Диссертация (1139516), страница 28
Текст из файла (страница 28)
Carinii необходимапрофилактика и защита от воздействияКриптоспоридийприупотребленииPneumonia - загрязненной воды.--> CD402122212121Как видно из таблицы наиболее релевантными оказались основныемодуляторы воспалительных сигнальных путей. Как правило, это опосредованноToll-подобными рецепторами (TLRs) и транскрипционным фактором NF-kB [157;185]. Транскрипционный фактор NF-kB играет важную роль в регуляции целогоряда цитокинов, белков и других воспалительных медиаторов, которые играют188важную роль в элиминации патогена при пневмонии.
Так, например, онрегулирует экспрессию COX-2, центрального фермента синтеза простогландинов,который увеличивается в нижнем сегменте матки в конце беременности и началеродов[158].TLRs,всвоюочередь,активируютсябактериальнымиинфекционными триггерами, которые в большинстве случаев связаны своспалением [186].Относительно пневмонии новорожденных нами были выбраны следующиемаркеры: TLR2, TLR4, HBD-1, HBD-2, NF-kB и TNFα, которые впоследствии былиизучены с точки зрения экспрессионного профиля. Поскольку эффект активацииэтих рецепторов осуществлялся через транскрипционный фактор NF-kB, то егоэкспрессионный профиль также был интересен в работе.Помимо прочего были выбраны дефенсины, которые играют значительнуюроль (как видно из Рисунка 33 и Таблицы 27) – как в качетве лигандов, так и вкачестве эффекторной молекулы.
Вероятно, они осуществляют дополнительнуюположительную регуляцию врожденного иммунитета на уровне слизистыхоболочек.189Таблица 27Роль дефенсинов в регуляции врожденного иммунитетаРольТипDEFB1--+>immunoglobulinРегуляцияDEFB1 --- voltagesensitivesodiumchannelcomplexПривязкаTNF --+>DEFB1ЭкспрессияЭкспрессияСмыслНеспецифический иммуноглобулинсвязываетсяпутемблокировкиинкубации слайдов в течение 10 минс 3% козьей сывороткой в Трисфосфатном буфере в течение 20 минпереднанесениемпервичныхантител, т. е.
anti-hBD-1 и anti-hBD-2(BioLogo, Kronshagen, Germany).16431059:1051Этот токсин содержит 4 дефенсинподобный пептид, чья третичнаяструктуранапоминаетбычийнейтрофилдефенсин-1,инейротоксические актинии пептида(Sh1), что связывается с напряжениемтока в отстробированные каналынатрия.11790538:1115В отличие от hBD-1 мРНК, hBD-2экспрессии мРНК был дополнен ЛПСи TNF.11641058:1091ЭкспрессияhBD-1былаотрегулированаTNFприконцентрации 100, 150 и 200 мг/мл вздоровой группе.TNF --+>DEFB124370191:1058ЭкспрессияTNF --+>DEFB1В отличие от hBD-1, в нормальныхкератиноцитах значительно лучшеэкспрессируетсяhBD-2ирегулируется стимуляция TNF инекоторых видов бактерий10465335:1067ЭкспрессияTNF --+>DEFB1MedLineссылкаЭкспрессия дефенсина 1 у собакможет также активируется TNF,посколькузначительноболее 19576634:1123190высокийуровеньэтогопровоспалительного цитокина былинайдены в повреждениях кожи собакс атопическим дерматитом.ЭкспрессияTNF --+>DEFB1ЭкспрессияTNF --+>DEFB1DEFB103B--->DEFB1ЭкспрессияDEFB103B--->DEFB1ЭкспрессияDEFB1 -->DEFB103Недавнее исследование показало, чтобактериально-индуцированнойдефенсин(лингвальныйантимикробный пептид, DEFB1 иDEFB4) экспресирован в пупочнуювену эндотелиальных клеток быковрегулируется аутокринной продукциицитокина, фактора некроза опухоли-α(TNF-α).24220329:10177В отличие от конститутивнойэкспрессии hBD-1, hBD-2 и hBD-3индуцированные интерлейкином-1,фактор некроза опухоли-α, гаммаинтерферон вызывает бактериальноеили грибковое поражение (9, 10, 11).hBD-3 является наиболее мощнымдефенсином на сегодняшний день,таккаконубиваетГрамотрицательныеиГрамположительныебактерии,вирусы и грибы.
