Главная » Просмотр файлов » Диссертация

Диссертация (1091621), страница 15

Файл №1091621 Диссертация (Гликолипидные биосурфактанты, продуцируемые нефтеокисляющими бактериями рода RHODOCOCCUS при пониженной температуре структура, свойства, роль в процессе биодеградации гидрофобных субстрато) 15 страницаДиссертация (1091621) страница 152018-01-18СтудИзба
Просмтор этого файла доступен только зарегистрированным пользователям. Но у нас супер быстрая регистрация: достаточно только электронной почты!

Текст из файла (страница 15)

30а). Поскольку разница вмассах между соседними сигналами составляет 28 Да, что соответствуетмолярной массе двух метиленовых групп (-CH2-), можно предположить,что эти три вещества являются гомологами. Интенсивность пика m/z 899почти в 2,5 раза и 10 раз больше, чем интенсивность сигналов m/z 871 и m/z927, соответственно. Молекулярные массы ионов в масс-спектрах,полученных в условиях регистрации отрицательных ионов, соответствуюттем же молекулярным массам соединений (848, 876 и 904Да) (рис. 30б).97Рисунок 30. Масс-спектры аддуктов гликолипида, выделенного изнеочищенных биосурфактантов методом колоночной хроматографии, вусловиях положительных (а) и отрицательных (б) зарядов.Ранее в нашем научном коллективе выделили гликолипидныйкомпонент из липидного экстракта среды бактерий R.erythropolys X5,выращенных на н-гексадекане при 26оС.

Масс-спектр этого соединения [7]был аналогичен масс-спектру, полученному нами. На основе сравнения слитературнымиданнымибылосделанопредположение,чтоэтоткомпонент представляет собой смесь гомологов тетраэфира трегалозы,содержащих остатки янтарной, октановой и декановой кислот.Анализ MC/MC спектров позволил нам рассмотреть структурусоединений более подробно. В MC/MC спектре натриевого аддукта[M+Na]+ с m/z 899 наблюдаются пики c m/z 799, m/z 781, m/z 755, m/z 727,которые соответствуют соединениям, образовавшимся путем отщепленияфрагментов ангидрида янтарной кислоты (-100Да), янтарной (-118Да),октановой (-144Да) и декановой кислот (-172Да), соответственно (рис. 31).Ион с m/z 583 соответствует соединению, образованному после разрыва98гликозидной связи в трегалолипиде, в результате чего отщепляетсяфрагмент ангидрида глюкозы, ацилированной декановой кислотой (-316Да).

Это предполагает наличие у одного глюкопиранозного кольцаединственного остатка декановой кислоты, а у второго - по одному остаткуянтарной, октановой и декановой кислоты.Рисунок 31. Фрагментация в положении иона [M+Na]+ с m/z 899 (а –исходные масс-спектры, б – с формулами)В результате фрагментации иона [M+Na]+ с m/z 871 в спектре99МС/МС появились пики с m/z 771, m/z 753, m/z 727, m/z 699 (рис. 32),которые образовались путем отщепления тех же фрагментов, что и прираспаде молекулярного иона с m/z 899.

Однако вместо пика с m/z 583появился пик с m/z 555, который соответствует глюкопиранозе,ацилированнойянтарнойидвумяоктановымикислотами.Этоподтверждает предположение о том, что оба трегалолипида являютсягомологами.Рисунок 32. Фрагментация в положении иона [M+Na]+ с m/z 871 (а –исходные данные, б – схема фрагментации)100В работе [63] описано, что при культивировании на н-гексадеканебактерии R.

wratislaviensis при 28 С продуцировали два тетраэфиратрегалозы, которые на хроматограмме проявлялись в виде одной полосы сRf 0,39 в системе дихлорметан – метанол – вода (2.6:0.6:0.02). Массспектрометрия с ионизацией электрораспылением в положительномрежиме показала наличие двух соединений, которым соответствовалиионы [M+Na]+ с m/z 899 и 871. Как видно, эти значения m/z совпадают сполученными нами значениями. Фрагментация этих пиков, приведѐнная вработе [64], аналогична фрагментации наших соединений. Использованиев той же работе ЯМР-анализа позволило более точно установитьраспределение остатков карбоновых кислот в молекулах гликолипида.

