Диссертация (1139554), страница 45
Текст из файла (страница 45)
Вбольшинстве зарубежных публикаций активированные NK-клетки вводятвнутривенно в высоких концентрациях, рассчитанных на массу тела пациента,что не является физиологичным и приводит к субпопуляционному дисбалансулимфоцитов и васкулитам т.к. показано, что NK-клетки после активации экспрессируют ряд рецепторов, облегчающих их хоуминг и тропных к эндотелиюсосудов, а после адоптивного переноса они обнаруживаются в кровотоке ициркулируют в течение нескольких недель [151, 284].В настоящем исследовании при помощи методов лучевой диагностикидоказана эффективность применения АИТ у больных меланомой с выявлением частичной регрессии опухоли (таблица 33). Приведенные результаты237превосходят имеющиеся литературные данные зарубежных исследователей поэффективности АИТ [12, 65].
Достигнута длительная стабилизация процессаболее 2-лет у больных КРР, РМЖ, ПКР, раком легкого и меланомой, как былоописано нами ранее [11, 12, 65].Проведенные собственные экспериментальные и клинические исследования позволяют создать необходимую основу для новой стратегии примененияАЦЛ в клинической практике, а комбинированная терапия с включением АИТможет дополнить стандартные схемы лечения больных солидными опухолями,как в комплексе с ХТ, так и в монорежиме и будет являться приоритетным выбором для терапии онкологических больных в будущем.Не смотря на большое количество исследований ряд вопросов, связанных с оценкой иммунологических факторов, влияющих на результаты противоопухолевого лечения, остается без ответов.
Не оценивается характер иммуносупрессии и изменение показателей иммунитета в процессе лечения. Такжедо сих пор нет предиктивных критериев, по которым можно было бы определить взаимосвязь между ответом организма на иммунотерапевтические воздействия и эффективностью лечения [41-44]. С другой стороны, изучение взаимоотношений между иммунной системой организма больного и опухолью затруднено тем, что каждое онкологическое заболевание имеет свои особенности и иммуногенность. В свою очередь не учитываются особенности иммунной системы индивида и наличие сопутствующих заболеваний, что оказываетнепосредственное влияние на развитие болезни и эффективность терапии.При измерении концентрации цитокинов было обнаружено увеличение содержания IFN-α у двух групп больных, которое у больных меланомой снизиласьболее чем в 2 раза после АИТ.
У больных с ОЖКТ выявлено повышенное содержание TNF-α. Однако у больных с ОЖКТ после АИТ увеличилось содержаниеIL-10. В исследовании Said Е.А. с коллегами показали, что TNF-α вызывает IL-10зависимое ингибировании экспансии и функции CD4+ T-клеток через увеличениеуровня экспрессии рецептора PD-1 на моноцитах, которые являются основными238продуцентами IL-10 в ответ на связывание PD-1 с PD-1L [333]. С этим может бытьсвязано увеличение концентрации IL-10 у больных с ОЖКТ после АИТ.Антиканцерогенные свойства IFN-α связаны со способностью стимулировать систему репарации ДНК, модулировать экспрессию генов, вовлеченных впроцесс канцерогенеза, подавлять клеточную репликацию онковирусов, контролировать ангионеогенез, активировать эффекторные клетки (Т-лимфоциты, макрофаги, дендритные клетки), а также увеличивать клеточную адгезию и продукцию других цитокинов [31].
Цитокин IFN регулирует экспрессию МНС-I на поверхности опухолевых клеток и МНС-II на макрофагах, что делает опухолевуюклетку уязвимой для различных эффекторов иммунной системы.Препараты IFN-α обладают плейотропным действием с широким спектром клинической активности как противовирусной, так и антиканцерогенной.Однако результаты клинических наблюдений не однозначны и применениеданного цитокина в больших концентрациях вызывает ряд побочных эффектов у пациентов, не отражаясь на эффективности противоопухолевого лечения[31]. В связи со сложной системой генных взаимодействий, механизмы, лежащие в основе этих эффектов, изучены не до конца.
Вероятно, постоянный высокий уровень IFN в сыворотке крови вызывает анергию эффекторных клеток,что продемонстрировано в данном исследовании. Наоборот достоверное снижение уровня цитокина после АИТ демонстрирует преобладание других факторов противоопухолевой иммунной защиты у онкологических больных.Некоторыми исследователями на мышиной модели было получено экспериментальное подтверждение критической роли растворимых лигандов NKG2Dв содействии опухоли уклонятся от иммунного надзора. В работе сравнивали образование опухолей с помощью имплантатов, экспрессирующих дикий тип молекул MICA, устойчивые к шедингу формы MICB или просто секретируемыйрастворимый лиганд. Результаты подтвердили способность растворимых лигандов стимулировать рост опухоли, в котором нарушение реакций NK-клеток былоотмечено в качестве основной причины [388].
Взаимосвязь была подтвержденаположительным влиянием нейтрализующих анти-MICA аутоантител, которые239были индуцированы в результате анти-CTLA-4 ИТ в клинических испытаниях упациентов с меланомой [219]. По большому счету, наблюдаемые отрицательноевлияние sMICA на иммунный ответ подтверждаются клиническими данными,когда было обнаружено, что ассоциированные с опухолью или растворимыеNKG2D лиганды связаны с ПБ и неблагоприятным прогнозом при раке поджелудочной железы и простаты (MICA/B) [161, 389], раке яичников (ULBP2 иULBP4) [248], меланоме (MICA, ULBP2) [296], и множественной миеломе(MICA) [221, 312].Результаты исследования подтверждают полученные нами клиническиеданные о негативном влиянии высоких концентраций молекул sMICA на экспрессию NKG2D у больных КРР и меланомой.
