Диссертация (1090334), страница 15

Просмтор этого файла доступен только зарегистрированным пользователям. Но у нас супер быстрая регистрация: достаточно только электронной почты!

Текст из файла (страница 15)

25).Методика характеризуется достаточной правильностью, так как выполняетсякритерий незначимости систематической ошибки методики. Систематическаяошибка методики равна 0,02 % и удовлетворяет требованиям статистической ипрактической незначимости:1) статистическая незначимость: < Δz : √27 = 0,203 : 5,196 = 0,04 % > 0,021%2) практическая незначимость: δ% ≤ 0,32  1,6 = 0,51 % > 0,021 %.Высокое значение коэффициента корреляции r = 0,99996 удовлетворяеттребованиям критерия приемлемости (r = 0,99810) и подтверждает линейностьзависимости между взятым и найденным количеством ципрофлоксацинагидрохлорида в области от 80 % до 120 % относительно его номинальногосодержания в препарате.Выполняются требования к параметрам линейной зависимости (а, RSD0/b, r)методики определения количеством ципрофлоксацина гидрохлорида во всемдиапазоне концентраций от 80 % до 120 % от номинального значения.4.2.3.

Прогноз полной неопределенности методикиДля подтверждения корректности методики при воспроизведении в другихлабораториях проведен прогноз полной неопределенности методики.Прогнозируемая полная неопределенность результатов анализа не должнапревышать максимально допустимую неопределенность результатов анализа длядопусков содержания: ±5 % – max ΔAs ≤ 1,6 %.95Ожидаемаянеопределенностьпробоподготовкискладываетсяизнеопределенности навески препарата и навески, взятой для приготовленияраствора сравнения, доведения до метки растворов и разбавления.

Расчетпроведен из расчетных формул проекта ФСП с использованием подхода кдопустимойнеопределенностимернойпосуды.Расчетивеличинынеопределенности процедуры пробоподготовки приведены в таблице 24.Неопределенность взятия навески рассчитывают по формуле:m 0,2 100 % ,mгде m – масса навески, в миллиграммах.Таблица 24 – Расчет неопределенности пробоподготовки для методикиколичественного определения количеством ципрофлоксацина гидрохлоридаОперацияпробоподготовкиРаствор сравненияВзятие навески СОципрофлоксацина гидрохлоридаДоведения объёма раствора вмерной колбе вместимостью100,0 мл до меткиВзятие аликвоты исходногораствораДоведения объёма раствора вмерной колбе вместимостью50,0 мл до меткиВзятие навески препаратаДоведения объёма раствора вмерной колбе вместимостью100,0 мл до меткиПараметр длярасчетной формулыНеопределённость (Δ),%mo = 50 мг0,40 %1000,12 %5,0 мл0,6 %500,17 %Испытуемый раствор500 мг0,04 %1000,12 %Суммарная неопределенность пробоподготовки ΔSP равна:ΔSP = [0,42 + 2×0,122 + 0,62 + 0,172+0,042]1/2 = 0,761 %Расчетнеопределенностиконечнойаналитическойоперациипоколичественному определению ципрофлоксацина гидрохлорида рассчитывали дляиспытуемого раствора и раствора сравнения по данным, приведенным в96таблице 25.

Относительное стандартное отклонение (RSD, %) рассчитывали длясреднего из 3 результатов.Таблица 25 – Относительное стандартное отклонение площадейпиков ципрофлоксацина (А)А0 *А1 **115156821143095811568750114279871159735411471924RSD, %0,3580,215RSDmax, % (n0 = 3, В = 5 %)0,67*А0 –площади пика ципрофлоксацина, полученные из хроматограмм раствора сравнения.**А1 – площади пика ципрофлоксацина, полученные из хроматограмм испытуемого раствора.Полученные значения относительных стандартных отклонений площадейпиков ципрофлоксацина меньше допустимого RSDmax, % (n0 = 3, В = 5 %) = 0,67 %.Неопределенность конечной аналитической операции рассчитывали поформулам:stFAO smpFAO 11 t (95 %, n0  1)  RSD  4,30  0,358  0,889 %3313 t (95 %, n0  1)  RSD 13 4,30  0,215  0,534%Суммарная неопределенность конечной аналитической операции приколичественном определении ципрофлоксацина гидрохлорида равна:2 FAO  (stFAO ) 2  (smp0,8972  0,5342  1,043 %FAO ) Суммарная неопределенность анализа при количественном определенииципрофлоксацина гидрохлорида равна: As ,%  1,0432  0,7612  1,29%   As max  1,6%Как видно, величина полной неопределенности методики количественногоопределения ципрофлоксацина гидрохлорида не превышает критическогозначения 1,6 %:971,41 % < max ΔAs = 1,6 %.Полнаяпрогнозируемаянеопределенностьрезультатовдлятеста«Количественное определение.

