Главная » Просмотр файлов » Диссертация

Диссертация (1091621), страница 11

Файл №1091621 Диссертация (Гликолипидные биосурфактанты, продуцируемые нефтеокисляющими бактериями рода RHODOCOCCUS при пониженной температуре структура, свойства, роль в процессе биодеградации гидрофобных субстрато) 11 страницаДиссертация (1091621) страница 112018-01-18СтудИзба
Просмтор этого файла доступен только зарегистрированным пользователям. Но у нас супер быстрая регистрация: достаточно только электронной почты!

Текст из файла (страница 11)

erythropolis X5 и R. erythropolis S67 выращивали нагидрофобных(глюкоза)(дизельноесубстратахитопливо,н-гексадекан)определялиигидрофильномсравнительнуюспособностьмикроорганизмов продуцировать биосурфактанты. Для этого использовалискрининговыйметод,основанныйнаопределениисурфактантнойактивности культуральной среды (поверхностной и эмульгирующейактивности бесклеточного супернатанта) через 6 суток роста биомассы при26оС и через 12 суток при 10оС. Поверхностную активность определяли,как способность продуцируемых биосурфактантов снижать поверхностноенатяжение культуральной среды на границе с воздухом (табл.

9, 10). Методопределения эмульгирующей активности основан на измерении высотыобразующейся эмульсии при добавлении бесклеточной среды, содержащейбиосурфактанты, к двухфазной системе н-гексадекан – вода [165].Полученные результаты представлены в таблицах 9, 10.Таблица 9. Показатели сурфактантной активности бесклеточной средыбактерий R. erythropolis X5 при росте на разных субстратахФизикохимическиепоказателиИндексэмульгированияE24, %Поверхностноенатяжение, мН/мПосле 6 сутоккультивирования при 26оСПосле 12 сутоккультивирования при 10оСнгексадекан глюкозаглюкозаДТ0205455402767ДТнгексадекан0436635532Таблица 10. Показатели сурфактантной активности бесклеточной средыбактерий R.

erythropolis S67 при росте на разных субстратахПосле 6 сутоккультивирования при 26оСнглюкоза ДТ гексадеканФизикохимическиепоказателиИндексэмульгированияE24, %Поверхностноенатяжение, мН/мПосле 12 сутоккультивирования при 10оСнглюкоза ДТ гексадекан01836038584527645842При росте на глюкозе происходит незначительное снижениеповерхностного натяжения среды пи полном отсутствии эмульгирующейактивности независимо от температуры культивирования обоих штаммовбактерий.

В присутствии дизельного топлива как источника углероданаблюдаетсяболееэффективноеобразованиевнеклеточныхбиосурфактантов, что приводит к снижению поверхностного натяжениясреды с 72 мН/м до 40 – 45мН/м при температуре культивированиямикроорганизмов26оСи55–58мН/м–при10оС.Наилучшуюсурфактантную активность бесклеточной среды наблюдали при ростебактерийнан-гексадекане,причембактерииR.erythropolysX5продуцировали биосурфактанты более эффективно, в том числе припониженной температуре.

Для дальнейших исследований использовали нгексадекан в качестве модельного субстрата для изучения способностибактерий продуцировать гликолипидные биосурфактанты при росте нагидрофобных субстратах в условиях пониженных температур длядальнейшейразработкибиотехнологийочисткинефтезагрязненныхтерриторий в холодном климате.3.2.Влияниетемпературынапродуцировать биосурфактанты68способностьродококковДля выяснения взаимосвязи между образованием биосурфактантов ифазамиростабактерийопределялиповерхностноенатяжениеисодержание сахаров в бесклеточной среде каждые 24 часа.

В ходекультивирования родококков на н-гексадекане при 26оС наблюдалипоявление молочной эмульсии в среде бактерий R. erythropolis X5, этаэмульсияраспределяласьравномерно по всему объемусреды,иеемутностьувеличиваласьпридальнейшем культивированиив течении 6 суток, т.е. бактериирастут в виде планктоннойкультуры (рисунок 15а). В товремякак,наповерхностикультуральной среды бактерийR.erythropolisформироваласьS67пленкаужечерез 24 часа (рисунок 15в),Рисунок 15.

Физиологическое поведениеродококков при росте на н-гексадекане: а, в культуральная среда бактерий X5 и S67 при26оС; б, г - культуральная среда бактерий X5и S67 при 10оС.суспензия в объеме среды была менее плотная, чем у R. erythropolis X5.Следует отметить, что у родококков S67 наблюдается уменьшение рНкультуральной среды от 7 до 4 (в конце эксперимента), что не характернодля бактерий X5.

