Протокол при защите диссертации (1091781)

Просмтор этого файла доступен только зарегистрированным пользователям. Но у нас супер быстрая регистрация: достаточно только электронной почты!

Текст из файла

Протокол № 5 от 12 декабря 2016 г.

заседания диссертационного совета Д 212.131.06 при защите диссертации

Ковалевой Екатерины Викторовны

Ведет заседание заместитель председателя диссертационного совета, доктор химических наук, профессор Миронов А.Ф.

Секретарь - ученый секретарь совета, кандидат химических наук, старший научный сотрудник Лютик А.И.

Присутствовали: 19 членов диссертационного совета: академик РАН, д.х.н. Швец В. И. (03.01.06), д.х.н. Грин М.А. (02.00.10), д.х.н. Миронов А.Ф. (02.00.10), к.х.н. Лютик А.И. (02.00.10), д.х.н. Белова Л.О. (02.00.03), д.х.н. Борисова Е.Я. (02.00.10), чл.-корр. РАН, д.х.н. Громов С.П. (02.00.03), д.х.н. Карлов С.С. (02.000.03), д.т.н. Кедик С.А. (03.01.06), д.х.н. Кирилин А. Д. (02.00.03), д.б.н. Красильников И.В. (3.01.06), д.х.н. Маслов М.А. (02.00.10), д.х.н. Овчинникова Т.В. (02.00.10), д.х.н. Пономарев Г.В. (02.00.03), д.х.н. Себякин Ю. Л. (02.00.10), д.х.н. Селищева А.А. (03.01.06), д.х.н. Степанов А. Е. (03.01.06), д.х.н. Шапиро Б.И. (02.00.03), д.х.н. Шуталев А.Д.(02.00.03).

Повестка дня:

Защита диссертационной работы Ковалевой Екатерины Викторовны на тему «Разработка и применение методов ПЦР и ИФА для анализа остаточной ДНК и белков штаммов-продуцентов в биофармацевтических субстанциях» по специальности 03.01.06 - биотехнология (в том числе бионанотехнологии)

Научный руководитель:

Академик, профессор, доктор химических наук, профессор кафедры биотехнологии и промышленной фармации Института тонких химических технологий Московского технологического университета академик Швец В.И.

Официальные оппоненты:

- Василов Раиф Гаянович - доктор биологических наук, профессор, начальник отдела биотехнологии и биоэнергетики, Национальный исследовательский центр «Курчатовский институт»;

- Варижук Анна Михайловна -кандидат химических наук, старший научный сотрудник,

ФГБУ «Федеральный научно-клинический центр физико-химической медицины ФМБА»

Ведущая организация: Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт молекулярной генетики РАН

Сообщение сведений о диссертанте ученым секретарем совета Лютик А.И.

Доклад Ковалевой Е.В. по диссертационной работе.

Ответы диссертанта на задаваемые вопросы.

Вопросы задавали:

1. д.х.н., проф. Степанов А.Е. (2 вопроса)

2.д.х.н. Овчинникова Т.В. (2 вопроса).

Выступление научного руководителя – акад., д.х.н., проф. Швеца В.И. с отзывом о диссертанте - отзыв положительный.

Сообщение ученого секретаря к.х.н. Лютик А.И. об отзыве ведущей организации - Институт молекулярной генетики РАН, отзыв положительный, содержит замечания, а также об отзывах на автореферат (4 положительных отзыва, 3 отзыва содержат замечания).

Диссертант отвечает на замечания в отзыве ведущей организации и в отзывах на автореферат.

Выступление официального оппонента – кандидата химических наук Варижук Анны Михайловны. Отзыв положительный, содержит замечания.

Ответы диссертанта на замечания официального оппонента.

В связи с отсутствием официального оппонента - доктора биологических наук, профессора

Василова Раифа Гаяновича - ученый секретарь совета Лютик А.И.оглашает его отзыв. Отзыв положительный, содержит замечания. Ответы соискателя на замечания официального оппонента.

