В. Эллиот, Д. Эллиот - Биохимия и молекулярная биология (1128701), страница 30
Текст из файла (страница 30)
г(ОТР и йТТР обеспечивает копирование фрагл1енга ДНК. Один из трифосфатов (или праймер);нзлжен бып, радиоактивным, так по все новые ДНК оказываются меленькими При проведении секвенирования регнакгщилги являются два момента. первый свяжи с испольюваннсм злектрофорегическог о ми ода разделения молекул ДНК, которые в нгекгрическом поле двиг акиса вдоль пласти- (помнгие. чп ! моль любгно химическгпо вешесгва солержггг астрономическое число 6,()3 10з' молекул). предположим. что для копирования мы располагаем всел1и четырьмя г(Хара и небольшим количеством одно~о дилсзокси)ч !Р; двя примера возьмем лилезоксиеб( Р (А) Количешна завершенных цспси доспцочно для !огО, сгоны с иомошью злскт)ъофорезгг выявить их на геле в вилс отдельных полос.
Рост цепей булет прололжаться дг> гсх цор, пока к ним нс будет добавлен аи отсугшвие ЗчОН-труппы лелле~ невоткпзжным присослинепне следуюпвн о нуклеот ила. Как все это интерпретировать в виде пдсяпг)дгзват!хпззнгзоти (зснгзеаний'~ 53. Е' кзсс1энэзкссп кпннэа '~Щ' 3333ннзнсзннсзссззмаЛ 33333нэ33 'пнаэ эннссясзйиссзс зз у.
~ с!а!33! к3333еаос)!!ноя и киссеаосзиниес)33 ВЕСНЛес) 333эизосЛззэ!.э кинэгазэепнЛэо кгг счэсснеаэс)за!3 кэзоскгэгсес) 'книна -Ос)Ином э!из;я!ос)п а эсч«неаосас)ссо 'х)) ц;с 3Ч:а!»кпЛг ее;О -ииэ в!ос!си осогжвм энном ц (~ ь, эис)) а!33)эжиес)п хим -ээьисэзниэ счэннааоечаопэи э зи;зньзэ 333 !пиес)33!Ма сос -Лс)сизом и Еяэ3333еаэс)3вн зоскссэгЕЫ ~)ц~7 еэмэк33Лг ипэц .Ожж ис х)ц)сснэзниэ 333)н и!час)энссес)33 ЕЛГЛо ЕчгизоэгчЛН -Ознно !!за 'Лзн;знз'33 и!333вмифсскссне асяс ЛНОннес)Осча м Л! эпссх333мсчнзсс)33 ')) ц); счиляэкож нэнэи х Ла! ! и ионго Лм -.сэеьЛ нэс)аз!за!хо!инчон хсчс)о!с!я п! Ецчгжем 'вгссзоэгяЛН -озико еаг аз!снос)исэ33333э и ))ц)с эен Есэ333ОЕЛээс)э!3!и чзэончссэзяаосенсэоп ЕМЛН3333сссэ!"МЛ33 чззни Онисохооэн ц) )ц ксссзэгэасх)33 к33)3'33эсзск!.33 и зэсзйсз егосэж п3333Н333)ц (я!!за!Ем хийчиомен3н е и Оз3эа) "ц))7 В!э !Ни!сом ХЗЧсжж 33ижОП ИН СНП ОЗВЗПОП сЦ Ц ) КННЭГЭВОС)П К!317 ИНП -ом озэ егэиь о!осси!30.333 есэзннэ нэзЛН )))Ц3' ЕчгЛменл3н з и зжзээ *!Занос)33ссифссс псче сэксзсзасоп внц хц )); э Еч ссзоес) Вогозэж хсчссдксЛпоп ээкоонен ! и жинго счгоз:Еингэа -эоп а кэзнаонесэ 3,)) ц)] к33нмеэс) кенпэи кеЕЗЕ333)эсчиксоц з)вч3з 80ЛНЭ)333.)80 ии)) в)) ифи)еи)я) в ыи~1 (д~ц) ии)1)ееаб Фраглкснт, выбранный для алаглификацин Даухцелочечная ЛНК Ираймирование Копирование ! Нагрев для ратделения цепей (для иросготы лриведена только одна цепь) ~ Нагиса для оатделкнн» целей До иослслнего времени ложно было амплифицировать учасгок ДНК.
