Диссертация (1139542), страница 26
Текст из файла (страница 26)
Большая близость величины 66,08% к верхнейгранице (70,22%) показывает, что два метода, рассмотренные здесь даютрезультаты, в большей части коррелированные между собой, хотякорреляция далеко не полная.156ГЛАВА 6. СИСТЕМНЫЕ МАРКЕРЫ ВОСПАЛЕНИЯ У ДЕТЕЙ СРАЗЛИЧНЫМ УРОВНЕМ КОНТРОЛЯ БРОНХИАЛЬНОЙ АСТМЫВажным компонентом патогенеза бронхиальной астмы являетсяхроническое аллергическое воспаление, локализующееся в респираторномтракте,ивомногомзаболевания.[179]Этоопределяющееобусловливаетклиническиепоискособенностикритериевконтролябронхиальной астмы, отражающих течение воспалительного процесса уконкретных пациентов.[224] Само воспаление, в свою очередь, будучиинициированоопределеннымистимулами,представляетсобойформирование в дыхательных путях клеточного инфильтрата с присущимему клеточным составом и цитокиновыми характеристиками.
Данноевоспаление ассоциировано с формированием свободно-радикального стресса– кислород-зависимого и азот-зависимого. В этой связи в перечне наиболееперспективных подходов, по мнению многих авторов, находятся такиеметоды, как изучение маркеров активности клеток-эффекторов воспаления,исследование цитокинового спектра, определение параметров свободнорадикального стресса. [204]Вышеперечисленные аспекты, в свою очередь, могут быть исследованыс позиций как системных, так и органоспецифических подходов. Внастоящей главе изложены результаты исследования некоторых системныхмаркеров воспаления и свободно-радикального стресса у детей с различнымуровнемконтролябронхиальнойастмынапримереизучениякислородзависимого метаболизма гранулоцитов периферической крови ипроцессов липопероксидации слюны.6.1.
Функциональная активность гранулоцитовпериферической крови при бронхиальной астме у детей.Известно, что в ходе IgE-опосредованного аллергического воспаления вдыхательных путях при атопической БА формируется лейкоцитарныйинфильтрат, в состав которого, помимо прочих клеток, входят гранулоциты:157в инициальный период нейтрофилы, сменяющиеся затем эозинофилами.
[343,381] Формирование инфильтрата происходит вслед за стимуляциеймастоцитов или иных Fcy – несущих клеток, приводящих к дестабилизациимедиаторныхсистем,повышениюхемотаксическогоградиентадлягранулоцитов, их активации и последующему проникновению в шоковыйорган. [343, 380, 340]Однимнейтрофиловизимеханизмовэозинофиловреализацииявляетсяэффекторногопродукцияпотенциалаимиметаболитовкислорода, обладающих высоким повреждающим действием. [311, 290]Степеньактивацииэтихклетокможнооценитьпосостояниюкислородзависимого метаболизма с помощью метода хемилюминесценции(ХЛ), основанного на регистрации квантов света, эмиссия которыхопределяется выраженностью респираторного взрыва. [28] При этомспонтанная хемилюминесценция (СХЛ) отражает степень возбуждениягранулоцитов в организме, а кислородзависимые резервы клетки можноопределить с помощью индуцированной хемилюминесценции (ИХЛ).Учитываядоказанноеучастиегранулоцитоввформированиивоспаления при бронхиальной астме, для понимания особенностей теченияпатологического процесса представляется целесообразным исследованиехемилюминесценции гранулоцитов периферической крови у пациентов сданным заболеванием.[364]В настоящем исследовании изучение функциональной активностигранулоцитов периферической крови хемилюминесцентным методом упациентов с бронхиальной астмой проводилось в системе разведенной крови(разведение в растворе Хенкса в соотношении 1:100).