Утрегалолипида массой 876Да одно глюкопиранозное кольцо ацилированоостатком декановой кислоты в положении С-2', а другое - остаткомянтарной в положении С-2 или С-4, остатком декановой и остаткомоктановой кислот в положения С-2, С-3 или С-4. Трегалолипид массой 848Да отличался тем, что положения С-2, С-3 или С-4 были ацилированыдвумяостаткамиоктановойкислоты.Соединениясаналогичнойструктурой были обнаружены при анализе гликолипидов, продуцируемыхштаммом Rhodococcus sp. MS11 при росте на гексадекане при 20 С. Дляэтих соединений была продемонстрирована идентичная фрагментацияионов [M+Na]+ сm/z 899 и 871, а ЯМР-анализ подтвердил наличиезаместителей в положениях С-2, С-3, С-4 и С-2' [23].

Сравниваяполученные нами результаты и результаты предшествующих работ, можнозаключить,чтоосновнымибиосурфактантами,продуцируемымиштаммами X5 и S67 выращенных на н-гексадекане как при 26оС, так и при10оС являются 2,3,4-сукцинил-октаноил-деканоил-2'-деканолитрегалозой и2,3,4-сукцинил-диоктаноил-2'-деканолитрегалозой.Дваостальныхсигналысm/z843,927обладаютнизкойинтенсивностью, и их фрагментацию не проводили. Однако, по аналогии с101предыдущим анализом можно заключить, что ионы [M+Na]+ с m/z 843 иm/z 927 соответствуют тетраэфиру трегалозы с тремя остатками октановойкислоты – 2,3,4-сукцинил-диоктаноил-2'-октаноилтрегалозе и с тремяостаткамидекановойкислоты–2,3,4-сукцинил-дидеканоил-2'-деканоилитрегалозе.В МС/МС спектре депротонированного иона [M-Н]- с m/z 875наблюдаются пики c m/z 775, m/z 631, m/z 603 (рис.

33), а в МС/МС спектреиона [M - Н]- с m/z 847 – пики с m/z 747, m/z 603, m/z 575 (рис. 34), которыесоответствуют соединениям, образовавшимся путем отщепления тех жефрагментов, как в условиях регистрации положительных ионов.Рисунок 33. Фрагментация в положении иона [M-H]- с m/z 875102Рисунок 34.

Фрагментация в положении иона [M-H]- с m/z 847Этоподтверждаетнашепредположениеотом,чтообатрегалолипида являются гомологами: 2,3,4 сукцинил-диоктаноил-2’октаноилтрегалозаи2,3,4-сукцинил-октаноил-деканоил-2’-октаноилтрегалозаДляподтвержденияпредложеннойструктурысукцинилтрегалолипидов проводили анализ жирнокислотного состававыделенного соединения после метанолиза исследуемых трегалолипидов.В результате ГХ/МС анализа метиловых эфирных жирных кислотвыявлено, что единственными жирными кислотами являются октановая идекановая кислоты. Таким образом, гликолипидный компонент схроматографической подвижностью Rf 0,35 представляет собой гомологитетраэфира трегалозы, содержащие один остаток янтарной кислоты и триостатка жирных кислот (октановой и декановой) (табл. 18).Таблица 18. Жирнокислотный состав сукцинилтрегалолипидов,продуцируемых бактериями R.erythropolis X5 и R.erythropolis S67[M+Na]+МR2R2’R3R4843820C4C8C8C8871848C4C8C8C10899876C4C10C8C10927904C4C10C10C10103Таким образом, нами впервые показано, что качественный составвыделяемых Rhodococcus биосурфактантов при росте на н-гексадекане вусловияхпониженнойтемпературы10°С,соответствуетсоставубиосурфактантов, продуцируемых родококками при 26°С.

Это означает,что важную роль в потреблении гидрофобных субстратов бактерияминефтедеструкторами играют гликолипидные биосурфактанты независимоот агрегатного состояния субстрата. Биосурфактанты способствуютдоступности н-гексадекана¸ находящегося как в жидком, так и в твердомсостоянии,дляутилизацииповерхностно-активнымимикроорганизмами.иЭтообусловленоэмульгирующимисвойствамисукцинилтрегалолипидов.3.7.

