Диссертация (1090334), страница 9

Просмтор этого файла доступен только зарегистрированным пользователям. Но у нас супер быстрая регистрация: достаточно только электронной почты!

Текст из файла (страница 9)

Электроформование волоконЭлектростатическое формование волокнистых материалов проводили потехнологии Electrospining, на оборудовании для непрерывного производстваволокнистого слоя.Формовочное пространство предназначено для осуществления процессапрядения волокон из раствора полимера. В верхней части формовочной зонырасположен шприц с автодозатором, который подает раствор полимера на иглу, ккоторой подсоединен электрод. Нижний электрод подводится к подложке, накоторую собирается волокно. Установка позволяет выставлять необходимыепараметры для формирования волокнистых холстов, такие как напряжение,расстояние между электродами, скорости вращения электрода и движенияподложки.2.5.

Исследование размерных характеристикотдельных волоконМетодом сканирующей электронной микроскопии определяли диаметрволокон и оценивали структуру нетканых материалов. Построение гистограммраспределения волокон по диаметрам осуществляли после измерения выборки неменее 300 волокон. Результаты обрабатывались с помощью программы Excel [30].2.6. ИК-спектроскопияИзмерения проводились методом нарушенного полного внутреннегоотражения, основанном на эффекте полного внутреннего отражения от границыраздела между НПВО-элементом с высоким показателем преломления иисследуемым объектом с меньшим показателем преломления. Измеренияпроводили на приборе «Nicolet 6700» «ThermoScientific» (США). Спектральныйдиапазон прибора составлял от 40000 до 4 см-1; разрешение 0,1 см-1.482.7.

Термические методы анализаМетод термического анализа основан на непрерывной регистрацииизменения массы образца в зависимости от его температуры в условияхпрограммированного изменения температуры среды [6].Дифференциальная сканирующая калориметрия позволяет регистрироватьтепловой поток, который характеризует происходящие в веществе изменения врезультате нагрева или охлаждения. В этом методе образец и эталон нагреваютсяили охлаждаются с одинаковой скоростью.В работе анализ материалов проводили динамическим методом (ТГА) (приизменении температуры печи во времени при постоянной скорости нагрева) насовмещенном ТГА/ДСК/ДТА анализаторе SDTQ600 V10.9 Build 20 (TAInstruments (США)) в интервале температур от 0 до 450o С при скоростинагревания 10С/мин в среде аргона.2.8.

Микробиологические методыОпределение стерильности проводили согласно требованиям ОФС 42-0067–07 ГФ РФ XII издания.Определение антимикробной активности глазных капель проводилисогласно требованиям ОФС 42-0068-07 ГФ РФ XII издания [17,45].Напервомэтапеисследования,дляопределениястерильностинаработанных растворов глазных капель,каждый из исследуемых растворов вколичестве 1 мл засевали методом прямого посева на костномозговой бульон ижидкую среду Сабуро при соотношении (раствор – питательная среда 1:4 мл).При испытании растворов посевы термостатировали при температуре 37°С, как ипри испытании на среде Сабуро – 37°С.

Посевы просматривали в рассеянномсвете ежедневнои по окончании периода инкубации. Наличие ростамикроорганизмов в питательных средах оценивали визуально по появлениюмутности, пленки, осадка и других микроскопических изменений.49На втором этапе исследования, активность этих субстанций в отношенииосновныхвозбудителейсопутствующихвируснымконъюнктивитамзаболеваниям выявляли на культурах условно-патогенных микроорганизмов St.Epidermidis и офтальмомикозов Candida Albicans.Посев в чашки Петри производили следующим образом: плотнуюпитательную среду в пробирках или колбах расплавляли на кипящей водянойбане, охлаждали до 48-50 0С и, соблюдая правила асептики, разливали ровнымслоем толщиной 3 – 5 мм в стерильные чашки.Посев делали стеклянным шпателем Дригальского при равномерномраспределении по окружности.2.9.