Для уточненияпревалирующего вклада в хемилюминесценцию разведенной крови упациентов с астмой той или иной клеточной фракции проведено сравнениеинтенсивности хемилюминесценции гранулоцитов и мононуклеаров.Сравнительнаяхемилюминесценцияотдельныхкомпонентовпериферической крови при бронхиальной астме у детей.
В работах158Владимирова Ю.А. с соавторами показано, что среди компонентовпериферической крови подавляющий вклад в общую светосумму вносятклеточные элементы, а именно, лейкоциты. [28] При анализе свечениялейкоцитарной массы здоровых людей установлено, что максимальнойхемилюминесценцией обладают гранулоциты (нейтрофилы, эозинофилы,базофилы) и моноциты, в то время как ХЛ лимфоцитов ничтожно мала посравнению с другими лейкоцитами. [28] А.Н. Маянский с соавторамипродемонстрировали, что основным источником ХЛ крови являютсянейтрофилы. [100] Однако, следует учитывать, что для части пациентов с БАхарактерна эозинофилия периферической крови, при этом ХЛ эозинофиловсопоставима с ХЛ нейтрофилов и даже может превосходить ее поинтенсивности и времени свечения. [449] Е.Б.
Величковская, изучая ХЛмононуклеарной фракции периферической крови у детей с бронхиальнойастмой,показалаповышениегенерацииданнымиклеткамиАФК,коррелирующее с тяжестью процесса и зависящее от фазы заболевания. [23]Наличие определенной зависимости генерации активных форм кислородалейкоцитами периферической крови от периода бронхиальной астмыпродемонстрирована в работах Даировой Р.А. с соавторами. [48]Дляизучениясоотношенияинтенсивностихемилюминесценциигранулоцитарной и мононуклеарной фракций периферической крови прибронхиальной астме на двойном градиенте концентраций фиколл-верографинпроводилосьвыделениеизпериферическойкровимононуклеаров(лимфоциты и моноциты) и гранулоцитов (нейтрофилы и эозинофилы).Конечная концентрация гранулоцитов составляла 200 х 10 х 03 клеток в мл,мононуклеаров - 1000 х 10 х 03 клеток в мл.
В качестве стимулятора дляизучения ИХЛ использовали опсонизированный зимозан, воздействующийна СЗв-рецепторы, широко представленных на мембране как гранулоцитов,так и мононуклеаров. [84, 326]Результаты исследования ИХЛ отдельныхлейкоцитарных фракций приведены в таблице 6.1.1.159Таблица 6.1.1. Показатели индуцированной хемилюминесценции мононуклеарнойи гранулоцитарной фракций периферической крови у детей с бронхиальной астмой.Лейкоцитарная фракцияЗначения ИХЛГранулоцитыМононуклеарыПредставленные546,87±203,90T = 2,96,41,90±15,60Р = 0,0085результатыиндуцированнойХЛмононуклеарнойфракции,свидетельствуют,гранулоцитовразличиянапорядокчтоуровеньпревышаетстатистически-значимы.ИХЛДанныерезультаты согласуются с работами Владимирова Ю.В., выявившимианалогичные закономерности у здоровых доноров. [28]При морфологическом изучении состава гранулоцитарной фракциичастота выявления гранулоцитов составила не менее 94%, при этом на долюэозинофилов приходилось от 15% до 33% у различных больных.Таким образом, на основании результатов данных исследований можносделать вывод, что максимальный вклад в ИХЛ периферической крови удетей с атопической бронхиальной астмой вносит гранулоцитарная фракция,основную часть которой составляют нейтрофилы и значительную эозинофилы.
Можно полагать, что и в системе разведенной крови основнойвклад в хемилюминесцентный потенциал субстрата вносят гранулоциты, чтоучтено далее при обсуждении получаемых результатов.Функциональное состояние различных рецепторов гранулоцитов убольных бронхиальной астмой. Для уточнения преобладания путейактивации гранулоцитов у пациентов с астмой проведено исследованиефункционального состояния различных рецепторов гранулоцитов. С этойцельювкачествехемилюминесценции(преимущественноекомплемента),стимуляторовиспользованывоздействиеубитыенастафилококкивтестахиндуцированнойопсонизированныйрецепторышт.141,кзимозансубкомпонентамопсонизированныеиммуноглобулинами класса G, воздействующие на Fc-рецепторы клеток, иубитые бактериальные клетки стафилококка шт.