hBD-1 и hBD-2являютсяменееактивнымипептидамиипреимущественноактивнывотношенииграмотрицательныхбактерийидрожжей.17074797:1050СтимуляцияHBD-3усиливаетэкспрессию hBD-1.21280982:5Живая T. denticola существенноподавила экспрессию HBD-3, и такжеподавила экспрессию β-дефенсина-1и HBD-2.19995893:2Усиление активности DEFB1 влияетнаэкспрессиюhBD-3,когдаприсутствует - 44G аллель (rs1800972 20100591:1021191или 668).BЭкспрессияDEFB1 -->DEFB103BЭкспрессияDEFB1 -->DEFB103BЭкспрессияDEFB1 -+>HSPB1РегуляцияIL1B --->DEFB1ЭкспрессияВ этой системе, hBD-1 усиливаетэкспрессию hBD-3, в то время какHBD-2 снижает в начале экспрессиюhBD-3. Экспрессия гена hBD-1существенносокращаетсявплеоморфных аденомах слюнныхжелезах. Предполагается, что hBD-1можетбытьпотенциальнымсупрессором опухолей.25794853:1163Человеческийбета-дефенсин-1стимулирует и усиливает бетадефенсин-3, а HBD-2 стимулирует иуменьшает эспрессию человеческогобета-дефенсина-3.100780843:1070DEFB1 сигнализирует через TLR4 наRAC1 и оттуда в MAPKs, в конечномитоге активируется HSP27.24457104:1163Интересно, что индукция экспрессиигена hBD1 на IL-1наблюдалсятолько в MKN7 клетках.12171956:9hBD-1 и hBD-3 экспрессируется в этидве клетки и регулируется вниз IL-1 иусиливает экспрессию hBD-2.IL1B --->DEFB1ЭкспрессияIL1B --->DEFB1ЭкспрессияIL1B --->DEFB123726315:8IL1 стимулирует и активируетдифенсин - 1 и 3 у птиц, в то времякак стимуляция IL6 не вызываетизменений экспрессии дефенсинов уптиц.23625580:10HBD1 сообщает РНК об экспрессии впервичном амнионе эпителиальныхклеток и IL-1 слегка активируютсяпри лечении, хотя это было лишьнезначительным и не может бытьбиологически значимыми.17346544:1093192ЭкспрессияIL1B --->DEFB1ЭкспрессияIL1B --->DEFB1ЭкспрессияDEFB1 --| TLR2РегуляцияDEFB1 -- Экспрессия-> TLR4DEFB1 --> TLR4Наши результаты согласуются с теми,что сообщил McDermott et al.,который показал, что выражениеhBD2 в человеческих эпителиальныхклетках роговицы глаз, вряд ли hBD1иhBD3,стимулируетпровоспалительные цитокины, такиекак IL-1beta, действуя через митогенактивируемыепротеинкиназыиядерный фактор –kappa B.16242370:1145В отличие от конститутивнойэкспрессии hBD-1, hBD-2 и hBD-3индуцированные IL-1, TNF-α, или γинтерферонэкспресируютсябактериями или грибами родаCandida.
