейтрофилов,c. нейт. (%) – относительное количество сегментоядерных нейтрофилов,моноц. (%) – относительное количество моноцитов,72эоз. (%) – относительное количество эозинофилов,баз. (%) – относительное количество баозофилов.Для выявления особенностей иммунного статуса у 22 пациентов спрогрессирующей стадией ГА и 35 лиц группы сравнения были определеныпоказатели клеточного и гуморального иммунитета.
Исследование проведено вПроблемной научно-исследовательской лаборатории по изучению механизмовестественного иммунитета ФГБОУ ВО ОрГМУ МЗ РФ (заведующий – д.м.н.,профессор А.И. Смолягин; лицензия Федеральной службы по надзору в сферездравоохранения №ФС-56-01-000819 от 13.12.2013 г.). Иммунологическоеобследование включало определение популяционного и субпопуляционногосостава лимфоцитов, включая CD3+-клетки (зрелые Т-лимфоциты), CD4+-клетки(Т-хелперы), CD8+-клетки (цитотоксические лимфоциты), CD19+-клетки (Влимфоциты) периферической крови в реакции иммунофлюоресценции с помощьюмоноклональныхантителпроизводстваООО«Сорбент».Определениефагоцитарной активности сегментоядерных нейтрофилов в периферическойкрови проведено по методике В. В.
Меньшикова (1987). Для этого в мазках изпериферической крови определяли процентное содержание фагоцитирующихклеток – фагоцитарный показатель (ФП) и поглотительную способностьнейтрофилов – фагоцитарный индекс (ФИ) в отношении тест-культурызолотистогостафилококкаиммуноглобулинов(IgA,(штаммIgM,IgG)209-Р).Определениепроводилосьсывороточныхметодомрадиальнойиммунодиффузии.
Концентрацию общего IgЕ устанавливали методом ИФА сиспользованием наборов ООО «Алкор Био». Уровень циркулирующих иммунныхкомплексов (ЦИК) в сыворотке крови определялся в реакции преципитации сраствором полиэтиленгликоля.Учитывая значительную вариабельность показателей иммунограммы,среднегрупповые параметры иммунного статуса не в полной мере могут отражатьварианты возникающих иммунных отклонений в исследуемой группе пациентов[44]. В связи с этим при оценке иммунограмм наряду с анализом указанных выше73показателей был проведен частотный анализ, заключающийся в установленииколичества лиц в процентах от их общего числа, имеющих II и III степеньиммунных расстройств по ряду параметров индивидуальных иммунограмм [44].Вычисление степени иммунных расстройств (СИР) для каждого обследуемогобыло проведено по формуле [44]:Показатель иммунного статуса пациента 1 100% , где Показатель иммунного статуса, принятый за нормуСИР показатель иммунного статуса, принятый за норму, представляет собойаналогичный средний показатель здоровых лиц группы сравнения.В случае получения расчетных положительных значений диагностироваласьстепень гиперфункции иммунной системы (ГИС), при отрицательных значениях степень иммунной недостаточности (СИН).
Если полученные значения лежали винтервале от 1% до 33% - это соответствовало первой (I) степени иммунныхрасстройств, от 34% до 66% - второй (II) степени иммунных расстройств, впределах 67% - 100% - третьей (III) степени иммунных расстройств.Выраженность окисидативного стресса и активность антиоксидантныхферментов была определена при обследовании 35 больных прогрессирующейстадией очаговых форм ГА (основная группа) и 31 здорового лица (группасравнения), средний возраст которых соответственно составил 34,1±2,0 лет и30,5±1,8 лет.
Исследование выполнено в биохимической лаборатории ФГБОУ ВООрГМУ МЗ РФ (руководитель – д.м.н., профессор С.И. Красиков). Материаломдля исследования служила венозная кровь, отбор образцов которой проводился впластиковые пробирки BD Vacutainer с этилендиаминтетрауксусной кислотой(ЭДТА), объемом 4,5 мл (Becton Dickinson and Company, США). Оценкавыраженности окислительного стресса выполнена на основании определенияинтенсивности процессов перикисного окисления липидов.
Для этого в сывороткекрови обследуемых определялся уровень малонового диальдегида (МДА) припостановке реакции с тиобарбитуровой кислотой при высокой температуре вкислой среде с получением триметидилового комплекса [428]. Исследование74активности ферментов антиоксидантной защиты проводилось в эритроцитарноймассе, полученной после троекратного отмывания эритроцитов охлажденным до5°С физиологическим раствором. Активность СОД в гемолизате эритроцитовопределялась по скорости аутоокисления адреналина в адренохром в щелочнойсреде [88]. За единицу активности СОД принималось такое количество фермента,которое ингибирует скорость аутоокисления адреналина на 50%. Каталазнаяактивность эритроцитов оценивалась кинетическим методом прямой регистрацииразложения пероксида водорода [608].