М.А. Пальцев, А.А. Иванов - Межклеточные взаимодействия (1120989), страница 48
Текст из файла (страница 48)
В., 19921. Результаты первого иммуногистохимического исследования распределения рюинтегрннов показали, что гломерулярные клетки человека и крысы экспрессируют гетеродимеры УЬА-1, УЬА-2, Ч[.А-З, обеспечивающие связывание клеток с ламинином, фибронектином, коллагеном 1, РП и 1У типов [Бйпоп Е. Ет Мс[)опа!т! э'. Ач 1990[. УЬА-4, Ч1 А-5 (фибронектиновый рецептор) и Ч1.А-6 (ламининовый рецептор) в почечном клубочке не выявлены. Среди этих [эпинтегринов только УЬА-1 локализован строго в мезангии.
В культуре МК человека были обнаружены ЧЬА-1, ЧЬА-2, У1.А-З и Ч1.А-5. Кроме того, на МК выявлены рЗ-интегрины. Прикрепление МК к мезангиальному матриксу опосредуется через эти интегриновые рецепторы н ингибируется антителами к ЧЬА-5 и пептиду ВОР [Согйо Р. О., Бейпа[г 1). 1)., Ма[тщап Х.
Во 1990[. Подобный же эффект клеточно-матриксного взаимодействия может опосредовать гепарининдуцированное ннгибирование пролиферации МК [5!г![гег 1.. 5. е! а!., 199Ц. Т а б л н н а й. Факторы, аыэыаающне митогенный мли ингибирующий эффекты ири культивировании меэангиальнык клеток !р!оейе !. е! а!., !993! П р н м е ч а н н е. ПНФ вЂ” оредсердный нетрнйуретнческнй фактор, АТ вЂ” ангиотенэин, !' — гранулонитарный, М вЂ” макрофагальный.
Показано, что продукция компонентов ЭЦМ осуществляется параллельно росту МК, а секреция компонентов мезангиального матрикса осуществляется только при межклеточных контактах [!зЫта У. е! а!., 1989[. Образование ламинина н коллагена 1У типа и их включение в субстрат ускоряют синтез и последующую секрецию других компонентов ЭЦМ по аутокринному механизму. Экстрацеллюлярное накопление коллагена 1У типа и ламинина в 194 матриксе обусловливает снижение экспрессии нх генов н синтеза этих компонентов в МК. Это обратная отрицательная регуляция не наблюдается и нехарактерна для коллагенов 1 и ГП типов. В результате этого при появлении интерстициальных коллагенов в почечном клубочке при некоторых патологических процессах секреция интерстициальных коллагенов не снижается. Это может приводить к непостоянству секреции данных коллагенов и развитию гломерулосклероза.
Б. Окн1)а н соавт. (1990) отмечают потенциальную роль ТФР» в появлении ненормальной секреции компонентов ЭЦМ при экспериментальном нефрите. Стимулирующий эффект ТФР» на продукцию компонентов внеклеточного матрикса выявлен как на уровне мРНК, так и на белковом уровне. Однако, несмотря на многочисленные исследования биологии МК и мезангнального матрикса, влияние различных цитокинов и компонентов мезангиального матрикса на поведение МК )п г)то и (п я1(го пока недостаточно ясно.
Большинство результатов изучения взаимодействия цитокинов и молекул ЭЦМ получено при использовании различных экспериментальных моделей. «Идеальная» модель для изучения факторов, инициирующих и поддерживающих пролиферацию МК 1п я(чо, должна характеризоваться интенсивной клеточной пролиферацией, острым и синхронным началом болезни, высокой степенью воспроизводимости и небольшой технической сложностью. ЗА.2. Анти-УЬу 1Л-нефрит В настоящее время наиболее популярными моделями для изучения патобиологии МК являются модели анти-ГБМ-нефрита и мезангиопролиферативного нефрита, индуцированного анти-ТЬу-1.1 (антитимоцитарными)-антителами.