hBD-3 является наиболеемощным дефенсином на сегодняшнийдень,таккаконубиваетграмотрицательныеиграмположительныебактерии,вирусы и грибы. hBD-1 и hBD-2являютсяменееактивнымипептидамиипреимущественноактивнывотношенииграмотрицательныхбактерийидрожжей.17074797:1050Экспрессия генов может бытьснижена путем блокирования TLR2 иTLR4 в человеческих кератиноцитах,индуцированных β-дифенсином 1 иIL-8 при акне.22516809:1099Например, мышиные дефенсины 1непосредственностимулировалиTLR4 экспрессироваться в незрелыхDCs и привести к созреванию этихклеток.19042032:1019Экспрессия генов может бытьснижена путем блокирования TLR2 и 22516809:1099193ЭкспрессияLPS --+>DEFB1ЭкспрессияLPS --+>DEFB1ЭкспрессияTLR4 в человеческих кератиноцитах,индуцированных β-дифенсином 1 иIL-8 при акне.Сдругойстороны,никакогоочевидногоизменениябетадефенсина1пристимуляцииэкпрессиилипополисахариданенаблюдалось.11793193:7Внутрипротоковаяинъекциялипополисахаридаповышаетэкспрессию дефенсинов-1 и -2 2mRNA у крысы, которая достигламаксимума за 12 часов.25212559:4Стимуляция S.
aureus или ЛПС индуцированнойэкспрессиилингвальныхантимикробныхпептидовов у коров дефенсина 1(DEFB1)идефенсина4унейтрофилов коров.LPS --+>DEFB1ЭкспрессияLPS --+>DEFB1Экспрессия23298865:2ЛПС-индуцированнаяэкспрессияhBD1mRNAзаблокированаRVFHb2P.21865417:10262В отличие от hBD-1 mRNA, hBD-2 2экспрессия mRNA была дополненаЛПС и TNF.LPS --+>DEFB1Экспрессия11641058:1091LPS --+>DEFB1ЭкспрессияЧеловеческий β дефинсин 1-3 уровняэкспрессииmRNAзначительноповышенны в кровив ЛПСPorphyromonas gingivalis.20730446:10126LPS --+>DEFB1ЭкспрессияLPS --+>Кроме того, экспрессиядефенсин-1, -2 и -3 ввлагалище был усиленSalmonella enteritidis.Различные исследованияптичьегокуриномЛПС и19046776:1139показали, 20828865:1140194что экспрессия hBD-1 может бытьрегулируетсяЛПС,термическиинактивированныхPseudomonasaeruginosa, а также IFN-γ.DEFB1ЭкспрессияLPS --+>ЭкспрессияDEFB1IFNG -- Экспрессия+>DEFB1IFNG -+>ЭкспрессияDEFB1IFNG -+>DEFB1ЭкспрессияIFNG -+>DEFB1ЭкспрессияIFNG -+>DEFB1ЭкспрессияDEFB1 -- Регуляция+> IL6PseudomonasиPseudomonaslipopolysaccharidesмогутиндуцировать экспрессию у крысдефенсина-1 (также называемыйтрахеальный антимикробный пептид)mRNAвкультивируемыхэпителиальныхклеткахтрахеикрупного рогатого скота.12533413:1211В отличие от конститутивныхуровнейэкспрессии,IFNγиндуцированные кератиноциты hBD1и hBD3 экспрессия mRNA былзначительно выше в клетках с общимгенотипом СС, но нет четкойкорреляции генотипа с экспрессиейhBD2.19712472:8IFN- косвенно регулирует экспрессиюдефенсин-1 у мышей при инфекции вестественных условиях.15102787:1156HBD1 является конститутивным вразличных тканях и может бытьмодулированы ЛПС Pseudomonasaeruginosa γ - interferon.22250708:10072hBD-1 обнаруживается в моноцитах,зрелые MDDC, и PDC и может бытьрегулируемым в моноцитах на IFN-γи/или LPS [8 -10].21551252:10025Различные исследования показали,что экспрессия hBD-1 может бытьрегулируетсяЛПС,термическиинактивированныхPseudomonasaeruginosa и IFN-γ.20828865:1140Индукция IL-6 и IL-10 на hBD-1была также очевидна, но в меньшей 16569862:1141195степени, чем наблюдалось в ответ наhBD-2.РегуляцияDEFB1 -+> IL6Экспрессии hBD1, hBD2, hBD3 иCAP18 mRNA у человека в десневыхэпителиальных клетках, стимулируетIL-1, IL-6, IL-8 и TNF-γ.16926414:1176РегуляцияDEFB1 -+>CXCL8Экспрессия hBD1, hBD2, hBD3 иCAP18 mRNA у человека в десневыхэпителиальных клетках, стимулируетIL-1, IL-6, IL-8 и TNF-γ.16926414:1176РегуляцияDEFB1 -+>CXCL8Кроме того, было понятно, что hBD-2усиливаетмоноцитарныйхемоаттрактантный протеин 1 (МСР1) и умеренно регулируется MIP-1.hBD-2такжеиндуцироваливыработку RANTES, IL-1, ENA-78 иGRO.
