М.А. Пальцев, А.А. Иванов - Межклеточные взаимодействия (1120989), страница 45
Текст из файла (страница 45)
Маауренко и С. М. Суховой. !а! О о г 4 О 8 Ю 2 4 6 8 10 к Рис. 5!. Зависимость экспрессии с-гаа от суммарного балла морфологической элокачественности в грунне аденокарцином нв стадии Т!О (АК) и мелкоклеточного рака с нейроэндокринной дифференцировкой (МР), АК: у = 10,5 (~2) — 1,5 (+0 4) х; К = 0,89; р(005. МР: у = х — 5; К = 1; Р<005. наружить положительную корреляцию между экспрессией с-газ и прогрессией опухоли (рис.
51). По мнению Б. Ь. Н(со)зоп (1991), газ является ключевым онкогеном в формировании метастатического фенотипа опухолевой клетки. Автор полагает, что высокозлокачественный фенотип может развиться быстро за счет специфических изменений в критических контролирующих генах. Однако возможен н другой, медленный вариант развития злокачественного метастазирующего фенотипа путем накопления менее критических количественных генетических изменений„сочетающихся с нарастанием гетерогенности опухолевых клеток.
Еще более противоречивы данные об участии быстро реагирующих генов в опухолевой прогрессии. В экспериментах по изучению метастатического потенциала рака молочной железы крыс [Уц))И Н. е1 а1., 19861 выявлена корреляция между экспрессией с-(оз и метастазированием. Напротив, М. Ре1((шап и соавт. (1988) наблюдали снижение способности метастазировать при увеличении экспрессии опухолевыми клетками с-(оз, а также экспрессии антигенов 1 класса ГКГС. При изучении рака легкого мы обнаружили достоверную отрицательную корреляцию между экспрессией с-(оз и прогрессией опухоли для всех гистологических типов опухоли (рис.
52). Экспрессия другого немедленно реагирующего протоонкогена с-шус (рис. 53), Ь-шус коррелирует со степенью злокачественности опухолей и появлением метастазов. Это согласуется с результатами наших исследований рака легкого, при этом наиболее достоверная корреляция обнаружена в группе мелкоклеточного рака. Удобным объектом для изучения клеточных онкогенов на разных этапах опухолевой прогрессии является группа нейроэндокринных опухолей легких. К ним относятся доброкачественные опухоли — карциноиды, высокодифференцированные карциномы— злокачественные или атипичные карциноиды, которые теперь называют высокодифференцированными нейроэндокринными карциномами, низкодифференцированные карциномы, представленные мелкоклеточным раком с нейроэндокринной дифференцировкой 182 Рис.
52. Зависимость экспрессии с-(аз от суммарного балла морфологической злокачественносзн рака легкого. у = 6,66 (Вао,52) —. 0,28 (-1 0,08) к; К = .= 0,55; р(0,05. 2 4 6 В 1Ок О 2 4 6 В 10 к 2 4 В В 10к Рис. 53. Зависимость экспрессии с-ыус от суммарного балла морфологической злокачественности высокодифференцированнык карцином (ВД) н низкодифференцированнык (НД) карцином легкого.
ВД у = 7,7 (~0,7) — 05 (5-0,13) к„' й = 0,84; Р (О:;05. НД; у = 1 (-1-1,6) + 0,5 (~0,2) к; 'к = 0,67; р(0,05. клеток )Коган Е. А., 19931. Анализ данных литературы об изменениях клеточных онкогенов в этой группе опухолей затруднен, поскольку во многих работах отсутствует точная морфологическая верификация мелкоклеточного рака легкого. Авторы не учитывают, что мелкоклеточный рак легкого — это гетерогенная группа злокачественных опухолей, имеющих общий светооптический признак — мелкие размеры опухолевых клеток, не формирующих какие-либо гистологические структуры. При электронной микроскопии и гистохимическом исследовании в группе мелкоклеточного рака обнаруживаются не только карциномы с нейроэндокринной дифференцировкой клеток, но и низкодифференцированный плоскоклеточный рак, низкодифференцированная аденокарцинома, недифференцированные карциномы и, наконец, комбинированные опухоли. Это означает, что к группе мелкоклеточного рака легкою при светооптическом исследовании относят опухоли разных гистогенетических групп, возможно, отличающиеся и молекулярно- генетическими особенностями.
Отсутствие точной морфологической (гистогенетической) верификации мелкоклеточного рака, вероятно, и служит причиной противоречивых данных об экспрессии клеточных онкогенов в этой группе опухолей. Нейроэндокринную дифференцировку опухолевых клеток мы устанавливали при электронно-микроскопическом исследовании, гистохимически — с помощью реакции по Гримелиусу, иммуногистохимически — выявлением нейронспецифической энолазы и 8100-протеина. Изучались как парафиновые, так и криостатные срезы, в которых иммуногистохимически выявлялись 9 клеточных онкогенов: (оз, с-)цп, с-шус, 1.-аус, е(з-1, з(з, згс, ше! и гез. Результаты реакции оценивали полуколичественным методом [Коган Е.