В дискуссии по диссертационной работе приняли участие: д.х.н., проф. Степанов А.Е., д.б.н., проф. Красильников И.В., д.х.н., проф. Миронов А.Ф.

Заключительное слово диссертанта.

Выборы счетной комиссии: д.х.н., проф. Степанов А.Е., д.х.н., проф. Борисова Е.Я., к.х.н., с.н.с. Лютик А.И. Утверждается единогласно открытым голосованием. Счетная комиссия выдает под расписку бюллетени для тайного голосования и подводит итог голосования.

Председатель счетной комиссии д.х.н. Степанов А.Е. оглашает результаты голосования:

Присутствовали: 19 членов совета из 27 членов совета (д.х.н. по 03.01.06 – 5)

Роздано бюллетеней – 19.

Осталось не розданных бюллетеней – 8.

Оказалось в урне бюллетеней – 19.

Результаты голосования по вопросу о присуждении ученой степени кандидата химических наук Ковалевой Е.В.:

За – 18.

Против – нет.

Недействительных бюллетеней – 1.

Диссертационный совет открытым голосованием утверждает результаты тайного голосования, доложенные счетной комиссией, и постановляет присудить Ковалевой Е.В. ученую степень кандидата химических наук.

Зам. председателя диссертационного совета, доктор химических наук, профессор Миронов А.Ф. поздравляет Ковалеву Е.В. с присуждением ученой степени кандидата химических наук.

Диссертационный совет обсуждает проект заключения по диссертационной работе Ковалевой Е.В. и после внесения замечаний по предложению д.х.н., проф. Себякина Ю.Л. открытым голосованием единогласно принимает заключение по диссертационной работе на тему.

Диссертационный совет отмечает, что на основании выполненных соискателем исследований:

разработан новый методический подход для метода ПЦР в реальном времени для определения остаточной ДНК штамма-продуцента E.coli на примере промышленных серий активной фармацевтической субстанции генно-инженерного инсулина человеческого и генно-инженерного гистона Н1.3 человеческого. Метод заключается в использовании праймеров к геномной ДНК штамма-продуцента и значительно повышает чувствительность методики при анализе на основе праймеров к плазмидной ДНК штамма-продуцента;

предложен нетрадиционный подход по применению чувствительного нестандартного набора для определения проинсулина в активной фармацевтической субстанции генно-инженерного инсулина человеческого методом ИФА и разработан анализ проинсулина в сыворотке и плазме крови. Успешное применение рассматриваемого набора подтверждено данными валидационных испытаний;

доказана возможность применения полученных результатов в качестве общих методических рекомендаций для производителей лекарственных средств на основе генно-инженерных белков;

Теоретическая значимость исследования обоснована тем, что:

доказана целесообразность применения в ПЦР в реальном времени разработанных праймеров к геномной ДНК штамма-продуцента, поскольку праймеры к плазмидной ДНК не позволяют оценить реальное содержание тотальной ДНК;

применительно к проблематике диссертации результативно использован разработанный метод ПЦР в реальном времени с праймерами к геномной ДНК штамма, чувствительность анализа в 30 раз больше соответствующей величины метода с применением праймеров к плазмидной ДНК штамма-продуцента, что и определяет научную новизну исследований диссертанта;

разработаны праймеры к геномной ДНК штамма-продуцента, а именно, к фрагменту 16S РНК E.coli, соответствующие ампликонам с широким диапазоном длин, также разработаны флуоресцентные зонды с различными флуоресцентными красителями и гасителями флуоресценции.