hBD-1 регулируется илииндуцируется IL-8, MIP-1 и MCP-1 атакже низкий уровень IGFBP-3 иEGF.16569862:1140РегуляцияDEFB1 -+> IL10DEFB1 -- Регуляция+> IL10farnesol -+>DEFB1Экспрессияexotoxin --| DEFB1 ЭкспрессияHBD1 индуцировалась существенновыше (р < 0,05) овальбуминспецифических сывороточных IgG,выше,нонезначительно,сывороточного IgM, и достоверновыше (р < 0,05) IL -10.12654098:8Индукция IL-6 и IL-10 на hBD-1 былтакже очевидна, но в меньшейстепени, чем наблюдалось в ответ наhBD-2.16569862:1141Это исследование подтверждает, чтофарнезол способствует производствуэпителиальными клетками hBD1 иhBD2.19121950:1190Например, экзотоксины V.
cholerae иэнтеротоксигены E. coli, имеют, каксообщается,низкуюрегуляцию 25936225:1157196экспрессии кателицидина человека ибета-дефенсина-1 in vitro.exotoxin --| DEFB1 Экспрессияexotoxin --| DEFB1 Экспрессияexotoxin --| DEFB1 Экспрессияstaphylococcalenterotoxin B ---|DEFB1ЭкспрессияDEFB1 -+> TLR4 ЭкспрессияDEFB1 -+> TLR4 ЭкспрессияНаблюдаетсянизкаярегуляциябактериальныхэкзотоксиновкателицидина (протокол hCAP-18/LL37) и экспрессию бета-дефенсин 1 вэпителиоцитах кишечника человека.18717821:100Наблюдаетсянизкаярегуляциябактериальныхэкзотоксиновкателицидина (протокол hCAP-18/LL37) и экспрессию бета-дефенсин 1 вэпителиоцитах кишечника человека.24006470:22320Наблюдаетсянизкаярегуляциябактериальныхэкзотоксиновкателицидина (протокол hCAP-18/LL37) и экспрессию бета-дефенсин 1 вэпителиоцитах кишечника человека.23968350:10265Повышениеконцентрациистафилококкового энтеротоксина Bприводит к низкой регуляции DEFA5,DEFA6 и DEFB1 mRNA в доззависимом образе, но одновременноувеличилась регуляция DEFB2.19386083:5Например, β-дефенсины 1 у мышейнепосредственностимулировалиTLR4 экспрессированные в незрелыхDCs и привели к созреванию этихклеток.100768025:1019Экспрессия генов может бытьснижена путем блокировки TLR2 иTLR4 в человеческих кератиноцитах,индуцированных β-дифенсином 1 иIL-8 при акне.101694425:1099197Как видно из таблицы, TLR4, TLR2 и TNFα имели прочную ассоциацию сразвитием пневмонии.В целом можно отметить, что используемый нами биоинформационныйподход позволили определить круг наиболее значимых сигнальных каскадов,которые активируются при пневмонии новорожденных.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