Прн этом ранний мезангиолизис на следующий день после воздействия антител сменяется массивной пролиферацией МК [АЬЬопо Н., 1993; Р)оеяе з. е1 а1., 19931. И в той, н в другой модели развитие экспериментального нефрита сопровождается выраженной лейкоцитарной инфильтрацией почечного клубочка. Прн анти-ТЬу-1.1-нефрите отмечена моноцнтарно-макрофагальная и тромбопитарная инфильтрация почечного клубочка, а при анти-ГБМ-нефрите (в зависимости от фазы)— нейтрофильно-моноцитарная или моноцитарно-макрофагальная. Наряду с нейтрофнлами и моноцитами, роль которых в развитии повреждений почечного клубочка хорошо известна, тромбоциты вместе с гемостатической ролью могут также играть роль эффекторных клеток 13оЬзоп В.
1., 19911. Механизм(ы), лежащий в основе гломерулярной инфильтрации, очевидно, связан с образованием иммунных комплексов 1п айп и активацией комплементного каскада в начале лизиса МК (анти-ТЬу 1.1-нефрит) или ГБМ (антн-ГБМ-нефрит). Помимо этого, инфильтрация почечного клубочка может быть опосредована и другими факторами, например выделяемыми активнрованными или поврежденными гломерулярными клетками либо поврежден- 13 ными структурами ЭЦМ, играющими роль хемоаттрактантов.
Для нейтрофнлов это прежде всего ИЛ-8 и ФАТ, продуцнруемые МК и эндотелием, для моноцитов/макрофагов — ТцФР, ТФРб и МСР-1, для тромбоцнтов — ФАТ, коллаген ГБМ, ТхА9, тромбин, иммунные комплексы и радикалы кислорода Яо!!]пз В. Л е( а1., 1990; 5о]1пзоп К. е! а1., 1991]. Инфильтрирующие почечный клубочек клетки, активируясь сами, могут быть источником различных факторов — потенциальных митогенов или фиброгенов МК, включая ИЛ-1, ФНО„, ТцФР, ИПРФ-1, ТФРб и ЭФР [К!а[1г 8., Яс]1ге]пег О., 1с]1![сава !., 1988]. Инфильтрация почечного клубочка сопровождается экспрессией адгезивных молекул, обеспечивающих контакт клеток крови с гломерулярными клетками.
Среди этих молекул ведущая роль принадлежит 1САМ-1 [В!здор О. А., Най В. М., 1989]. Однако наиболее выраженная экспрессия !САМ-1 обнаружена на эпителнальных клетках прокснмальных канальцев и эндотелии сосудов интерстиция [Мпйег О. А., Магсот!с-].!р1согзк! Я., Мпйег С. А., 1991]. Таким образом, при оценке пролиферации клеток почечного клубочка и продукции ими компонентов внеклеточного матрикса нельзя не учитывать влияние внеклубочковых цитокинов н факторов роста. На раннем этапе развития анти-Т]1у 1.1-нефрита повреждение МК, опосредованное анти-Т[1у 1.1-антителами и комплементом, вызывает усиленную продукцию н секрецию оФРФ, служащего митогеном для поврежденных МК 1п 919о [Р1ое8е 5. е( а[., !992].
Полагают, что выделение оФРФ МК можно рассматривать как важный этап в инициальной фазе пролиферации МК !и Иго [Р[ое8е Л е! а1., 1993]. Однако субнефритогенные повреждения могут приводить к выделению других цитокинов, которые требуются для поддержания оФРФ-опосредованной пролиферации МК (рис. 62). Дальнейшая пролнферация МК в этой модели связана с заметным повышением уровня мРНК для синтеза А- и В-цепей ТцФР. Усиление экспрессии мРНК для В-цепн на 3-й день заболевания обнаружено в мезангии методом гибридизации !и згш [УозЫпшга А.
е1 а!., 1991]. Локализация В-цепн ТцФР в мезангни была выявлена при иммуногистохимическом окрашивании. Параллельно с усилением экспрессии ТцФР обнаружено увеличение уровня мРНК и синтеза соответствующего белка для р-субъединицы рецептора ТцФР [1.Ыа Р. е! а1., 1991]. Подобное усиление экспрессии ТцФР и рецептора для него было показано при экспериментальной 18А-нефропатии и мезангиопролиферативном гломерулонефрите человека.
