Диссертация (1139480), страница 31
Текст из файла (страница 31)
Ядерная метка Р53 визуализироваласьпреимущественно в клетках пролиферативной зоны многослойного плоскогоэпителия десны (28,71±5,2 меченых клеток в 1 мм2 среза).В биоптатах слизистой оболочки десны у больных с «умереннопрогрессирующим» течением пародонтита достоверно реже, чем у больных с«агрессивным»течением,отмечалосьналичиевыраженной,ачащевстречалась умеренная и даже слабой степени воспалительная инфильтрация.Хотябылиотмеченыбиоптатысвыраженнойинфильтрациейнейтрофильными лейкоцитами, биоптаты слизистой оболочки десны больныхданной группы характеризовались меньшим количеством на 1 мм2 среза посравнениюсбиоптатамибольныхс«агрессивным»течениемиммунокомпетентных клеток с фенотипом CD8+, CD4+, CD45RO+, CD20+ имежэпителиальных лимфоцитов, кроме CD68 позитивных макрофагов(41,98±9,58; 83,74±9,88; 34,0±3,87; 44,25±8,28; p<0,05; 41,28±5,22; p>0,05 дляCD68 – соответственно) Отмечается статистически значимо меньшееколичество клеток воспалительного инфильтрата на 1 мм2 среза с меткой Ki67,по сравнению с предыдущей группой (8,48±2,65; p<0,05).
Уровень экспрессиии распределение маркера пролиферации Ki-67 и метки Р53 (30,27±4,2 и27,26±6,1 – соответственно) в клетках многослойного плоского эпителия неотличалисьотаналогичныхпоказателейвбиоптатахбольныхс«агрессивным» течением пародонтита.Для больных с «медленно прогрессирующим» течением пародонтита вбольшинстве случаев в биоптатах слизистой оболочки десны встречалисьлимфо-макрофагальные воспалительные инфильтраты обычно слабой степенив сочетании с умеренной и слабой инфильтрацией нейтрофильнымилейкоцитами эпителиального компартмента слизистой оболочки десны. Вбиоптатах больных данной группы в 1 мм2 среза было наименьшее количество233иммунокомпетентных клеток с фенотипом CD8+, CD4+, CD45RO+, CD20+,CD68+ и межэпителиальных лимфоцитов, по сравнению с предыдущимигруппами (25,51±6,23; 42,36±9,11; 19,6±3,29; 26,43±7,14; 29,12±3,61 –соответственно; p<0,05).
[28, 128, 358, 477].При иммуногистохимическом исследовании клеточного обновления вбиоптатах больных с «медленно прогрессирующим» течением пародонтита в1 мм2 среза установлен самый низкий уровень экспрессии Ki67 (4,51±1,94;p<0,05) в клетках воспалительного инфильтрата в собственной пластинкеслизистой оболочки десны. Уровень экспрессии и распределение маркерапролиферации Ki-67 и метки Р53 (28,65±3,4 и 27,01±4,8 - соответственно) вклетках многослойного плоского эпителия не отличались от аналогичныхпоказателейвбиоптатахбольныхс«агрессивным»и«умереннопрогрессирующим» течением пародонтита.При оценке распределения субтипов Т-клеток в слизистой оболочкедесны в биоптатах всех пациентов установлено, что CD4-позитивные Т-клеткилокализовались преимущественно в очагах скопления лимфоцитов, особеннона границе эпителия и собственной пластинки слизистой оболочки десны.CD8 позитивные лимфоциты располагались интраэпителиально, ихлокализация совпадала с участками деструкции эпителиального пласта, CD8лимфоцитов было много и среди клеток воспалительного инфильтратасобственной пластинке слизистой оболочки десны.CD45RO Т лимфоциты локализовались в эпителиальном компартментедесны и среди клеток воспалительного инфильтрата субэпителиально.На фоне диффузного распределения CD20 позитивных лимфоцитов вплотноммононуклеарномвоспалительноминфильтратеопределялисьскопления CD20 позитивных клеток в виде лимфоидных фолликуловпреимущественновбиоптатахбольныхс«агрессивным»течениемпародонтита.Общеизвестным фактом является то, что основой патологическихизменений при пародонтите является воспалительный клеточный инфильтрат234в слизистой оболочке десны.
В литературе имеются данные о наличии двухгрупп воспалительных инфильтратов, по мнению авторов различающихся взависимости от активности воспалительного процесса, при не очень высокойактивности преобладают малые лимфоциты, при чем малые лимфоциты могутоказаться и Т-клонами и В-клонами ввиду сложности при оценкегистологических препаратов, а при возрастании активности процесса объембольшая часть популяции В-клеток преобразуется в плазматические клетки иавторы отмечают низкую плотность нейтрофильных лейкоцитов в данномтипе инфильтратов по сравнению с инфильтратами, содержащими небольшоеколичество плазматических клеток [290]. Так же есть сведения, чтодесятикратное возрастание содержания в инфильтратах плазматическихклеток авторы расценивали как характерную особенность прогрессированияпародонтита [96].
