Диссертация (1090334), страница 14

Просмтор этого файла доступен только зарегистрированным пользователям. Но у нас супер быстрая регистрация: достаточно только электронной почты!

Текст из файла (страница 14)

Проведено изучение растворимости ацикловира, включающее такиеэтапы, как механохимическая обработка ацикловира, изучение растворимостиацикловира с солюбилизаторами, электроформование волокон. Достигнутоувеличение растворимости ацикловира на 94%. Разработанная технологияэлектроформованияинновационныйнановолоконматериал,позволяетобеспечивающийполучитьвысокуюпролонгированныйбиодоступностьдействующих веществ. Однако технология, использованная для получениянановолокон является перспективной для дальнейших исследований.2. Изучена микробиологическая активность пролонгированных глазныхкапель «Ациклир». Глазные капли показали высокую противомикробнуюактивность в отношении возбудителей вторичной бактериальной инфекции.3.

Изучено поверхностного натяжение глазных капель модельной смесиглазных капель, которое способствует равномерному распределению глазныхкапель по роговице во время инстилляции.4. Разработана технологическая схема производства глазных капель«Ациклир», для производства глазных капель в стеклянных флаконах и посовременнойтехнологии«выдув-наполнение-запайка»вполимерныходноразовых тюбик-капельницах.5. Изучена стабильность модельных смесей пролонгированных глазныхкапель «Ациклир», глазные капли «Ациклир» остаются стабильными напротяжении 30 месяцев.85ГЛАВА4.

РАЗРАБОТКА НОРМ КАЧЕСТВАПРОЛОНГИРОВАННЫХ ГЛАЗНЫХ КАПЕЛЬ «АЦИКЛИР»Проведены аналитические исследования с целью идентификации иколичественногоципрофлоксацина,определенияцианокобаламина.ацикловира,Восновубета-циклодекстрина,разработанныхметодикидентификации и количественного определения активных компонентов исолюбилизатора положен метод высокоэффективной жидкостной хроматографии(ВЭЖХ) как наиболее современный, точный и экспрессный. Разработанаметодика идентификации и количественного определения ацикловира, бетациклодекстрина, цианокобаламина и ципрофлоксацина. Проведены исследованиявалидационных характеристик разработанных методик идентификации иколичественного определения.4.1. Идентификация и количественное определение ацикловира,цианокобаламина, ципрофлоксацина методом обращенно-фазовой ВЭЖХИдентификациюиколичественноеопределениеацикловира,бета-циклодекстрина и ципрофлоксацина проводили последовательно методомобращенно-фазовой ВЭЖХ согласно схеме, представленной на рисунке 20.Рисунок 20 – Схема подключения колонок для количественного определениябета-циклодекстрина, ацикловира и ципрофлоксацина гидрохлорида86Количественное содержание цианокобаламина проводили фармакопейнымметодом УФ-Вид-спектрофотометрии.Таблица 20 – Результаты количественного определение ацикловира, бетациклодекстрина, ципрофлоксацина и цианокобаламинаБетациклодекстринМетод ВЭЖХОт 1,50 мг/мл до 1,84 мг/мл.АцикловирМетод ВЭЖХОт 2,97 мг/мл до 2,63 мг/мл.ЦипрофлоксацинагидрохлоридМетод ВЭЖХОт 9,5 мг/мл до 10,5 мг/млЦианокобаламинМетод УФ-ВидспектрофотометрииОт 0,18 мг/мл до 0,22 мг/мл.4.2.

Валидация методики определения ципрофлоксацина4.2.1. Валидационные характеристикиВ соответствии с «Руководством по валидации методик анализалекарственных средств»(Москва,2007) дляметодик качественного иколичественного определения действующих веществ в лекарственных препаратахнеобходимоисследоватьследующиевалидационныехарактеристики:специфичность, линейность, сходимость (прецизионность) и правильностьАналитическая методика для теста «Подлинность».«Времена удерживания основного пика на хроматограммах испытуемогораствора должны совпадать с временами удерживания пика ципрофлоксацина нахроматограммах раствора сравнения ципрофлоксацина гидрохлорида».Условия подлинности ципрофлоксацина гидрохлорида: Приведены вметодике.Пределы содержания ципрофлоксацина гидрохлорида в 1 мл препарата – от9,5 мг до 10,5 мг, что соответствует допустимому отклонению ± 5 % (В= 5 %)Основнойвалидационнойхарактеристикой методики качественногоопределения действующего вещества в препаратах является характеристика«Специфичность».87К р итер ии пр ием лем о с ти:1.