изучены и оптимизированы параметры метода ПЦР в реальном времени, проведено сравнение двух методов с разными системами детекции сигнала, на основе интеркалирующего красителя SYBR GREEN I и флуоресцентных зондов TaqMan;

изложены результаты сравнения показателей разработанной методики ПЦР в реальном времени (SYBR GREEN I) и параметров коммерческого набора при анализе остаточной ДНК штамма - продуцента инсулина и гистона Н1.3 человека;

разработаны и внедрены в опытное биотехнологическое производство Института биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН результаты исследований диссертанта, которые успешно применяют для выявления остаточных ДНК и белков штаммов-продуцентов при контроле качества активных фармацевтических субстанций. На основе результатов данных исследований была разработана производственная документация, стандартные операционные процедуры для методик ПЦР, ПЦР в реальном времени и ИФА;

определены перспективы практического использования полученных методов различными производителями генно-инженерных лекарственных препаратов, для широкого спектра штаммов-продуцентов E.coli;

представлены методические рекомендации по применению набора для ИФА для анализа проинсулина в сыворотке и плазме крови для определения проинсулина в активной фармацевтической субстанции, особенно при анализе субстанций с низким содержанием проинсулина, менее 1 нг/мг;

Оценка достоверности результатов исследования выявила:

результаты получены на сертифицированном и квалифицированном оборудовании на основе независимых серий экспериментов, результаты статистически обработаны, показана воспроизводимость полученных соискателем результатов;

использовано сравнение авторских данных и данных, полученных ранее по рассматриваемой тематике;

использованы современные методики статистической обработки экспериментальных данных;

Личный вклад соискателя состоит в непосредственном участии соискателя в получении исходных данных и научных экспериментах, личном участии соискателя в апробации и технологическом внедрении результатов исследования, обработке и интерпретации экспериментальных данных, выполненных лично автором, подготовке основных публикаций по теме диссертационной работе.

В диссертации решены основные вопросы поставленной научной задачи, она соответствует критерию внутреннего единства, что подтверждается наличием последовательного плана исследования и непротиворечивой методологической платформы и взаимосвязанностью выводов.

Диссертация соответствует п. 9 паспорта специальности 03.01.06 – биотехнология (в том числе бионанотехнологии), поскольку полученные результаты представляют интерес для технологических разработок по внедрению чувствительных и специфичных методов ПЦР в реальном времени и ИФА в биотехнологическое производство жизненно необходимых препаратов на основе генно-инженерных белков, применяемых в терапии диабета и онкологических заболеваний.

На заседании 12 декабря 2016 года диссертационный совет принял решение присудить Ковалевой Екатерине Викторовне учёную степень кандидата химических наук.

При проведении тайного голосования диссертационный совет в количестве 19 человек (из них 5 докторов наук по профилю рассматриваемой диссертации 03.01.06), участвовавших в заседании, из 27 человек, входящих в состав совета, проголосовали: за присуждение учёной степени - 18, против присуждения учёной степени - 0, недействительных бюллетеней – 1.

Зам. председателя диссертационного совета,

д.х.н., проф. Миронов А.Ф.

Ученый секретарь диссертационного

совета, к.х.н., с.н.с. Лютик А.И.

5

Характеристики

Тип файла документ

Документы такого типа открываются такими программами, как Microsoft Office Word на компьютерах Windows, Apple Pages на компьютерах Mac, Open Office - бесплатная альтернатива на различных платформах, в том числе Linux. Наиболее простым и современным решением будут Google документы, так как открываются онлайн без скачивания прямо в браузере на любой платформе. Существуют российские качественные аналоги, например от Яндекса.

Будьте внимательны на мобильных устройствах, так как там используются упрощённый функционал даже в официальном приложении от Microsoft, поэтому для просмотра скачивайте PDF-версию. А если нужно редактировать файл, то используйте оригинальный файл.

Файлы такого типа обычно разбиты на страницы, а текст может быть форматированным (жирный, курсив, выбор шрифта, таблицы и т.п.), а также в него можно добавлять изображения. Формат идеально подходит для рефератов, докладов и РПЗ курсовых проектов, которые необходимо распечатать. Кстати перед печатью также сохраняйте файл в PDF, так как принтер может начудить со шрифтами.

Список файлов диссертации