Характеристика сукцинилтрегалолипидов как сурфактантовОсновныефизико-химическиесвойствавыделеннойсмесигомологов сукцинилтрегалолипидов определяли на основе их способностиснижать поверхностное натяжение водного раствора и ресуспендироватьдве несмешивающиеся жидкости. Анализ зависимости поверхностногонатяжения раствора от концентрации трегалолипидов показал, что приувеличении концентрации вещества происходит снижение поверхностногонатяжения водного раствора, что характерно для поверхностно-активныхвеществ.3.7.1 Критическая концентрация мицеллообразованияКритическую концентрацию мицеллообразования (ККМ) смесисукцинилтрегалолипидов определяли по точке перегиба графическойзависимости поверхностного натяжения от концентрации биосурфактанта.При этом считали, что основным компонентом в смеси является 2,3,4сукцинил-октаноил-деканоил-2’-деканоилтрегалозаЗначениеККМсоставило4.1×10–5Мповерхностном натяжении 27мН/м (рис.

35).104(32мг/л)(М=876г/моль).припостоянномРисунок 35. Зависимость поверхностного натяжения от концентрациитрегалолипидов в водном растворе.Полученные нами результаты соответствуютданным другихавторов, изучавших свойства трегалолипидов (табл.19). Так, в работе [71]продемонстрировано, что трегалолипиды, продуцируемые бактериямирода Rhodococcus, способны снижать поверхностное натяжение водныхраствор с 72мН/м до значений в интервале 19 – 43мН/м, а ККМтрегалолипидов находится в интервале 0,7 – 37мг/л.Таблица19.Физико-химическиесвойстватрегалолипидов,продуцируемых бактериями рода RhodococcusБактериипродуцентыБиосурфактантыдикориномиколаты трегалозымонокориномиколаты трегалозы2-2’,3,4тетраэфирытрегалозыR.erythropolis тетраэфирыDSM 51T7трегалозыR.ruberгликолипидыR.erythropolisDSM 43215R.erythropolisDSM 43215R.erythropolisDSM 43215Поверхностноенатяжение(мН/м)36Межфаз ККМное(мг/л)натяжение(мН/м)174Источник[101]32144[101]26<115[101]27,9537[25]26,80.954[98]105IEGM235R.wratislavientisBN38Rhodococcussp.

H13ARhodococcussp. SD-74R.ruber 725R.erythropolisATCC4277Rhodococcussp. PML026R opacus 1CPсукцинилтетраэфирытрегалозыоктаацилтрегалозы24,41.35[63]Не опр.0.021.5[60]19Не опр.5,6x 10-6M[26]29,5Не опр.Не опр.[66]38Не опр.Не опр.[105]29Не опр.250[27]Не опр.Не опр.[56]сукцинилтрегалолипидыорганическийэкстракторганическийэкстракттрегалолипидыдимиколатытрегалозыИндекс эмульгирования (E24) сукцинилтрегалолипидов, которыйопределяли в системе с н-гексадеканом, составил 55%. Ившина соавторами [59] определяли E24 биосурфактантов, продуцированныхбактериями R. erythropolis, R. longus, R. opacus и R. ruber, и получилимаксимальное значение 62,5%. Тетраэфиры трегалозы бактерий R.wratislaviensis в зависимости от гидрофобных веществ, смешиваемых сводой,проявлялиE24от23%до69%[63].Такимобразом,сукцинилтрегалолипиды, продуцируемые бактериями штаммов X5 и S67,обладают высокой поверхностной и эмульгирующей активностью, чтохарактерно для бактерий рода Rhodococcus.Активность биосурфактантов можно охарактеризовать физикохимическими показателями – минимальным значением поверхностногонатяжения на границе раздела «жидкость – воздух» (σмин), максимальнымколичеством молекул, адсорбируемых на единице площади раздела фаз(Г),минимальнойплощадью,занимаемойодноймолекулойбиосурфактанта (Sмин) и свободной энергией мицеллообразования (∆G).Основные физико-химические характеристики сукцинилтрегалолипидногобиосурфактанта были определены (табл.

