Главная » Просмотр файлов » Диссертация

Диссертация (1091621), страница 12

Файл №1091621 Диссертация (Гликолипидные биосурфактанты, продуцируемые нефтеокисляющими бактериями рода RHODOCOCCUS при пониженной температуре структура, свойства, роль в процессе биодеградации гидрофобных субстрато) 12 страницаДиссертация (1091621) страница 122018-01-18СтудИзба
Просмтор этого файла доступен только зарегистрированным пользователям. Но у нас супер быстрая регистрация: достаточно только электронной почты!

Текст из файла (страница 12)

Эмульгирующая активность бесклеточнойсреды штамма X5 выше, чем у штамма S67, что коррелирует споверхностной активностью среды. Более высокая поверхностная иэмульгирующая активность среды может способствовать росту биомассына гидрофобном субстрате в виде планктонной культуры.Таблица 12. Индекс эмульгирования бесклеточной среды бактерийродококков X5 и S67, выращенных на н-гексадекане при температурах26оС и 10оС во время стационарной фазы ростаИндекс эмульгирования(E), %E1E24штамм X510 C26oC50633655oштамм S6710 C26oC5439836oВ ряде работ установлено, что индекс эмульгирования бесклеточнойсреды бактерий разных штаммов рода Rhodococcus при росте нагидрофобных субстратах к н-гексадекану, находится в диапазоне от 20 до80% [7, 97, 166, 100] что характерно и для бактерий X5 и S67.При низкой температуре культивирования значительно уменьшаетсяспособностьбактерийS67продуцироватьбиосурфактантывкультуральную среду (биосурфактанты экзотипа).

Следует отметить, чтопри пониженной температуре гексадекан находится в твердом агрегатном73состоянии, и большая часть твердого субстрата локализована наповерхности жидкости. Этим может быть обусловлено незначительноеуменьшение поверхностной и низкое значение эмульгирующей активностисреды при пониженной температуре. Существенную роль в утилизациигидрофобныхсубстратов принизкихтемпературах может игратьувеличение гидрофобности поверхности клеток [5].

Для выяснения ролигидрофобностиклеточнойповерхностибактерийвадаптациинефтеокисляюших бактерий R. erythropolis к низким температурамопределяли этот показатель при 26оС и 10оС.Адгезивная3.3активностьбактерийR.erythropolisX5иR.erythropolis S67Начальнымэтапомпроцессабиотрансформациилюбогогидрофобного соединения является бактериальная адгезия к гидрофобнымсубстратам, тем более к твердым субстратам. Основными механизмамиадаптациимикроорганизмовкусвоениюгидрофобныхсубстратовявляется: повышение степени гидрофобности клеточной поверхности, чтообеспечивает прямой контакт клеток с каплями углеводородов и/илисинтез биосурфактантов, которые способны эмульгировать гидрофобныйсубстрат в ростовой среде и обеспечивать опосредованный контакт клетокс каплями углеводородов.Вомногомстепеньадгезиизависитотсодержанияклеточносвязанных биосурфактантов [84].

При росте на гексадеканестепень гидрофобности клеточной поверхности бактерий S67 составила73% и 88% в экспоненциальной фазе роста при 26оС и 10оС, выше чем убактерий X5 – 63% при 26оС и 73% при 10оС (рис. 17). В работе [165]продемонстрировано, что клетки бактерийR. erythropolisNTU-1,выращенные на гексадекане при 30оС (рН7), обладает гидрофобностью68%, а при рН4 – 84% после 36 часов культивирования. Авторы доказали,что кислотность культуральной среды может повышать гидрофобность74клеточной поверхности или адгезивную способность клеток при росте нагидрофобных субстратах [165]. В нашей работе высокая гидрофобностьклеток штамма S67 способствует их биофлоктуляции и формированиюслоя биомассы на поверхности среды в условиях снижения рН в ходекультивирования, что экспериментально подтверждает предположения,выдвинутые Чангом [165].При пониженной температуре степень гидрофобности клеточнойповерхности увеличивается, что способствует адгезии клеток к твердомусубстрату.

Ранее было показано, что у некоторых штаммов родококковадгезивная активность возрастает на 25 – 30% при снижении температурыкультивирования до 17оС [88]. Авторы предположили, что это являетсяодним из механизмов выживания алканотрофных родококков в холодныхклиматических условиях.Рисунок 17. Степень адгезии клетки бактерий R. erythropolis X5 (а) иS67 (б) при росте на н-гексадекане в условиях температуры 26оС и 10оСВысокая степень гидрофобности клеточной поверхности у обоихштаммов указывает на то, что для этих бактерий характерен прямойконтакт со слоем гидрофобного субстрата и пассивно-диффузный егоперенос в клетку. Следует отметить, что после выхода на стационарнуюфазу роста гидрофобность клеточной поверхности бактерий X5 и S67снижается как при 26˚С, так и при 10˚С.