На хроматограммах раствора «плацебо» препарата должны отсутствоватьпик(и)свременемудерживанияравнымвремениудерживанияпикаципрофлоксацина гидрохлорида на хроматограммах раствора сравненияципрофлоксацина гидрохлорида.2. В случае присутствия дополнительного пика совпадающего по времени свременем удерживания пика ципрофлоксацина на хроматограммах растворасравнения ципрофлоксацина гидрохлорида, его площадь не должна бытьстатистически незначимой, т.е. превышать величину  As  0,32  0,51% , от сердегозначения площади пика ципрофлоксацина.3. Времена удерживания пиков ципрофлоксацина на хроматограммахраствора сравнения ципрофлоксацина гидрохлорида и основного пика нахроматограммах препарата должны статистически достоверно совпадать, т.е. ихдоверительные интервалы должны перекрываться.Испытуемый раствор препарата и раствор сравнения ципрофлоксацинагидрохлорида готовили как указано в методике. В качестве образца «плацебо»использовалилабораторныйобразецнесодержащийципрофлоксацинагидрохлорида.Хроматограммы раствора сравнения ципрофлоксацина гидрохлорида,испытуемого раствора препарата, испытуемого раствора плацебо и представленына рисунках 21-23.

На рисунке 24 представлены хроматограммы в режименаложения.88Рисунок 21 – Хроматограммы раствора сравнения ципрофлоксацинагидрохлоридаРисунок 22 – Хроматограммы испытуемого раствора препаратаРисунок 23 – Хроматограмма испытуемого раствора образца «плацебо»89Рисунок 24 – Хроматограммы раствора сравнения ципрофлоксацинагидрохлорида (1), испытуемого раствора препарата (2),испытуемого раствора плацебо (3) и растворителя (воды) (4)Как видно из рисунка 24, специфичность методики подтверждается тем, что:1. На хроматограммах испытуемого раствора образца «плацебо» ирастворителя отсутствуют пики совпадающие по времени удерживания с пикомципрофлоксацина на хроматограмме раствора сравнения ципрофлоксацинагидрохлорида.2.

Доверительные интервалы величины времен удерживания пиков нахроматограммах раствора сравнения ципрофлоксацина (7,777 ± 0,017) ииспытуемого раствора препарата (7,775 ± 0,004) перекрываются.Методика качественно и количественного определения ципрофлоксацинагидрохлорида в препарате «Ациклир» по характеристике «Селективность»соответствует требованиям к методикам контроля медицинских препаратов.904.2.2.

Правильность, сходимость, линейностьи диапазон примененияПравильность характеризует степень соответствия между известнымсодержанием определяемого вещества в растворе и его содержанием в растворе,определенным по данной методике.Сходимость характеризует прецизионность методики при ее выполнении водних и тех же условиях в течение небольшого промежутка времени.

В данномслучае сходимость изучается на 9 модельных смесях, охватывающих диапазонприменения методики.Линейность – это способность методики (в пределах диапазона применения)получатьрезультатыиспытаний,прямопропорциональныеколичествуанализируемого вещества в образце. При этом должна получаться линейнаязависимость между взятым («истинным») MВ и найденным MН количествомопределяемого вещества.Диапазон применения аналитической методики – это интервал междуминимальной и максимальной концентрациями (количествами) анализируемоговещества в образце (включая эти концентрации), для которого показано, чтоаналитическаяметодика имеет требуемую правильность,сходимостьилинейность.

Допуск по содержанию ципрофлоксацина гидрохлорида в препарате(В) составляет ± 5 %.Характеристики правильности, сходимости (прецизионности) и линейностиисследовалинамодельныхрастворахпрепаратасконцентрациямиципрофлоксацина гидрохлорида в пределах от 80 % до 120 % от номинальногосодержания этого вещества в препарате, что включает весь диапазон концентрациии составляет минимально допустимый диапазон применения методики дляколичественного определения.Критерии приемлемости рассчитывали для В = 5 % , следовательно,максимальная величина суммарной неопределенности результатов методики (Δ As)на должна превышать значение В×0,32 = 1,60 %91Характеристики правильности и прецизионности исследовали на модельныхобразцах препарата с концентрациями ципрофлоксацина гидрохлорида, которыесоответствуют 80 %, 85 %, 90 %, 95 %, 100 %, 105 %, 110 %, 115 % и 120 % ихсодержания по отношению к номинальному значению.