Подобный эффект изменения рН в процессебиодеградации гексадекана бактериями R. erythropolis NTU-1 наблюдалидругие исследователи [165]. Они предположили, что образованиебиопленки и микроколоний может защищать клетки от экстремальныхусловий среды, таких как низкое значение рН.На рисунке 16 представлена зависимость между динамикой ростабактерий R. erythropolis X5 и R. erythropolis S67 на н-гексадекане и физикохимическими показателями среды. Численность бактерий в жидкой среде69определяли турбидиметрическим методом по изменению мутности среды впроцессе роста биомассы. Бактерии X5 адаптировались и переходили вэкспоненциальнуюстадиюростачерезсуткикультивирования,интенсивный рост продолжался в течение 3-х суток, максимальноезначение оптической плотности бактериальной суспензии составило 3,0(рисунок 16а, кривая.1).

В то же время в культуральной среде бактерийS67наблюдалосьпостепенноеувеличениеоптическойплотности,максимальное значение достигалось на 5-е сутки и составило 0,5 (рисунок16в, кривая 1). Следует отметить, что при этом не удается учитыватьбактерии, образовавшие слой на поверхности культуральной среды, что иобъясняет такой разный результат для двух штаммов и соответствуетфизиологическому поведению бактерий: образование молочной суспензииу R.

erythropolis X5 и формирование биопленки на поверхности у R.erythropolis S67.Рисунок 16. Динамика роста (1), изменение содержания трегалолипидов иповерхностного натяжения (3) культуральной среды бактерий штаммов X5 и S67 приросте на н-гексадекане при 26оС (а, в) и 10оС (б, г)Активностьродококкамивисодержаниекультуральнуюбиосурфактантов,среду70оценивалипродуцируемыхпоизменениюповерхностного натяжения и увеличению количества сахаров на разныхстадиях роста микроорганизмов. В ходе культивирования бактерий нагексадекане при 26оС наблюдали резкое уменьшение поверхностногонатяжениябесклеточногосупернатантадо27мН/мвконцеэкспоненциальной фазы – начале стационарной фазы роста для обоихштаммов родококков (рисунок 16а, в - кривая 3). Это значение сохранялосьна протяжении всего времени роста микроорганизмов, несмотря наразличие в физиологическом поведении (рисунок 16а, в - кривая 1).

Вместесо снижением поверхностного натяжения увеличивалось содержаниегликолипидов в бесклеточной среде. После 6 суток культивированияродококков содержание гликолипидов составило около 300 мг/л для обоихштаммов (рисунок 16а, в кривая 2). При определенном содержаниигликолипидов в среде (около 120мг/л) поверхностное натяжение перестаетснижаться,вероятно,из-задостижениякритическойконстантымицеллообразования (ККМ). Следует отметить, что такое же содержаниетрегалолипидов(300мг/л)вбесклеточномсупернатантеприповерхностном натяжении 29мН/м было получено Вайтом в ходекультивирования Rhodococcus sp.

PLM026 на подсолнечном масле при19оС [27]. Полученные нами результаты согласуются с данными другихавторов по поверхностной активности культуральной среды бактерийродококков при росте на гидрофобных субстратах (таблица 11).Таблица 11. Значение поверхностного натяжения среды прикультивировании бактерий рода Rhodococcus в жидкой минеральной средеМикроорганизмы ОбразецRhodococcussp.51T7R. erythropolisбесклеточнаякультуракультуральная среда“R. longus”культуральная средаR.

opacusкультуральная средаПоверхностное Субстратнатяжение,мН/м30-35н-алкан(С12-С16)27,1нгексадекан27,2нгексадекан26,5нгексадекан71Источники[25][24]R. ruberкультуральная среда27,4R.erythropolisEK-1R.erythropolis3C-9R.wratislaviensisBN38Rhodococcus sp.MS11R. ruber Z25бесклеточнаякультуракультуральная среда30-39культуральная среда28,6культуральная среда< 29липидный экстракт29,5RhodococcusS26sp. бесклеточнаякультура33,432нгексадеканнгексадеканнгексадеканнгексадеканн-алканнгексадеканнгексадекан[103][65][63][23][66][7]В ходе культивировании родококков при 10оС, когда н-гексадеканнаходится в твердом агрегатном состоянии, наблюдали постепенноеобразование суспензии по всему объему среды и тонкую пленку награнице с твердым гексадеканом (рисунок 15б, 1г).

Значения оптическойплотности культуральной среды бактерий X5 больше, чем у бактерий S67,как и при 26оС. Вместе с ростом бактерий на гексадекане увеличиваетсясодержание сахаров в культуральной среде, максимальное значениекоторого достигало 100 мг/л для обоих штаммов после 6 суток. При этомповерхностное натяжение постепенно снижается до минимальногозначения только на 12 сутки: 32мН/м и 45мН/м для штаммов X5 и S67,соответственно (рисунок 16б, г-кривая 1).

Это свидетельствует оспособности бактерийR. erythropolis продуцировать внеклеточныебиосурфактанты даже при пониженной температуре. В работе [4]продемонстрировано, что арктические бактерии Rhodococcus при росте натетрадекане при 15оС продуцируют биосурфактанты, которые способныснижать поверхностное натяжение культуральной среды в интервале от 66до 27мН/м.