Это может быть связано с75перераспределением продуцируемых биосурфактантов между клеточнойповерхностью и средой. Мы предполагаем, что гликолипиды, связанныепервоначально с клеточной поверхностью, поступают в культуральнуюсреду,чтоприводиткувеличениюсодержаниявнеклеточныхгликолипидов в стационарной фазе роста бактерий (рисунок 15, кривая 2).Сравнение степени гидрофобности клеточной поверхности и содержаниявнеклеточных биосурфактантов позволило выявить общую тенденцию куменьшению гидрофобности при увеличении количества продуцируемыхбиосурфактантов в культуральную среду. Авторы [84] наблюдали такуюзависимость при росте бактерий рода Gordonia на н-гексадекане.Полученные нами результаты согласуются с гипотезой о том, чтомикроорганизмы,образующиебиосурфактанты,способныизменятьповерхностные свойства клетки [9].

Таким образом, клеточносвязанныегликолипиды могут способствовать адгезии бактерий на гидрофобныхсубстратах, что важно на первой стадии культивирования, когда в средееще отсутствует продукты частичной деградации н-гексадекана ивторичныеметаболитымикроорганизмов.Сдругойстороны,гидрофобность клеточной поверхности обеспечивается присутствием вклеточной стенке не только гликолипидов.

Известно, что состав клеточныхлипидов играет важную роль в адаптации бактерий к неблагоприятнымусловиям внешней среды [121]. Уникальность актинобактерий состоит втом, что внешний липидный барьер проницаемости для гидрофобныхсубстратоввклеткуунихформируютвысокомолекулярныегидроксикислоты - миколовые кислоты и их эфиры с трегалозой, которыеспособствуютпроникновениюуглеводородоввклеткупассивно-диффузным путем, и увеличивается общее содержание липидов.

Крометого,припониженнойтемпературепроисходитизменениежирнокислотного состава мембранных липидов. Для выяснения такихизменений у бактерий R. erythropolis S67 и R. erythropolis X5 при76пониженнойтемпературеростаопределялиобщеесодержаниеижирнокислотный состав липидов бактерий.3.4 Общее содержание и жирнокислотный состав липидов бактерийи внеклеточных липидов3.4.1 Выделение и характеристика суммарных липидов бактерийМембранные липиды и липидные включения (см. п.3.4) являютсясоставной частью общих липидов клеток. Для выявления роли липидов вадаптации родококков к пониженным температурам окружающей средыисследовали содержание и жирнокислотный состав липидов бактерий,выращенных на гексадекане при 26оС и 10оС в сравнении.

Липидыэкстрагировали из биомассы бактерий по схеме (рис. 18).Избыток гексадекана экстрагировали гексаном из культуральнойсреды с бактериями, после чего отделяли биомассу микроорганизмовцетрифугированием. К осадку биомассы добавляли смесь хлороформа сметанолом для экстрагирования липидов. Экстракцию повторяли дважды,затем отделяли воду из экстракта путем добавления избытка хлороформа.Высушенный от воды хлороформный экстракт липидов упаривали нароторном испарители и анализировали.77Рисунок 18. Схема выделения липидов из биомассы бактерийКоличество накопленных липидов у обоих штаммов бактерий,выращенных при 10˚С значительно выше, чем у бактерий, культивируемыхпри 26˚С (рис.19). Общее содержание клеточных липидов в биомассештамма X5 выше, чем в биомассе штамма S67 как при 26оС, так и при10оС. Максимальное значение составило 169 и 115мг/г(биомассы) (X5), 145 и94мг/г(биомассы) (S67) в экспоненциальной фазе роста при 10оС и 26оС,соответственно.

Другие исследователи также продемонстрировали, чтопсихотрофныеRhodococcusадаптировалиськроступринизкойтемпературе за счет увеличения содержания липидов и уменьшения ихстепени насыщения для сохранения оптимальной текучести мембран78[110]. Полученные результаты согласуются с общим механизмомвыживания бактерий в холодных условиях за счет увеличения липидов вклетках бактерий, которые служат для запасания энергии и защиты клетокот замораживания.Рисунок 19. Содержание общих липидов бактерий R. erythropolis X5 (а)и R.erythropolis S67 (б), выращенных на н-гексадекане при 26оС и 10оС.Липидныйэкстрактохарактеризовалинафосфолипиды,гликолипиды и ненасыщенные липиды методом ТСХ с помощьюспецифических реагентов (рис. 20).Рисунок 20.

