А.И. Нетрусов, М.А. Егоров - Практикум по микробиологии (1125598), страница 149
Текст из файла (страница 149)
Для выявления стафилококка производят посев 0,5 — 1 мл смыва на молочно-солевой или желточно-солевой агар и в среду накопления (солевой бульон— МПБ„содержащий 6,5% ХаС1). Колонии с признаками, характерными для сатфилококков, изучают, как описано выше (см. разд. 46.4). Материалы, оборудовапие, посуда, реактивы Стерильные чашки Петри; стерильные пробирки; стерильные пипетки; стерильные ватные тампоны или марлевые салфетки; палочки стеклянные; пинцеты; петли бактериологические; вата; микроскопы; стекла предметные и покровные, Вола водопроводная стерильная; среды: Эцдо, Кесслера или КОДА, МПА, цслужиакая с глюкозой, молочно-селевой или желточно-солеаой агар, солевой бульон, висмут-сульфит агар, селецитоамй бульон, свежеприготовленный раствор лиметил-и-фениленаиамина; свежеприготовленный 3%-и раствор КОН; реактивы для окраски по Граму; фуксин; 70%-й этансл.
ЗАДАЧА 6. МИКРОБИОТА ЧЕЛОВЕКА. МИКРОФЛОРА ПОЛОСТИ РТА Полость рта является исключительно благоприятной средой для существования и размножения самых различных видов микроорганизмов. Это обуслов- 503 лено постоянным наличием питательных веществ, оптимальной для размножения многих микроорганизмов температурой (37 'С), влажностью и рН (около 6,9 — 7,0).
Микрофлора полости рта подразделяется на постоянную и случайную. Обычными представителями нормальной микрофлоры роговой полости являются стрептококки: факультативно анаэробные (в том числе Ягергососсиз за!(ааг!из, 5'. т!1ц, кариесогснные — Х тигапе и др.) и облигатныс анаэробы (Рер1оз1гергососсиз), а также грамположительные нитевидные микроорганизмы (Асг!потусез о!хеоеие). В составе микрофлоры полости рта можно обнаружить также лактобациллы, грамотрицательные кокки, относящиеся к родам !те!зтег!а и УеВопе!!а, а та!оке грамотрицатсльные бактерии, строгие анаэробы из семейства Вас!его!с!асеае (ВасгегоЫез, РикоЬасгег!ит, Еер1огг!сЬ!а).
В состав постоянной микрофлоры полости рта входят различные виды спирохет (Тгеропеп1а с!еп1!со!а, Т. ога!е, Т. тасгоВепбсит, Воггейа Ьисса!!5), микогшазмы, нокардии и др. К случайной микрофлорс полости рта относятся комменсалы, обитающие на других слизистых оболочках и коже, сапрофиты внешней среды и различные патогенныс микроорганизмы, которые попадают в полость рта в результате аэрогенного или алиментарного заражения от больных или бактсрионосителсй. Очень высокой способностью адаптироваться к существованию в ротовой полости обладают стафилококки, стрептококки, коринсбактсрии, грибы Сапе!!с!а, вирусы гсрпеса, эпидемического паротита и др.
ааббсб ~: ««р ф бу ба, . б б на основании данных микроскопического исследования; выделить и произвести колгшественный учет некоторых групп микроорганизмов из слизистой оболочки зева. Ход выполнения задачи Подготовка сред н материалов. Подготовить к стерилизации (шт.): чашки Петри — 5; пробирки — 5; пипетки на 1 — 2 мл — 5 и 5 — 10 мл — 3; ватный тампон на палочке — 1. Приготовить (состав и приготовление сред см. в приложении 4): 0,85%-й раствор )ЧаС! стерильный (или вода водопроводная стерильная) — !00 мл; МПА стерильный — 20 — 60 мл; желточно-солевой (или молочно-солевой) агар — 20 мл; среда Зндо — 20 мл (сразу после приготовле- ния разлить в стерильные чашки Петри, дать 2 застыть, завернуть в бумагу и оставить в холодильнике); среда Сабуро — 20 мл. Проведение анализа.
Из зубного налета, смывов со слизистой оболочки зева готовят препараты-мазки, окрашивают их и микро- скопируют (рис. 46. 5). Из зубного налета так- Рис. 46.5. Микрофлора зубного налета о (по Л.В.Борисову и др., !993): 1 — Еер!асс!с!б1а !баееа!!е; 2 — !ос!аеас!Лаб Ор.; 5, 4— Тберооета б!еоасо!а, Тпраббебоа. бр.; 5, о — стрептококки и липлококки (5бгер!оеоссаб ба!Эапаб, 5. тамб, 5. баокаеч 1е!!оое1!а ер.); 7 — Гибоьасбепаоб оас!еобат же готовят препарат «раздавленная капляь для обнаружения подвижных микроорганизмов. Для посевов берут определенный объем исследуемого материала (например, смыв из зева или зубной налет), разводят в стерильной воде (в зависимости от предполагаемой концентрации) и делают посевы из соответствующих разведений на питательные среды: для выявления стафилококка — на молочно-солсвой или желточно-солевой агар; для выявления бактерий группы кишечной палочки — на среду Эндо; для выявления дрожжей рода Сапе)и1а — на среду Сабуро.