А., !990[ с проведением корреляционного анализа на персональном компьютере фирмы «Копгоп Е!ес!гоше», использовали стандартный пакет обработки данных (программы «3!а!» и «С[азз»). Анализ экспрессии клеточных онкогенов в ходе опухолевой прогрессии проведен в два этапа. На первом изучалась экспрессия в группе мелкоклеточного рака с нейроэндокринной дифференцировкой (18 наблюдений). Установлено достоверное увеличение или тенденция к повышению экспрессии ядерных онкогенов с-шус (рис.
54) и Ь-шус (рис. 55) и уменьшение (достоверное или тенденция) экспрессии (оз (рис. 56), )ип (рис. 57), е!з-1 и ше! в ходе опухолевой прогрессии. На втором этапе при исследовании экспрессии клеточных онкогенов в доброкачественных и злокачественных нейроэндокринных опухолях были подтверждены выявленные ранее закономерности.
В высокодифференцированных карциномах отмечалось резкое повышение экспрессии с-(оз, с-згз и с-згс, а в низкодифференцированных карциномах (мелкоклеточном раке) — снижение экспрессии с-(оз и с-)цп. Можно предположить, что усиление экспрессии с-[оз и с-)пп характерно для разных стадий опухолевой прогрессии и, вероятно, связано с особой функцией данных клеточных онкогенов. Известно, что с-(оз и с-)пп являются немедленно реагирующими генами клеток, которые активируются под действием различных сигналов на ранних стадиях многих патологических процессов, вероятно, и при опухолевом росте. Коэкспрессия клеточных онкогенов (парная) изучалась также в два этапа. В группе мелкоклеточного рака выявлена положительная корреляция (достоверная или близкая к достоверной) между экспрессией клеточных онкогенов 1оз — )ип, (оз — е!з1, 1оз— гй, (оз — згс, )ип — е!з1, е!з!-ше(, з)з — згс (рис.
58), )цп — ше! и отрицательная — между экспрессией клеточных анкогенов )ип— [.-шус (рис. 59), с-шус — ше(, з)з — ше!. При исследовании всей группы нейроэндокринных опухолей в целом получены аналогичные результаты.'Кроме того, положительная корреляция, близкая к достоверной, наблюдалась между экспрессией с-шус и Е-тус, а достоверная отрицательная — между с-)цп и с-з[з, в то же время отрицательная корреляция с-шус — с-ше! оказалась недостоверной. Корреляция экспрессии с-(оз и с-)вп отражает совместное функционирование соответствующих онкобелков, образующих гомо- и гетеродимерные комплексы (АР), которые регулируют транскрипцию различных генов. Что касается положительной корреляции с-(оз — с-е!з-1 и с-)пп — с-е!з1, то она может быть связана с наличием в промоторе с-ем-1 участка (сайта), связывающего гетеро- !а« ~.-вус с-п1ус Рис.
55. Зависимость суммарного балла морфологической злокачественности нейроэндокринных опухолей легкого от уровня экспрессии 1 -мус. у = 2,922 + 1,875х; п = 14; р<0,05. Рнс. 54. Зависимость суммарного балла морфологической злакачестиенности (БЗ) нейроэндокринных опухолей легкого ог уровня экспрессии с-тус. у = 0,243ехр (0,533х); п = 9; р<0,05. 1 2 3 4 5 6 7 (сз 1 2 3 4 5 6 7ып Рис. 55. Зависимость суммарного балла морфологической злокачественности нейроэндокринных опухолей легкого от уровня экспрессии с-1ок у = 12,404 + (23,5871окх); п = 13; р<0,05.
Рис. 57. Зависимость морфологического балла тлокачественности нейроэндокринных опухолей легкого от уровня экспрессии с-)оп. у = 14,123+ ( — 1,323х); п =!3; р<0,05. 185 димеры АР! и АР2 онкобелков с-1оз и с-!пп. Так, известно, что с-Коз повышает активность промотора с-ег31 !01(а Т. е1 а1., 1991!. Положительная корреляция коэкспрессии с-Гоз — с-318 может быть результатом индукции экспрессии онкооелка с-103 под действием с-313 [Впс)) Б. е1 а!ч 1991!. ОтРицательнап коРРелациЯ с-1цп — Е,-шус, вероятно, является отражением противоположных тенденций в их экспрессии в ходе опухолевой прогрессии. Иногда наличие положительной или отрицательной корреляции трудно объяснить на основании данных литературы.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
