Диссертация (1139516), страница 26
Текст из файла (страница 26)
Не выявленоштаммов K. pneumoniae устойчивых к монобактамам.Штаммы E. coli проявляли наибольшую устойчивость к пенициллинам –40,2%; фторхинолонам – 36,6%; аминогликозидам – 32,2%; цефалоспоринам 3-гопоколения – 29,8%. Почти отсутствует устойчивость к макролидам – 1,2%.Не выявлено штаммов E. coli, устойчивых монобактамам и цефалоспоринам2-го поколения.Штаммы A. baumannii были устойчивык фторхинолонам – 62,8%;аминогликозидам – 58,3%; пенициллинам – 45,3%; цефалоспоринам 3-гопоколения – 49,7%; цефалоспоринам 4-го поколения – 39,8%. Практически неотмечается резистентности к амоксиклаву – 1,2%.НеобходимоотметитьзначительнуюустойчивостьP.aeruginosaкфторхинолонам в 56% случаев; аминогликозидам – в 43,2%; цефалоспоринам 3-гопоколения – в 39%; карбапенемам – в 32%; цефалоспоринам 4-го поколения –26,2%.Отсутствует резистентностьвыделенных штаммов P. aeruginosaкмакролидам и амоксиклаву.Между заболеваемостью новорожденных неонатальными пневмониями ирезистентностьюкантибактериальнымпрепаратамимеетсяумереннаяположительная связь (rxy=0,23; p < 0,05), что свидетельствует о возможностиформирования в ОРИТН «госпитальных» штаммов, которые и вызывают данныеинфекционные осложнения.Полученные нами данные позволяют рекомендовать для проведенияэтиотропной терапии цефалососпорины 2-го поколения, или карбапинемы в видемонотерапии.
В более тяжелых ситуациях можно рекомендовать комбинациимакролидов с монобактамами и амоксиклавом.173Таким образом, по результатам исследования можно сделать заключение обиспользовании антибактериальных препаратов для проведения этиотропнойтерапии. Повышению уровня резистентности АБП в ОРИТН родильного домаРКБ послужили такие факторы, как планирование антибактериальной терапии безучетарегиональныхтенденцийрезистентностивозбудителей,неправильный выбор препарата и необоснованная продолжительность.атакже174ГЛАВА 7. КОМПЛЕКСНЫЙ АНАЛИЗ ИЗМЕНЕНИЙ ЭКСПРЕССИОННЫХПОКАЗАТЕЛЕЙ ВРОЖДЕННОГО ИММУНИТЕТА СЛИЗИСТЫХ ОБОЛОЧЕКРЕСПИРАТОРНОГО ТРАКТА У НОВОРОЖДЕННЫХ С ВУП И РНППредрасположенность новорожденных к возникновению инфекционныхосложнений может быть обусловлена не только особенностями госпитальныхштаммов микроорганизмов, но и состоянием иммунной системы новорожденныхдетей.В соответствие с принципом регионализации, с учетом различнойоснащенности лечебных учреждений и в связи с появлением новых методовдиагностики и терапии (антибактериальной, респираторной и др.), мы оцениливозможность использованиятех или иных признаков для диагностикипневмонии.В неонатальном периоде приобретенный компонент иммунной системыхарактеризуется значительной незрелостью, в связи, с чем у новорожденныхдетей, в частности у недоношенных, отсутствует иммунологическая память иснижена способность к формированию специфических антител к патогенам [8].Поэтому защита от инфекции в этот период зависит главным образом отврожденного иммунитета.Большое значение в распознавании патогенов имеют факторы врожденногоиммунитета (Toll-подобные рецепторы, цитокины, противомикробные пептиды)[23],которыераспознаютконсервативныеобластивышеперечисленныхмикроорганизмов.
Для успешной борьбы с пневмониями новорожденныхтребуетсязнаниенетолькоклинико-микробиологических,ноииммунологических особенностей данной патологии. В связи с этим одной иззадач данной работы являлось изучение микробиоты и факторов врожденногоиммунитета (TLR2, TLR4, HBD-1, HBD-2, TNFα и NF-kB) на уровне слизистыхоболочек верхних дыхательных путей при внутриутробном инфицировании плодаи развития ранней неонатальной пневмонии.175Намипроведеноизучениемикрофлорыифакторовврожденногоиммунитета (TLR2, TLR4, HBD-1, HBD-2, TNFα и NF-kB) на уровне слизистыхоболочек верхних дыхательных путей при внутриутробном инфицировании плодаи пневмонии новорожденных.Слизистыеоболочкиреспираторноготрактапредставляютсобойестественный физиологический барьер. Эпителиальная ткань в первую очередьконтактирует с окружающей средой, реагирует на патогены и «включает»механизмы врожденного иммунитета.
Особое значение врожденный мукозальныйиммунитет имеет у новорожденных [85].Известно, что в последние годы одной из главных социальных проблемявляется пневмония новорожденных [17]. Так, для понимания патогенезапневмонии новорожденных требуется знание не только клинических имикробиологических, но также иммунологических особенностей исследуемойпатологии. Причем иммунные нарушения, которые приводят к распространениюинфекции, могут определяться как у новорожденного, так и у матери.Как уже неоднократно упоминалось: большое значение в распознаваниипатогенов имеют факторы врожденного иммунитета (Toll-подобные рецепторы,цитокины, противомикробные пептиды и др.) [23]. Известно, что механизмыврожденного иммунитета запускаются после распознавания патогенов Tollподобными рецепторами. Установлено, что уровень экспрессии мРНК TLRварьирует на протяжении респираторного тракта [22].