Другие авторы показали, что поверхностное натяжение средыпри росте на керосине морских бактерий Rhodococcus sp. LF13 и LF22 вусловиях пониженной температуры (13оС) снижалось до 37 и 30мН/м,соответственно [3]. Поверхностное натяжение культуральной среды72бактерий Rhodococcus sp. Q15, выращенных на дизельном топливе при 5оС,снизилось до 40мН/м [110]. Таким образом, результаты, полученные нами,согласуются с данными других авторов о способности бактерий родаRhodococcusпродуцироватьбиосурфактантыприпониженныхтемпературах.Кроме поверхностной активности одним из главных физикохимических показателей культуральной среды является эмульгирующаяактивность, которую определяют по индексу эмульгирования через 1 час(Е1) или через 24 часа (E24). При температуре культивирования 26оС E24бесклеточной среды бактерий штамма X5 к гексадекану составил 55%, адля штамма S67–36% (табл. 12).

Характеристики

Список файлов диссертации

Гликолипидные биосурфактанты, продуцируемые нефтеокисляющими бактериями рода RHODOCOCCUS при пониженной температуре структура, свойства, роль в процессе биодеградации гидрофобных субстрато
Документы
Свежие статьи
Популярно сейчас
А знаете ли Вы, что из года в год задания практически не меняются? Математика, преподаваемая в учебных заведениях, никак не менялась минимум 30 лет. Найдите нужный учебный материал на СтудИзбе!
Ответы на популярные вопросы
Да! Наши авторы собирают и выкладывают те работы, которые сдаются в Вашем учебном заведении ежегодно и уже проверены преподавателями.
Да! У нас любой человек может выложить любую учебную работу и зарабатывать на её продажах! Но каждый учебный материал публикуется только после тщательной проверки администрацией.
Вернём деньги! А если быть более точными, то автору даётся немного времени на исправление, а если не исправит или выйдет время, то вернём деньги в полном объёме!
Да! На равне с готовыми студенческими работами у нас продаются услуги. Цены на услуги видны сразу, то есть Вам нужно только указать параметры и сразу можно оплачивать.
Отзывы студентов
Ставлю 10/10
Все нравится, очень удобный сайт, помогает в учебе. Кроме этого, можно заработать самому, выставляя готовые учебные материалы на продажу здесь. Рейтинги и отзывы на преподавателей очень помогают сориентироваться в начале нового семестра. Спасибо за такую функцию. Ставлю максимальную оценку.
Лучшая платформа для успешной сдачи сессии
Познакомился со СтудИзбой благодаря своему другу, очень нравится интерфейс, количество доступных файлов, цена, в общем, все прекрасно. Даже сам продаю какие-то свои работы.
Студизба ван лав ❤
Очень офигенный сайт для студентов. Много полезных учебных материалов. Пользуюсь студизбой с октября 2021 года. Серьёзных нареканий нет. Хотелось бы, что бы ввели подписочную модель и сделали материалы дешевле 300 рублей в рамках подписки бесплатными.
Отличный сайт
Лично меня всё устраивает - и покупка, и продажа; и цены, и возможность предпросмотра куска файла, и обилие бесплатных файлов (в подборках по авторам, читай, ВУЗам и факультетам). Есть определённые баги, но всё решаемо, да и администраторы реагируют в течение суток.
Маленький отзыв о большом помощнике!
Студизба спасает в те моменты, когда сроки горят, а работ накопилось достаточно. Довольно удобный сайт с простой навигацией и огромным количеством материалов.
Студ. Изба как крупнейший сборник работ для студентов
Тут дофига бывает всего полезного. Печально, что бывают предметы по которым даже одного бесплатного решения нет, но это скорее вопрос к студентам. В остальном всё здорово.
Спасательный островок
Если уже не успеваешь разобраться или застрял на каком-то задание поможет тебе быстро и недорого решить твою проблему.
Всё и так отлично
Всё очень удобно. Особенно круто, что есть система бонусов и можно выводить остатки денег. Очень много качественных бесплатных файлов.
Отзыв о системе "Студизба"
Отличная платформа для распространения работ, востребованных студентами. Хорошо налаженная и качественная работа сайта, огромная база заданий и аудитория.
Отличный помощник
Отличный сайт с кучей полезных файлов, позволяющий найти много методичек / учебников / отзывов о вузах и преподователях.
Отлично помогает студентам в любой момент для решения трудных и незамедлительных задач
Хотелось бы больше конкретной информации о преподавателях. А так в принципе хороший сайт, всегда им пользуюсь и ни разу не было желания прекратить. Хороший сайт для помощи студентам, удобный и приятный интерфейс. Из недостатков можно выделить только отсутствия небольшого количества файлов.
Спасибо за шикарный сайт
Великолепный сайт на котором студент за не большие деньги может найти помощь с дз, проектами курсовыми, лабораторными, а также узнать отзывы на преподавателей и бесплатно скачать пособия.
Популярные преподаватели
Добавляйте материалы
и зарабатывайте!
Продажи идут автоматически
6381
Авторов
на СтудИзбе
308
Средний доход
с одного платного файла
Обучение Подробнее