178. Известно, что черезрецепторы к субкомпонентам комплемента (опсонизированный зимозан) и160Fc-фрагментамиммуноглобулиновгранулоциты,несущиеданныерецепторы, распознают опсонизированные объекты и мобилизуют свойэффекторный потенциал, одним из компонентов которого является генерацияактивных форм кислорода. Кроме опсонин-зависимых контактов фагоцитывступают в прямые взаимодействия с бактериями. [107, 99] Считается, чтотакие взаимодействия основываются на лектин-углеводных контактах иреально имеют место в ситуациях in vivo.
Показано, что стимуляциялектиновых рецепторов фагоцитов in vitro также приводит к активациикислородзависимого метаболизма, т.е. "респираторному взрыву". [107, 100]Активация данных рецепторов не является специфичной для бронхиальнойастмы,номожеткосвенноотражатьвозможныепутивовлечениягранулоцитов в имеющийся процесс хронического воспаления.У 75 детей, больных бронхиальной астмой, без учета периодазаболевания были проведены исследования ИХЛ, индуцированной прямымконтактом с убитыми бактериальными клетками стафилококка шт.
178(стимуляция через лектиновые рецепторы). Воздействие на СЗв- и Fcрецепторыгранулоцитовосуществлялисоответственнообъектами,опсонизированными комплементом и иммуноглобулинами класса G.Аналогичные параметры были изучены у 21условно здоровогочеловека. Результаты исследований представлены в табл. 6.1.2.Таблица6.1.2.Индуцированнаяхемилюминесценцияпериферической крови с использованием различных стимуляторов.ГруппаИспользованные стимуляторыгранулоцитовStaf.
aureus,опсонизированныйIgGОпсонизированныйзимозанStaf.epidermidisПациенты с БА,n=75270,00±15,43286,11±15,80207,90±16,85Здоровые, n=21211,00±13,77244,00±13,60146,62±12,90t=15,8, р>0,01t=12,3, р>0,01t=15,5, р>0.01161Приведенные данные свидетельствуют, что в целом, как для здоровых,так и для пациентов с бронхиальной астмой характерен более высокийуровеньповышениякислородногометаболизмагранулоцитовпристимулировании Fc- и С3в-рецепторов клеток по сравнению с лектиновымирецепторами.
Это может отражать важные физиологические закономерностикооперацииразличныхкомпонентовиммуннойзащиты,объекты,-опсонизированные иммуноглобулином или зимозаном, вызывают большееусилениекислородногокомпонентыметаболизмабактериальныхактивироватьклеток.кислородныйгранулоцитов,Однакометаболизмичем«нативные»последниегранулоцитов.способныЭтоможетсвидетельствовать о прямом раздражающем влиянии очагов хроническойинфекциинаизменениепрооксидантногопотенциалагранулоцитов.Максимальный «хемилюминисцентный ответ» был получен при примененииопсонизированного зимозана, в связи с чем данный стимулятор был выбрандля проведения дальнейших исследований.Более наглядно особенности стимулирования кислородзависимогометаболизма через различные рецепторы у больных астмой и здоровых лицдемонстрируетсопоставлениепроцентныхсоотношенийвыборочныхсредних ХЛ, индуцированной через Fc- и лектинзависимые стимулы, к ХЛ,индуцированной через СЗв-рецепторы, взятой за 100%.Анализ средних величин ХЛ, индуцированной СЗв- и Fc-зависимымистимулами,показываетобщиезакономерностисоотношенияэтихпоказателей как у здоровых лиц, так и у детей, больных бронхиальнойастмой.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