Также нами было показано, чтоувеличение концентрации этих лигандов рецептора NKG2D в процессе лечениясвязано с ПБ, а уменьшение с регрессией и СБ. Адоптивная ИТ оказывала позитивное влияние на иммунитет онкологических больных с незначительной иммуносупресcией и низким и средним содержанием sMICA в сыворотке крови. Примаксимально высоких концентрациях данных молекул в циркуляции положительный эффект от АИТ наблюдался редко. Это было продемонстрировано у пациентов, когда на этапах лечения и после АИТ зафиксировано уменьшение концентрации sMICA. Если на фоне терапии не происходило изменения высокойконцентрации данных молекул в сыворотке крови больных в сторону уменьшения, наблюдался рост опухоли или метастазов, следствием чего являлся неблагоприятный исход заболевания.
Такой же клинический исход был зафиксирован упациентов при увеличение сывороточного MICA.В результате данной работы был синтезирован рекомбинантный белокMICA человека. В системе in vitro продемонстрировано sMICA-зависимое экранирование активирующего рецептора NKG2D на NK-клетках здоровых людейи больных меланомой. Показана прямая зависимость уменьшения цитотоксичности NK-клеток от увеличения уровня rhMICA, которая была менее выраженау активированных лимфоцитов. Можно предположить, что в основе неэффек-240тивности противоопухолевого иммунного ответа лежит дистанционное взаимодействие sMICA с NKG2D+ лимфоцитами, что приводит к снижению цитотоксической активности лимфоцитов, что мы и подтвердили в экспериментальноймодели с rhMICA.Немаловажное значение для планирования лечения имеет то обстоятельство, что у многих онкологических больных исходно отмечаются нарушения какспецифического, так и неспецифического иммунитета.
Определение и характеристика клеточных и гуморальных факторов иммуносупрессии играет первостепенную роль в выборе тактики лечения и оценке прогноза заболевания. Для понимания механизмов, генерирующих иммуносупрессию при опухолевом росте, необходимо оценивать субпопуляционный состав лимфоцитов, апоптоз клеток иммунной системы, изучать закономерности экспрессии активирующих молекул наклеточной поверхности и наличие сывороточных форм иммуносупрессивных молекул таких как MICA, IL-10 и др. Оценка фенотипических особенностей лимфоцитов у больных имеет и практический аспект. Результаты исследований могутбыть использованы для диагностики иммунодефицитных состояний, определения характера и интенсивности угнетения иммунной системы, а также в целяхсовершенствования методов ИТ. Bсё вышесказанное позволяет считать изучениеособенностей иммунной системы в процессе опухолевого роста чрезвычайно актуальным, поскольку оно обогатит онкоиммунологию новыми знаниями и будетспособствовать решению проблем, связанных с иммунотропной терапией.Хорошо известно, что один из механизмов уничтожения трансформированных клеток-мишеней NK-клетками является антитело-зависимая клеточнаяцитотоксичность, которая реализуется через CD16 на NK-клетках.
На этой способности основано применение в терапии ряда моноклональных антител (мАТ).Одними из первых в клинической практике стали использовать мАТ для лечениялимфопролиферативных заболеваний. Несколько различных терапевтическихантител были разработаны на основе специфических опухолевых антигенов таких как анти-CD20, анти-Her2, анти-CD52, анти-EGFR и анти-CD38 [275].241Определенные надежды связываются в последнее время с опухолевымиантигенами и использованием мАТ в терапевтических целях, что может быть использовано в ИТ. Например, применение различных подходов с использованиемNK-основанной АИТ и нейтрализация иммуносупрессивных воздействий микроокружения опухоли или иммунных «чек пойнтов», таких как блокада KIR ииммуносупрессивных молекул с помощью антител к IL-18, MICA, ULBP, а такжеуменьшение численности Тreg и MDSC, существенно важны в терапии опухолей.Анализ литературных данных и собственных наблюдений показал, чтонаилучшее распознавание опухолевых клеток активированными лимфоцитамиможно достичь при минимальной опухолевой массе.
В настоящее время этогоможно добиться с помощью радикальной хирургии, ЛТ, XT или комбинированного воздействия на опухоль. Однако применение химиолучевой терапии приводит к снижению функциональной активности лимфоцитов у онкологическихбольных, что требует дополнительных иммунотропных воздействий. С другойстороны, доказать эффективность ИТ можно применяя её в режиме монотерапиипри наличии небольшой видимой опухоли, которую можно контролировать инструментальными методами диагностики. АИТ расширяет спектр возможностейпротивоопухолевой терапии. Помимо этого, она имеет преимущества по сравнению с традиционными методами лечения, а именно: хорошо переносится пациентами, не вызывает побочных эффектов, может применяться совместно с другимитрадиционными методами лечения, а также в случаях лекарственной резистентности, стимулировать противоопухолевый иммунитет, приводя к лизису опухолии улучшению качества и продолжительности жизни пациентов.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