Характеристики

Список файлов диссертации

Гликолипидные биосурфактанты, продуцируемые нефтеокисляющими бактериями рода RHODOCOCCUS при пониженной температуре структура, свойства, роль в процессе биодеградации гидрофобных субстрато
Документы
Свежие статьи
Популярно сейчас
Зачем заказывать выполнение своего задания, если оно уже было выполнено много много раз? Его можно просто купить или даже скачать бесплатно на СтудИзбе. Найдите нужный учебный материал у нас!
Ответы на популярные вопросы
Да! Наши авторы собирают и выкладывают те работы, которые сдаются в Вашем учебном заведении ежегодно и уже проверены преподавателями.
Да! У нас любой человек может выложить любую учебную работу и зарабатывать на её продажах! Но каждый учебный материал публикуется только после тщательной проверки администрацией.
Вернём деньги! А если быть более точными, то автору даётся немного времени на исправление, а если не исправит или выйдет время, то вернём деньги в полном объёме!
Да! На равне с готовыми студенческими работами у нас продаются услуги. Цены на услуги видны сразу, то есть Вам нужно только указать параметры и сразу можно оплачивать.
Отзывы студентов
Ставлю 10/10
Все нравится, очень удобный сайт, помогает в учебе. Кроме этого, можно заработать самому, выставляя готовые учебные материалы на продажу здесь. Рейтинги и отзывы на преподавателей очень помогают сориентироваться в начале нового семестра. Спасибо за такую функцию. Ставлю максимальную оценку.
Лучшая платформа для успешной сдачи сессии
Познакомился со СтудИзбой благодаря своему другу, очень нравится интерфейс, количество доступных файлов, цена, в общем, все прекрасно. Даже сам продаю какие-то свои работы.
Студизба ван лав ❤
Очень офигенный сайт для студентов. Много полезных учебных материалов. Пользуюсь студизбой с октября 2021 года. Серьёзных нареканий нет. Хотелось бы, что бы ввели подписочную модель и сделали материалы дешевле 300 рублей в рамках подписки бесплатными.
Отличный сайт
Лично меня всё устраивает - и покупка, и продажа; и цены, и возможность предпросмотра куска файла, и обилие бесплатных файлов (в подборках по авторам, читай, ВУЗам и факультетам). Есть определённые баги, но всё решаемо, да и администраторы реагируют в течение суток.
Маленький отзыв о большом помощнике!
Студизба спасает в те моменты, когда сроки горят, а работ накопилось достаточно. Довольно удобный сайт с простой навигацией и огромным количеством материалов.
Студ. Изба как крупнейший сборник работ для студентов
Тут дофига бывает всего полезного. Печально, что бывают предметы по которым даже одного бесплатного решения нет, но это скорее вопрос к студентам. В остальном всё здорово.
Спасательный островок
Если уже не успеваешь разобраться или застрял на каком-то задание поможет тебе быстро и недорого решить твою проблему.
Всё и так отлично
Всё очень удобно. Особенно круто, что есть система бонусов и можно выводить остатки денег. Очень много качественных бесплатных файлов.
Отзыв о системе "Студизба"
Отличная платформа для распространения работ, востребованных студентами. Хорошо налаженная и качественная работа сайта, огромная база заданий и аудитория.
Отличный помощник
Отличный сайт с кучей полезных файлов, позволяющий найти много методичек / учебников / отзывов о вузах и преподователях.
Отлично помогает студентам в любой момент для решения трудных и незамедлительных задач
Хотелось бы больше конкретной информации о преподавателях. А так в принципе хороший сайт, всегда им пользуюсь и ни разу не было желания прекратить. Хороший сайт для помощи студентам, удобный и приятный интерфейс. Из недостатков можно выделить только отсутствия небольшого количества файлов.
Спасибо за шикарный сайт
Великолепный сайт на котором студент за не большие деньги может найти помощь с дз, проектами курсовыми, лабораторными, а также узнать отзывы на преподавателей и бесплатно скачать пособия.
Популярные преподаватели
Добавляйте материалы
и зарабатывайте!
Продажи идут автоматически
6390
Авторов
на СтудИзбе
307
Средний доход
с одного платного файла
Обучение Подробнее