состоящии ис более, чем нт 2 т. и и., однако новейшие техноло~ ии иозволян1т ам~шифицировш ь фра~ мент ы, вклн1чан~щис до 3 б т. и. и. Полу ченные таким обранкм копии ДНК ькогуч исиолгыоваться для самых равных цеаегй лгот метод важен для судебной медицины и в диагностике генетических аномалий плода гн илло (ськ нижей Он исиолежуется также и в биохимишских исследованиях. Применение технологии амплификации рекоибинантиои дна ьь( кпг)эндж гя шгннэа ')гул),'ггглншггпсгггуссссмэг! (7юшэп 'инни аггггггнггг)гггггггс) ) - шггп; енэл осончггеионе иэи -элиэон олслсгчггог) аоминсгэагэГос) иипемифипсэГИ ксг17 члваосчггглглэи онжои гхггл кэлэеггжлэгЛО эн чээгс гола)„ (шЩгггггггг 1) ггаГ г)гнгга) ггг,сиг)ГН(С ггогг,7гггилл гкпне) нол н асс -лвс)ф хсисноипмнс)лэас) счнииг висифс(оиисгосс сни -ене — сигене-д )гщ члинэсчиг)11 онжои "на17аггчв эн ио иии 'енлэаассс эн оньол, 'иньэгго9 иомээьил.снэл эинэкон -»исггоа олэгггогеаиивоггэлгю 'енэ.с кипел пг емок ииэ,! 'счО1ГНОЬ ПИМЭЭГИГф!ГПЭН:7 ОЭ КЭЛО1ЛЕИПИГ)Г)ИЛ ОЛЬ 'хин сиэсгсонсчэн агчгнгпглЛГЛг) кэчлкггакгчв '>()(!'нохнэи -.гвг)ф хгчньис сег) олог их членоссхэллэис)и лэгЛО эиэс ен пиээ 711<7)777Лагггпг гипглсглх~ггМ) иссг)элмесг цоггнэаьогг иоссгсгэл -олнп н кээсг1ггежг)эгоэ '(квпинлг)иплгни- и охл~о кш,с гг)7и)логггпл 'и 1иР лгс) 1чнисчгесгн-! ! (эгчннРвог)ипифиг017 когес)гсо гчссгпгилалзлэвгооэ он1 агчгссгойгг)н кэггнлгчгон -эи ег(ос хна о гэспгмЛг)исгоим вал ээьем н иинэгэег! счиоэои -ог(х а ноны хгчнггсг)эжль иипг!эзни кг.);.(1) и! эис! Иэ) иэгэг л гипифэгонлсхии сиьэсг хгчсгчггой 1'глнпгсмссэин емэаоиэь гчсенислесэгсгскосгэге ены кипс)ээсг)! хвмьол хссмээс,ифипэнэ а Риал сгипг(ээни гчсголэи кэллмевсчгеоес( -сгег) кпэг(а ээсгскогэвн (( енэено ончееипныон ки!н(ээсги кеньогкг)онээо е 'Лмьог гнлнногпсг)ээсги чсииэгэг)ио лаки Ноня|ь принцип применения йг!.Р-ана.згьза лс~чс все~ о на примере метода воз печат нов вальцева ДНК, или фиигерприигиига (анги йгщегрллпад) ДНК.
Нов~орюощиеся последовательное~и вДНК, разбросанные по всему г сному, свидетельств) нп о большом полил1орфизме сайзов рестрикции: рестрикционныс образцы уникальны у каждого человека. Эпн метод до сих пор используе~ох в судебной медицине, однако новая ~ехнология. базирующаяся на !П(Р-реакции, постепенно сто вьпссняег.
В геноме человека идентифицировано большое число повщряющихся послеловательносгей. Чгюло повторов в последовательности сильно варьирует у разных инлпвидуумов. Онот мсюд заклнзчаегся в вы- Генотерепия Могдап и А, Алгйтын Н' 7" 1!щпап непа 1Ьсгару Д Лппи. Кос. !3юспспз.
! 993. 9о1. 62. Р. 191 217. (Обзор знакомит с болезнями, которые можно лечщь с помощьн> ~ енотерапин, а том числе лечением дефицита аденозиндсзаминазы, и методами переноса генов; так- же обсуждаются вопросы безопасности и мики.) с аргч/и'3б гг. тат(1еюг((гене гер1асепеп) б бсь Агпег 1994. 'чо!. 270(3). Р 34 41. (Оп псы вас ~ замещение гена методам п ~ омолги и ч ной ре- комбинации и зрансгенеза.) Апбсззга~ И: I: Оспе 1)загару д бсь Атег.