Характеристики

Список файлов диссертации

Гликолипидные биосурфактанты, продуцируемые нефтеокисляющими бактериями рода RHODOCOCCUS при пониженной температуре структура, свойства, роль в процессе биодеградации гидрофобных субстрато
Документы
Свежие статьи
Популярно сейчас
Зачем заказывать выполнение своего задания, если оно уже было выполнено много много раз? Его можно просто купить или даже скачать бесплатно на СтудИзбе. Найдите нужный учебный материал у нас!
Ответы на популярные вопросы
Да! Наши авторы собирают и выкладывают те работы, которые сдаются в Вашем учебном заведении ежегодно и уже проверены преподавателями.
Да! У нас любой человек может выложить любую учебную работу и зарабатывать на её продажах! Но каждый учебный материал публикуется только после тщательной проверки администрацией.
Вернём деньги! А если быть более точными, то автору даётся немного времени на исправление, а если не исправит или выйдет время, то вернём деньги в полном объёме!
Да! На равне с готовыми студенческими работами у нас продаются услуги. Цены на услуги видны сразу, то есть Вам нужно только указать параметры и сразу можно оплачивать.
Отзывы студентов
Ставлю 10/10
Все нравится, очень удобный сайт, помогает в учебе. Кроме этого, можно заработать самому, выставляя готовые учебные материалы на продажу здесь. Рейтинги и отзывы на преподавателей очень помогают сориентироваться в начале нового семестра. Спасибо за такую функцию. Ставлю максимальную оценку.
Лучшая платформа для успешной сдачи сессии
Познакомился со СтудИзбой благодаря своему другу, очень нравится интерфейс, количество доступных файлов, цена, в общем, все прекрасно. Даже сам продаю какие-то свои работы.
Студизба ван лав ❤
Очень офигенный сайт для студентов. Много полезных учебных материалов. Пользуюсь студизбой с октября 2021 года. Серьёзных нареканий нет. Хотелось бы, что бы ввели подписочную модель и сделали материалы дешевле 300 рублей в рамках подписки бесплатными.
Отличный сайт
Лично меня всё устраивает - и покупка, и продажа; и цены, и возможность предпросмотра куска файла, и обилие бесплатных файлов (в подборках по авторам, читай, ВУЗам и факультетам). Есть определённые баги, но всё решаемо, да и администраторы реагируют в течение суток.
Маленький отзыв о большом помощнике!
Студизба спасает в те моменты, когда сроки горят, а работ накопилось достаточно. Довольно удобный сайт с простой навигацией и огромным количеством материалов.
Студ. Изба как крупнейший сборник работ для студентов
Тут дофига бывает всего полезного. Печально, что бывают предметы по которым даже одного бесплатного решения нет, но это скорее вопрос к студентам. В остальном всё здорово.
Спасательный островок
Если уже не успеваешь разобраться или застрял на каком-то задание поможет тебе быстро и недорого решить твою проблему.
Всё и так отлично
Всё очень удобно. Особенно круто, что есть система бонусов и можно выводить остатки денег. Очень много качественных бесплатных файлов.
Отзыв о системе "Студизба"
Отличная платформа для распространения работ, востребованных студентами. Хорошо налаженная и качественная работа сайта, огромная база заданий и аудитория.
Отличный помощник
Отличный сайт с кучей полезных файлов, позволяющий найти много методичек / учебников / отзывов о вузах и преподователях.
Отлично помогает студентам в любой момент для решения трудных и незамедлительных задач
Хотелось бы больше конкретной информации о преподавателях. А так в принципе хороший сайт, всегда им пользуюсь и ни разу не было желания прекратить. Хороший сайт для помощи студентам, удобный и приятный интерфейс. Из недостатков можно выделить только отсутствия небольшого количества файлов.
Спасибо за шикарный сайт
Великолепный сайт на котором студент за не большие деньги может найти помощь с дз, проектами курсовыми, лабораторными, а также узнать отзывы на преподавателей и бесплатно скачать пособия.
Популярные преподаватели
Добавляйте материалы
и зарабатывайте!
Продажи идут автоматически
6489
Авторов
на СтудИзбе
303
Средний доход
с одного платного файла
Обучение Подробнее