При этом крайне мало данных о наличии лимфоидныхфолликулов в тканях десны при воспалительных изменениях в сравнении сдостаточным количеством данных о формировании лимфоидных фолликуловв слизистых оболочках других органов при хронических воспалительныхпроцессах [28]. Результаты нашего исследования полностью согласуются сданными исследования, в котором авторы считают такие различиячисленностиплазмоцитоввлейкоцитарныхинфильтратахнепоследовательными стадиями развития или инволюции инфильтратов, аразными по выраженности проявлениями воспалительного процесса в тканяхдесны. Так при агрессивных ювенильных процессах в пародонте болееполовины клеток в инфильтратах – плазмоциты, многие авторы считают, чтоплазмоклеточные инфильтраты высокой плотности свидетельствует оневозможности полноценно элиминировать бактерии, о предрасположенностик более тяжелому течению процесса и выраженной деструкции кости [188,438, 451, 452].
Известно, что классические лимфоидные фолликулы имеюткруглую форму и светлые центры, но слизистая оболочка десны имеетнезначительный объем и, вероятно, происходит образование структурвытянутой или неправильной формы из-за деформации в следствие отсутствия235подслизистойосновы,ограничениякостнымиобразованиями,склеротическими процессами в десне в результате чередующихся обостренийи ремиссии процесса воспаления.
В нашем исследовании в слизистой оболочкедесны мы определили такие образования как структуры напоминающиелимфоидные фолликулы и отметили, что они явились характернойособенностью в биоптатах больных с «агрессивным» течением пародонтита.Показано, что стимуляция В-клеточного звена у больных пародонтитомсопровождается накоплением плазматических клеток, но не возникаетэффективного гуморального ответа, хотя происходит активный синтезпровоспалительных цитокинов IL-1β и одновременно усиленный синтез IL-4.В эксперименте на культуре ткани наблюдали одновременно повышенныйсинтез IL-1β, IL-2 и IL-4 десневыми мононуклеарными клетками поддействием мембранного белка от Porphyromonas gingivalis [11, 156, 389, 430,458].Также в собственной пластинке слизистой оболочки десны биоптатоввсехгруппобнаруживалось большое количествоCD68позитивныхмононуклеарных фагоцитов, которые являются одним из главных источниковцитокинов.
[284, 405].Обнаружено достаточно большое количество эпителиоцитов с меткойР53, что свидетельствует об интенсивном повреждении ДНК клетокпародонтопатогенами. Отмеченный во всех биоптатах высокий уровеньпролиферации (метка Ki-67) в эпителиальном компартменте слизистойоболочки десны, вероятно, обусловлен синтезом клетками воспалительногоинфильтрата собственной пластинки слизистой оболочки десны широкогоспектра провоспалительных цитокинов, которые обладают пролиферативнойактивностью в отношении эпителиоцитов [58, 74, 129]. Экспрессия Ki-67выявляласьвклеткахвоспалительногоинфильтрата,хотяточноидентифицировать пролиферирующие клетки мононуклеарного инфильтратав собственной пластинке слизистой оболочки десны невозможно, поскольку в236гистологических препаратах моноцит, лимфоцит и молодой фибробласт почтиидентичны [23, 28].Таким образом реактивные изменения в тканях пародонта можносчитать стереотипными, но при этом отмечаются некоторые особенности какв количестве иммунокомпетентных клеток так и в формировании структур,напоминающихлимфоидныефолликулы,характерныедлялицснеодинаковыми клиническими проявлениями болезни.
Поскольку мыпредположили, что характер воспалительного ответа может определятьсясовместным носительством высоко- и/или низко-продуцирующих вариантовгенов воспалительных цитокинов, нами была изучена и проанализированаассоциация структурных изменений в слизистой оболочке десны больныххроническим пародонтитом с полиморфизмом генов воспалительныхцитокинов.Анализ ассоциации структурных изменений в слизистой оболочке десныбольных пародонтитом с полиморфизмом генов воспалительных цитокиновпозволил выявить следующие закономерности: у носителей генотипа С/С генаИЛ-1β (С -511 Т) отмечалось наличие воспалительного инфильтрата слабойстепени (в 50% случаев по степени инфильтрации мононуклеарными клеткамии в 59% случаев по степени инфильтрации нейтрофильными лейкоцитами(2=12,125; p<0,002 и (2=28,685; p<0,0001 - соответственно)).
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