Ципрофлоксацин гидрохлорид» не превышаеткритическое значение ΔAsmax = 1,6 % т. е. методика позволяет получать корректныерезультаты.Методикаколичественногоопределениянатриевойсолиципрофлоксацина гидрохлорида ВЭЖХ в диапазоне применения методикисоответствует критериям приемлемости для валидационных характеристик:специфичность, правильность, прецизионность (сходимость) и линейность. Полнаяпрогнозируемая неопределенность результатов анализов не превышает критическоезначение.4.3 Биофармацевтические исследования4.3.1. Изучение высвобождения действующих компонентовглазных капель «Ациклир» методом диализаПролонгированное действие глазных капель определяется временемнахожденияобеспечениедействующихравномерноговеществвконъюнктиве.распределенияЭтолекарственнойобуславливаетформыприиспользовании для поддержания продолжительного терапевтического действия.Для выбранной модельной смеси глазных капель были проведеныбиофармацевтические исследования высвобождения действующих веществ излекарственной формы по методике Крувчинского.

Использовали метод диализачерез полунипроницаемую мембрану.По результатам определения были построены графики, представленные нарисунке 29.98Рисунок 29 – Высвобождение основных компонентовиз глазных капель «Ациклир»Как видно из рисунка 29, за 4 часа высвобождается около 25% действующихкомпонентов. Модельные смеси на основе ГЭЦ высвобождают действующиевещества равномерно. Высвобождение начиналось сразу, при внесении раствора вдиализную среду.4.3.2. Высвобождение из волокон в модели глаза «PK-Eye»Ацикловир изучался в составе полимерных нановолокон с PCL и PVP. Когдаоба типа волокон тестировались в PK-Eye со скоростью 2.0 мкл/мин, pH 7.4 в заднейполости, моно-экспоненциальное уменьшение наблюдалось на первой кривой.

PVPACY волокна наблюдались около 0.95 ± 0.12 дней (примерно 23 часа ) в модели снаивысшей концентрацией 48.5 ± 23.5 мг/мл около 23 часов. Наименьшаяконцентрация вещества была установлена 0.028 ± 0.004 мг/мл и после примерно 197часов (~ 8 дней).Двойная доза ацикловира в PCL волокнах (PCL-ACY) показала времявысвобождения около 3.67 ± 1.4 дней, с наибольшей концентрацией около 40.4 ± 21.6мг/мл.

Наименьшая концентрация была обнаружена в системе с волокнами сконцентрацией около 5.8 ± 3.3 мг/мл после примерно 32 часов.99Во время испытания других противовирусных препаратов (например,ганцикловира) на предварительных этапах PK-Eye, период полувысвобождениясоставлял несколько часов (результаты не показаны), предполагалось, что усубстанций с небольшой молекулярной массой время полураспада зависит от модели.Исходный раствор 500 мг/мл ципрофлоксацина был приготовлен с 2% уксуснойкислотой в воде и с серийными разведениями были сделаны концентрации около 0.49мг/мл.

Калибровочная кривая имела R2 значение 0.991 и это было использовано длярасчета кинетики ципрофлоксацина в модели.Оба варианта PVP-CIP и PCL-CIP волокон показали расширение периодаполувыведения, которые следовали кинетике первого порядка. PK-Eye.

PVP-CIPпоказал время высвобождения около 1.36 ± 0.4 дней, с наибольшей еонцентрациейоколо 0.61 ± 0.35 мг/мл и 32 часов. Это заняло около 190 часов (~8 дней) для веществабез обнаружения методом ВЭЖХ. PCL-CIP показал небольшое время увеличениявысвобождения PK-Eye по сравнению с PVP-CIP, с временем высвобождения около2.1 ± 0.68 дней.Максимальная концентрация, обнаруживаяемая методом ВЭЖХ из этихволокон составила 1.06 ± 0.47 мг/мл около 24 часов и составила около 190 часов (~8дней), 99.3 ± 1.17 % субстанции высвобождалось.Исходный раствор 1,0 мг/мл было приготовлен с рН 7,4[92,93], подготовилисерийные разведения до 0,49 мкг/мл.

Калибровочная кривая имела R 2 значение 0,9997,и это было использовано для вычисления неизвестных концентраций в различныемоменты времени.PVP-B12 и B12-PCL оба имели высокую концентрацию около 30 часов (2,01 ±0,79 мкг / мл) и 21 часов (8,21 ± 4,7 мкг / мл), соответственно. B12 в обоих волоконахмоноэкспоненциально снижался. Для сравнения, PVP-В12 имелo более медленноeвысвобождение, чем PCL-B12, с наблюдаемым временем 2,32 ± 0,78 дня и 0,80 ± 0,21дня соответственно.100Все три субстанции были помещены внутрь одного из волокон PVP или PCLсоответственно и были протестированы PK-Eye. Неизвестная концентрация длякаждой субстанции была определена методом ВЭЖХ, доложенным ранее[78,79].Концентрация в волокнах из PVP составляла 355.3 ± 6.4 мг/мл, 91.8 ± 3.5 мг/мли 199.5 ± 1.5 мг/мл ацикловира, B12 и ципрофлоксацина соответственно.

Характеристики

Список файлов диссертации