Однако ТцФР не оказывает заметного воздействия на пролиферацию МК 1п Иго в иннцнальную стадию заболевания. Использование нейтрализующих антител к ТцФР не влияло ни на мезангиолизис, ни на инфильтрацию почечного клубочка моноцитами/макрофагами, ни на количество циркулирующих лейкоцитов и тромбоцитов, ни на пролиферацию МК, начинающуюся на 2-й 19б Вторичнви Фаза Фаза разовивние Инниналз»аа Феи „ф[:~.ф„~",', 'д, > Р' '='" 'Х ' «Я~:,: Ф' ФР, ГСПГ Мезанполивио Ингиеированнв рвота м синтез «омпонвнгов внеомточного мвтризса Рис. 62. Развитие анти-Тпу 1Л-нефрита !по Р1оезе Ь ез а1., !9931.
оФРФ вЂ” основной ФРФ, ГСПà — гепарансульфатпротеогликан. день анти-ТИу 1.1-нефрита [5о[зпзоп К. 3. е! а!., 1990[. Эти данные свидетельствуют о том, что в инициальную фазу пролиферация МК не зависит от наличия ТцФР. Скорее, другие факторы, выделяемые из клеток„инфильтрирующих почечный клубочек, или из поврежденных МК, запускают пролиферацию МК, а ТцФР лишь усиливает и поддерживает этот процесс. Таким образом, вторую фазу анти-Т[зу !.1-нефрита можно рассматривать как ТцФР-зависимую.
С 4-го по 14-й день анти-ТЬу 1.1-нефрита в почечном клубочке отмечается увеличение как уровня мРНК для синтеза ТФРр, так и количества самого фактора, причем в активной форме [О[сада Б. е! а!., !990[. Усиление выделения ТФРр может быть следствием пролиферации МК, поддерживаемой ТцФР. Введение нейтрализующих антител к ТФРр крысам с анти-ТЬу 1.1-нефритом приводило к значительному снижению накопления компонентов ЭЦМ, в частности протеогликанов [Вогдег %.
А. е! а!м 1990[ и не влияло на пролиферацию МК. Для объяснения действия ТФРр на пролнферацию МК [п утуо нужны дальнейшие исследования. Основываясь на результатах, полученных !и 9!!го, можно предположить, что высокие концентрации ТФРр ингибируют пролиферацию МК и усиливают продукцию протеогликанов МК. Гепарансульфат в свою очередь может дополнительно тормозить рост МК и их миграцию. Таким образом, пролиферация МК при анти-Т[зу 1.1-нефрите контролируется тремя основными медиаторами: ФРФ, ТцФР и ТФРр. Если роль ТцФР в этом процессе доказана, то влияние ФРФ н ТФРр требует дальнейших исследований.
Кроме того, другие цитокины и аутокоиды оказывают дополнительное воздействие на пролиферацню МК и синтез ими компонентов ЭЦМ. Г 97 3.4.3. Анти-ГБМ-нефрит Влияние воспалительных цнтокинов (ИЛ-1, ФНО, ИЛ-6) и ряда аутокоидов на пролиферацию МК исследуется на модели анти- ГБМ-нефрита, при этом выделяют две фазы — гетерологичную и аутологичную. Гетерологичная фаза связана с фиксацией циркулирующих анти-ГБМ-антител к ГБМ, что приводит к развитию комплемент-нейтрофилзависимой инфильтративно-пролиферативной воспалительной реакции (рис. 63, 64). Аутологнчная фаза протекает по типу реакции гиперчувствительности замедленного типа, связана с образованием иммунных комплексов 1п гй(и и сопровождается выраженной моноцитарно-макрофагальной инфильтрацией почечного клубочка.
Несмотря на то что количество мононуклеарных лейкоцитов в обеих фазах анти-ГБМ-нефрита достаточно велико, пролиферативная реакция в почечном клубочке не однозначна. Очевидно, это определяется как количественными, так и качественными изменениями спектра медиа- торов, продуцируемых инфильтрирующими почечный клубочек клетками. Инфильтрация почечного клубочка нейтрофилами выражена в первые 6 ч после введения антител к ГБМ. Аккумуляция нейтрофилов может быть опосредована хемотаксическими компонентамн комплемента (С5а), развивающейся коагуляцией (фибриноген/фибрин) и иммунным прилипанием через Рс-фрагмент антител. Декомплементация (яд кобры) не влияла на развитие воспалительной реакции в почечном клубочке.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