Модельные образцыпрепарата готовили в мерных колбах вместимостью 50 мл непосредственно изнавесоккомпонентовпрепарата.Массынавесокиконцентрацииципрофлоксацина гидрохлорида в полученных образцах представлены в таблице21.Содержаниеосновноговеществавсубстанцииципрофлоксацинагидрохлорида составляет 96,92 %.Таблица 21 – Массы навесок и концентрации натриевой солиDL-3-гидроксибутановой кислоты в модельных образцах препаратаНомермодельногообразцаМасса навесокципрофлоксацинагидрохлорида (мг)Концентрацияципрофлоксацинагидрохлорида(мг/мл)Концентрацияципрофлоксацинагидрохлорида по отношению кноминальной, в %12413,1436,48,007538,4591880,0884,593461,58,9457289,4645489,7513,89,492349,959594,9299,596539,610,4596104,607565,910,9694109,698593,111,4967114,979610,211,8281118,28Испытуемые растворы и раствор сравнения ципрофлоксацина гидрохлоридаготовили в соответствии с методикой, приведенной в проекте ФСП.Результаты хроматографирования, значения определенных концентрацийципрофлоксацина гидрохлорида в модельных образцах и расчет метрологическиххарактеристик методики представлены в таблице 22.92Таблица 22 – Результаты анализа модельных образцов препарата, содержащих от80 % до 120 % ципрофлоксацина гидрохлорида, и их статистическая обработкаПлощади пиковципрофлоксацина№гидрохлорида нарастворахроматограммахиспытуемых растворовмодельных образцов193890429357390937558129891261990487799073863104686001048031810466763411068949111079661108870151165408811660603116606686122415021223470512248278712825725128417621285495281343108713466141134744389138560951385545713833509Введено в %от номинальнойконцентрации(Xi, факт., %)80,0884,5989,4694,9299,59104,60109,69114,97118,28Найдено в %от номинальнойконцентрации(Yi, %)80,210779,940380,095784,501184,617584,638989,433489,533589,417794,562294,895594,730999,56199,616799,6172104,579104,521104,637109,57109,707109,82114,742115,041115,112118,373118,367118,18Найдено в %к введенномуZi = 100 ×(Yi/Xi)99,837100,17599,980100,10599,96899,942100,0399,918100,047100,378100,026100,200100,02999,97399,9727100,02100,07599,965100,10999,98499,882100,19999,93899,87699,92299,926100,085Среднее, Zср, % =100,0208Относительное стандартное отклонение, RSD z, % =0,119Относительный доверительный интервал (односторонний)Δz % = t (95 %, 27 – 1) x RSDz = 1,7056 x 0,119 =0,203Критическое значение для сходимости результатов Δ As , % =1,6Систематическая ошибка  % = | Zср – 100 | =0,0208Критерий незначимости систематической ошибки:1) статистическая незначимость: < Δz : √27 = 0,203 : 5,196 = 0,04 % > 0,021%Если не выполняется 1), то  ≤ max :2) практическая незначимость: δ% ≤ 0,32  1,6 = 0,51 % > 0,021 %ВыполняетсяОбщий вывод о методикеКОРРЕКТНАВыполняется93Из данных, приведенных в таблице 22, следует, что методика количественногоопределенияацикловирахарактеризуетсядостаточной правильностью исходимостью (прецизионностью) во всем диапазоне концентраций (от 80 % до 120%), не имеет систематической ошибки и является корректной.

Харектиристику«Линейность»исследовали вдиапазоне концентраций ципрофлоксацинагидрохлорида от 80 % до 120 % по отношению к номинальному значению, порезультатам хроматографирования, полученным при изучении характеристик«правильность», «сходимость». График линейной зависимости найденныхконцентраций ципрофлоксацина гидрохлорида от введенной представлен на рисунке28, а результаты расчета параметров линейной зависимости – в таблице 23.Рисунок 28 – Линейная зависимость найденной концентрацииципрофлоксацина гидрохлорида от введенной концентрациив нормализованных координатахТаблица 23 – Метрологические характеристики линейной зависимости найденнойконцентрации ципрофлоксацина гидрохлорида от введенной концентрацииПараметрыЗначенияТребования 1Требования 2ЗаключениеBSb1,00090,0018A-0,10912£ |0,309|£|2,6|Выдерживаетсяпо 1критериюSaSD0SD0 /bR0,181080,1180,1180,99996£|0,84|>|0,99810|ВыполняетсяВыполняется94Как следует из представленных данных, требования к параметрам линейнойзависимости выполняются, то есть линейность методики количественногоопределения ципрофлоксацина гидрохлорида подтверждается в диапазонеконцентраций от 80 % до 120 % от номинального значения.Методика характеризуется достаточной сходимостью, так как найденноезначение относительного доверительного интервала величины Z(0,203 %)меньше критического значения для сходимости результатов (1,6 %) (табл.

Характеристики

Список файлов диссертации