Активация TLRs приводитк продукции эффекторных факторов эпителиальными клетками. Среди такихэффекторныхмолекулвыделяютпровоспалительныецитокины,противомикробные пептиды, молекулы адгезии, белки острой фазы и др.В данном разделе будет проведена сравнительная оценка роли ключевыхкомпонентовврожденногоиммунитета:TLRs,сигнальныхмолекулиэффекторных молекул (противомикробных пептидов, цитокинов) в слизистыхоболочкахреспираторногоноворожденных с ВУП и РНП.трактауздоровыхноворожденныхдетей,176На первом этапе будут представлены данные по биоинформационномуанализу,которыйпозволитвыявитьнекоторыефакторыврожденногоиммунитета, которые потенциально могут играть значительную роль в патогенезепневмонии новорожденных.
Далее, на основании анализа будут выбранынесколько показателей и проведена оценка их экспрессии в эпителиальныхклеткахверхнихноворожденныхдыхательныхспутейвнутриутробнойуздоровыхпневмониейиноворожденных,раннейунеонатальнойпневмонией, а также показана роль патогена в изменении экспрессионногопрофиля факторов врожденного иммунитета.7.1. Биоинформационный анализ молекулярно-генетическихпроцессов при неонатальных пневмонияхПониманиепричинпневмонииноворожденныхявляетсясложнойисследовательской проблемой, поскольку факторы риска и патофизиологическиепути заболевания сложны и до сих пор плохо изучены. Не существует единойтеории развития пневмонии.
Есть много «патологических» путей, которые могутпривести к внутриутробной инфекции и/или к развитию РНП.Принято считать, что внутриутробная инфекция и/или инфекция скоторыми «сталкивается» новорожденный после родов в более чем половинеслучаев приводит к развитию патологии, в большом проценте случаев - кпневмонии [144; 185]. Микробные инвазии амниотической полости, активируютрецепторыраспознаванияпаттернов,которыеиндуцируютвыработкупровоспалительных медиаторов, приводящих не только к преждевременнымродам, но и к инфицированию плода [157].
К тому же хроническое воздействие наплод этих медиаторов воспаления может привести к синдрому воспалительнойреакции плода и поставить под угрозу здоровье и развитие новорожденных [158;187].Имеющиеся данные свидетельствуют о том, что степень бактериальнойколонизации, пути заражения и стимулирующая способность бактерий играют177ключевую роль в активации провоспалительных сигнальных каскадов у матери иплода.Некоторыесигнальныекаскадыиндуцируютвыработкупровоспалительных цитокинов (например, IL-1, TNF-α и др.) и хемокинов(например, ИЛ-8, МСР-1 и др.), которые, в свою очередь, способствуют наработкепростагландинов (PG), сократимости миометрия, созреванию шейки матки, идеградации мембраны плода, что приводит к преждевременным родам [147].Нами было показано, что 181 ген имеет отношение к пневмонии, и все онивовлечены в активацию иммунной системы и воспалительный ответ. Мы такжепровели сепарацию генов по количеству библиографических источников ирассматривали в дальнейшей работе только те гены, количество работ,посвященных которым, было более двух.
Проанализировав список генов,имеющих отношение к пневмонии новорожденных, мы выделили наиболеерелевантные рецепторы распознавания паттернов, как мембранные, так ицитоплазматические и другие молекулы. При анализе использовали данныепредставленные в базе данных ResNet (Ariadne ® Expression Targets Pathways).Наиболее релевантными оказались основные модуляторы воспалительныхсигнальных путей, которые активируются бактериальными инфекционнымитриггерами - Toll-подобные рецепторы (TLRs) и др.
[213; 179]. Сигнальный путьрецепторов распознавания паттернов при пневмонии новорожденных показан наРисунке 29.178Рис. 32Сигнальный путь рецепторов распознавания паттернов припневмонии новорожденныхУсловные обозначения:На следующем этапе был проведен анализ обогащения по имеющимсякартам канонических сигнальных путей (pathway enrichment analysis), в результатекоторого были определены сигнальные пути, регулируемые различнымигормонами, цитокинами и пептидными лигандами, в которых эти гены были179представлены. Из полученных данных были отобраны сигнальные и регуляторныемеханизмы с наибольшим представительством генов.
Данные отображены вТаблице 26.Таблица 26Результаты анализа обогащения по картам канонических сигнальных путейдля наиболее релевантных картАссоциацияСмысл (текст)В результате генетических исследованийобнаружена связь между полиморфизмомTLR4 A299G и риском развития пневмонии.РасхождениеполиморфизмовTLR4Asp299Gly и Thr399 Ile было независимо отPneumonia - факторов риска развития сепсиса и пневмонии.--> TLR4Дефицит TLR2 уменьшает воспаление легкихи последствий поражения легочной ткани.На модели мышей с пневмонией вызваннойP.aeruginosa, дефицит TLR2 улучшаетвыживаемостьпутемэффективнойантибактериальной терапии и восстановлениябаланса провоспалительных цитокинов вPneumonia - легких.--> TLR2МутациигенаNOD2 сопровождаютсяпоследующимснижениемраспознаваниямурамилпептидов, связано это с хроническимвоспалениемкишечникаилегочнымиосложнениями у пациентов с аллогеннойтрансплантациействоловыхклетокиPneumonia - сепсисом.--> NOD2Дефицит и удаление гена CCR1 у мышейпрепятствовалвоспалению легких ивторичного острого панкреатита.Pneumonia --> CCR1Дефицит гена IL-17A приводит к сокращениюсниженияантиген-специфическогоТPneumonia - клеточного иммунного ответа, в том числе--> IL17A аллерген-индуцированноговоспаленияConnectivityКол-воссылок218210232326180дыхательных путей вызванных Chlamydiapneumonia.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