Ориентировочную идентификацию микроорганизмов проводят по характеру выросших колоний, морфологии клеток, окраске по Граму. Материалы, оборудоваиие, посуда, реактивы Стерильные чашки Петри — 5 шт., стерильные пробирки; стерильные пипетки; петли бактериологические; вата; микроскопы; стекла предметные и покровные. Вода водопроводная стерильная; срелы: Энло, молочно-солевой или жегпочно-солевой агар, Сабуро, МПА, саежеприготовленный раствор диметил-п-фенилендиамина; свсжеприготовленный 3%-й раствор КО~; реакгивы для окраски по Грану; фуксин; 70%-й этапол. План проведения задачи 11а выполнение всей задачи требуется около 18 ч. Занятие 1.
Подготовка посуды и приготовление сред. Занятие 2. Анализ волы. Анализ воздуха. Завятие 3. Продолжение анализа воды и воздуха. Анализ почвы. Занятие 4. Продолжение анализа воды и почвы. Анализ пищевых продуктов. Анализ микрофлоры рук (или предиетоа обихода). Микрофлора человека (зубной налет, мазок из зева). Занятие 5.
Продолжение анализа почвы, пищевых продуктов и пр. Занятие б. Обработка результатов, подведение итогов. Глава 47 ОСНОВЫ МЕДИЦИНСКОЙ МИКРОБИОЛОГИИ ЗАДАЧА 1. ДЕМОНСТРАЦИЯ ПОСТУЛАТОВ КОХА В ЭКСПЕРИМЕНТАХ С РАСТЕНИЯМИ Великий немецкий микробиолог Роберт Кох (1843 — 1910) начал свои исследования в то время, когда роль микроорганизмов в возникновении инфекционных заболеваний подвергалась серьезным сомнениям. Для доказательства этой роли требовались четкие критерии, которым должны уловлетаорять эксперименты, подтверждающие причинную связь между данным микроорганизмом и определенной болезнью. Эти критерии бьши сформулированы примерно за 30 лет до работ Коха другим немецким микробиологом — Ф.
Гснле, но вошли н историю под названием «постулаты Кохэн поскольку именно Р. Кох впервые применил их в эксперименте, изучая бактериальпую эгиологию сибирской язвы. Суть постулатов заключалась в следующем: 505 1) один и тот же микроорганизм — предполагаемый возбудитель болезни, должен обнаруживаться во всех случаях данного заболевания и не выделяться при других болезнях и от здоровых лиц; 2) микроб-возбудитель должен быть выделен из организма больного и поддерживаться в чистой культуре; 3) чистая культура данного микроорганизма лолжна вызывать > восприимчивого хозяина (экспериментально зараженных животных) заболевание с клинической и патологоанатомической картиной, аналогичной заболеванию человека, из организма которого выделена чисгая культура; 4) микроб-возбудитель должен быть снова выделен из организма экспериментально зараженною животного и его свойства должны быть идентичны первому изоляту.
Роль микроорганизмов в возникновении инфекционных заболеваний была доказана Кохом только после того, как им был разработан и начал активно использоваться в медицине метод выделения чистых культур микроорганизмов на плотных питательных средах из отдельной колонии (см. гл. 6). Практика показала, что постулаты Коха имеют в известной мере относительное значение, поскольку не всегда удается выделить возбудителя болезни в чистой культуре и вызвать у подопытных животных заболевание, свойственное человеку.
Кроме того„ болезнетворные микроорганизмы в некоторых случаях могут быть найдены и в организмах здоровых люлей, обладающих иммунитетом, особенно после перенесенного ими ранее инфекционного заболевания. Однако на ранних этапах формирования меди- пинской микробиологии, когда из организма больных выделяли многие микроорганизмы, не имеющие отношения к данной болезни, постулаты Коха сы>ради важную роль для установления истинного возбудителя заболевания. Например, Кох окончательно доказал, что ранее обнаруженный у животных, бодрых сибирской язвой, микроорганизм огвечаег требованиям постулатов и является истинным возбудителем данного заболевания и у людей. Хотя Кох работал с животными, его постулаты можно продемонстрировать и с исполюованием растений.
Ход выполнения задачи Микроорганизмы н нх культивирование. В работе используют яблоко или клубень картофеля с гладкой неповрежденной кожицей, подверженные гниению в результате спонтанного развития пнилостной микрофлоры на начальном этапе процесса. Основным методом работы является метод выделения чистой культуры микроорганизма на плотной питательной среде. Для выделения чистой культуры из гниюгцего картофеля используют мясоаеиаюнный агар, а из гниющего яблока — среду Сабарада состава (г/л): глюкоза— 20,0; пептон — 10,0; агар — 18,0; вода водопроводная — до 1 л.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
