Отзыв Дергоусова Н.И. (1091774)

Просмтор этого файла доступен только зарегистрированным пользователям. Но у нас супер быстрая регистрация: достаточно только электронной почты!

Текст из файла

Федеральное государственное учреждение «Федеральный исследовательский центр «Фундаментальные основы биотехнологии» Российской академии наук» Институт биохимии им. А.Н. Баха пяд~71 Рмс~и. мжжат,.7еюж~кмйлросажп. д зЗ, сер. з тю: Йзя 954-ол: мир .ьнжььхюл~. етая твнйй! юх~ь ОТЗЫВ на автореферат диссертационной работи Ковалевой Екатерины Викторовны «Разработка н применение методов ПЦР и ИФА дли анализа остаточной ДНК и белков нггаммов-нродуцентов в биофармацевтическпх субстанцнихвз представленной на соискание ученой степени кандпдата химических наук по специальности 03.01.06 — биотехнологии (в том числе бионанотехнологии) Исследование проблем, связанных с безопасностью лекарственных препаратов, основой которых являются белки генно-инженерного происхождения, представляет собой действительно актуальную проблему.

В диссертационной работе Ковалевой Е.В. выполнены задачи по разработке высокочувствительного и специфичного метода для анализа остаточной ДНК штаммов-продуцентов инсулина и гнстона НЕЗ человека и активных фармацевтических субстанциях. Количественное определение проинсулинподобных иммунореактнвных белков является важным параметром контроля качества активной фармацевтической субстанции. Во второй части исследования соискатель проводит сравнительный анализ использования двух коммерческих ИФА наборов для установления содержания проинсулина в субстанции генно-инженерного инсулина человека. Один из этих наборов разработан для выявления проннсулина в фармацевтическом препарате человеческого генно-инженерного инсулина, второй— для определения проинсулнна в плазме и сыворотке крови. Соискателем показана возможность использования набора для определения проинсулнна в плазме крови при проведении анализа генно-инженерного инсулина человека.

Причем использование этого набора рекомендовано для анализа субстанций инсулина с небольшим содержанием проинсулина. Оба исследуемых метода внедрены и опытное биотехнологнческое производство ИБХ РАН, что обуславливает реальную практическую значимость работы диссертанта. Научная новизна диссертационного исследования определяется тем, что разработанный Ковалевой Е.В. метод ПЦР в реальном времени для анализа остаточной ДНК штамма-продуцента Ь.сой с применением интеркалятора Зз'ВК ОБЕЕМ 1 в 30 раз чувствительнее метода, используемого в коммерческом наборе.

Очень корректно избрана стратегия по разработке праймеров к геиомной ДНК штамма, в отличие от принятых ранее принципов разработки праймеров к плазмидной ДНК. Обоснована необходимость применения стадии трипсинолиза для активной фармацевтической субстанции гнстона Н1.3. Удачно подобраны праймеры, позволяющие увеличить эффективность ПЦР в реальном времени. Применение в научной работе валидационных подходов в отношении ИФА полностью обосновано. Поскольку производители коммерческих наборов никогда до конца не раскрывают характеристики своих коммерческих продуктов, именно сравнительная валндация позволяет осуществить корректное сопоставление характеристик двух методик.

При этом автор использовал рекомендации ведущих отечественных и мировых руководств в области производства и контроля качества лекарственных средств. Диссертантом должным образом четко проработаны все основные этапы работы, личный вклад автора не вызывает сомнения, выводы весьма логичны, результаты обсуждены на международных конференциях и опубликованы в ведущих журналах, соответствующих рекомендациям ВАК.

К недостаткам автореферата можно отнести слишком формальный язык в разделе, касакнцемся валидации методики ИФА, таблицы 1 и б имеет громоздкий вид и перегружены информацией, в тексте встречаются опечатки. Несмотря на приведенные замечания, диссертационное исследование производит впечатление цельной, структурированной работы, имеющей несомненное практическое значение не только для конкретного производства, но и в целом для любых производств, применяющих для получения активных фармацевтических субстанций генно-инженерные штаммы Е.сой.

В конечном итоге можно с уверенностью утверждать, что диссертационная работа Ковалевои Е.В. «Разработка и применение методов ПЦР и ИФА для анализа остаточной ДНК и белков штаммов-продуцентов в биофармацевтических субстжщнях» является законченной научно-квалификационной работой и соответствует и.

9 «Положения о порядке присуждения ученых степеней». В исследовании приведены данные по разработке и внедрению в технологию биотехнологического производства ИБХ методов по оценке безопасности субстанций рекомбинантных белков. Результаты имеют несомненное значение для усовершенствования методик контроля качества лекарственных средств. Диссертант Ковалева Е,В, несомненно заслуживает присуждения ученой степени кандидата химических наук по снениальности ОЗ.О1.О6- Бнотехнология (в том числе бионанотехнологии).

Научнмй сотрудник лаборатории инженерной энзимологпи ья Ивановна кандидат химических наук .

Характеристики

Тип файла PDF

PDF-формат наиболее широко используется для просмотра любого типа файлов на любом устройстве. В него можно сохранить документ, таблицы, презентацию, текст, чертежи, вычисления, графики и всё остальное, что можно показать на экране любого устройства. Именно его лучше всего использовать для печати.

Например, если Вам нужно распечатать чертёж из автокада, Вы сохраните чертёж на флешку, но будет ли автокад в пункте печати? А если будет, то нужная версия с нужными библиотеками? Именно для этого и нужен формат PDF - в нём точно будет показано верно вне зависимости от того, в какой программе создали PDF-файл и есть ли нужная программа для его просмотра.

Список файлов диссертации