!995. Ъо). 273 (3). 6сс О|со!Оэиэ кенклсс'сс~! ~с с ввс ис)н кзз смлсес)с)о сичс)оз ом ')воз ином и эн чз зоыс'ссвонсес)) кивчхэиси исвимзэьихесвев!:и хяжэев!чего 'вони!Оф -схис ))оссилс!.с ио9озо кззсвев~чзео«с)счсс ввэсссхнхс 'эюшзс ион в ез,(с)ив ошигяиьеж! чсссвс)эс)сс хэкновсои озь 'кссневос)иоссфсси зэ эссзосс ени -ксс1х-Йизьм зэессь!с)с ес) есхэлзссз кеньохзкм и 'схссзлс)ив им -ыг» киссевос)сн|ифни ов Хссссивс. хэевссьэссзэс)о гиэшнз кги свес)онлЬ ииимэфни ))оссзлс)ссв эйзьис)и ислен слонссэс) -зосхззес) с) еслс)к.ьлс)в эмнкнс:опон счхэсин~схгси исчньов -зс:м и шчн ссес)он( ! исэшвксии е сияю оисэс» ши«с!ш и гг -с»эхо — ошнэнши-иоыэк» и помхэс;м ионсЬпсич лвжсис )ьяс .з чмэ) сч)ишчж жс)осшзнэс! сичвоникохпссэне кснш -ешлс)сес! иос)ою» иесчкйэс) в 'киссмезс) кесссь!слслсссхслсс — нсснэмзеисч 'сЬьийсе)! энневэео9вс эоннлсвсчиохле член»исссов сэжож 'во»ьэс) хсчссссэвсзс)сзз си ссиго сэЛ» -ен, и Кмунпо хэеснс)зссоз егсэсзссз кеинлжжи есссол) смчсзонжос)сжзо иопчсоу з ко слииовос)сс гнжс он вомссэо «хссжль» и кхиовзь емвос)сссс)оз ои яев 'ссслкхзоссчссзснвогэс зои игссчнзоссзссмс1нсссче иеичнчеэгво овчин гочнвшЬ кль хо «зхи! ссс»гьссехсс во»ссэ<~ иьксичм чхзэ эжссснсжс)о жонгз !) ээнжосз опвс)ссс воягэо хшсс)ос)осзос) киневешоизгс! сскзгветсчвующеи стимуляции В-клеток(В-лимфоци зов).
Цитогоьснческими (киллсрпыми клетками) являкзтся Т-лимфоци гы (буква кТ» укемывасг иа мссиз их образования тимус. г, е. вилочковую железу, которая у человека распоп агаез ся за групп ной ). Все лим фон из ы пос гоянно образуюзся в коспюм мозге (у плола в псчсии). В-клезки созревакп в коси ном мозпч Есть очень важное условие в кразделснип трудам между В- и 1-лимфоц~зтамзс /1ля нжо чггзбы В-клетка стала вырабазывспь а~гтзггела, оиа должна, во-первых, всгрегизь аигиген, а во-взорых, вступизь в контакт с особым типом Т-клетки, которая уже «познакомилась» можно сказа гь„что у злы постоянно тп слеживакил з капскую инфекцию, действуя в качестве фильтра, а также создают оирсдслсинукг среду для рсымножения и дифференцировки лимфоци зов при их кои г акте с аи ги~ снами.
Т!имфогззттга образуклся я косгптом мозге. Начало всем клсг кам крови даки с гволовыс кле~ ки; по мере дифференцировки некоз орые из них сгаиовятся В-юзсз калги, друпгс Т-клезкалггг, грен,и — красными кровяными клетками и т. д. (рис. 25Е ! ). Как уже отмечалось, В-юзетки развиваются в косг лом мопс, а Т-клетки мшрирунп в вилочковую железу (тимус), где происходит пх размиожеиис и первичное со гревание. Миграция Т-клеток с гсм же апгигеиом.
'!ак как эза '1-клетка кпомгиасгя из косгиого мозга и высвобождение зрелых Т-клсгок В зтой палеве мы знакомимся с иммуниым процессом сначала вкраггзс рассмотрим с гр пегикз иммунной заши ~ы, используемую организмом. Основная стратегия иммунной защиты Иммунная система должна рсгннзь две задачи ! ) организацию продукции антител В-кле гками в ответ на чужеродные визг~гены, но нс на собсзвеннзяс компоншны организма; 2) обеспечение избиршсльной атаки цизотоксичсскимн Т-клеткамн только аномальных клеток организма. Основнои принцип иммунной зац!и~ы состоит в том, что данная В-клетка можез образовывать ~олько олно специфическое анппело [лля связывания Высвобожденная популяция виргильиых В-иле~он гак их |еперь называют — цри вез рече с соответствующих~и аны геенам и активируется, и теперь:по вполне оправдано, поскольку встренгвшийся антигон чужероден.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