Метод ВЭЖХДля идентификации и количественного определения ацикловира и бетациклодекстрина в препарате использовали стальную колонку, размером 4,6 мм ×250 мм, заполненную сорбентом LUNAC18(2), 5 мкм, с предколонкой размером10 мм х 4,0 мм, заполненной сорбентом ReproSil-PurBesicC18, с размером частиц5 мкм 10×2,0 мм. Детекцию проводили спектрофотометрически при длине волны275нм,объемвводимойпробысоставил10мкл.Впроцессехроматографирования проб состав подвижных фазы был вода – метанол – кислотафосфорная (90 : 10 : 0,2).

Скорость подвижной фазы 0,75 мл/мин, температураколонки 40оС.Содержание бетациклодекстрина в препарате (Хβ), в миллиграммах в 1 мл,рассчитывают по формуле:гдеSiβ – среднее значение площадей пиков бетациклодекстрина, рассчитанноеиххроматограммиспытуемогорефрактометрическом детекторе;раствора,полученныхна50Soβ – среднее значение площадей пиков бетациклодекстрина, рассчитанноеих хроматограмм раствора сравнения бетациклодекстрина, полученныхна рефрактометрическом детекторе;moβ – масса навески СО бетациклодекстрина, в миллиграммах;m– масса препарата, в граммах;d – плотность препарата, в граммах в 1 см 3;Р – содержание основного вещества в СО бетациклодекстрина.Содержание (С 6Н10О5)7 (бетациклодекстрина) в 1 мл препарата должно бытьот 1,50 мг до 1,84 мг.Содержание ацикловира в препарате (Xa), в миллиграммах в 1 мл,рассчитывают по формуле:где Sia – среднее значение суммы площадей пиков ацикловира и пика свременем удерживания совпадающим с временем удерживания пикабетацикдодекстрина (на рефрактометрическом детекторе), рассчитанное иххроматограммиспытуемогораствора,полученныхнаспектрофотометрическим детекторе;Soa – среднее значение площадей пиков ацикловира, рассчитанное иххроматограмм раствора сравнения ацикловира, на спектрофотометрическимдетекторе ;moa – масса навески СО ацикловира, в миллиграммах;m– масса препарата, в граммах;d – плотность препарата, в граммах в 1 см 3;Р – содержание основного вещества в СО ацикловира.Содержание С 8Н11N5O3 (ацикловира) в 1 мл препарата должно быть от2,97 мг до 3,63 мг.51Результаты считаются достоверными, если выполняются следующиеусловия:эффективность хроматографической системы, рассчитанная по пикубетациклодекстрина, должна быть не менее 4000 теоретических тарелок;эффективность хроматографической системы, рассчитанная по пикуацикловира, должна быть не менее 4000 теоретических тарелок;коэффициенты разделения пиков альфа-, гамма- и бетациклодекстринов,нахроматограммахрастворадляпроверкипригодностихроматографической ситемы должны быть на менее 2,0относительноестандартноеотклонениеплощадейпиковбетациклодекстрина и ацикловира на хроматограммах растворовсравнения бетациклодекстрина и ацикловира и испытуемого растворадолжно быть для 2-х параллельных хроматограмм -не более 0,25 %; для3-х параллельных – не более 0,67 %; для 4-х – не более 0,96 %; для5-ти – не более 1,19 %.коэффициент симметрии пика бетациклодекстрина на хроматограммахиспытуемого раствора и раствора сравнения бетациклодекстринадолжен быть от 0,9 до 1,5.Определение ципрофлоксацина проводят методом ВЭЖХ в соответствии стребованиями ЕФ.По 20 мкл испытуемого раствора и раствора сравнения ципрофлоксацинагидрохлорида хроматографируют на жидкостном хроматографе со схемойподключения колонок показанной на рисунке 23 (раздел Количественноеопределения бетациклодекстрина и ацикловира), с УФ спектрофотометрическимдетектором в следующих условиях:колонка (К 2) стальная, размером 100 мм × 4,0 мм, заполненнаясорбентом ReproSil-PurBesicC18, размер частиц 3 мкм;предварительная колонке (К 1 на рис.

22) стальная размером 10 мм х 4,0мм, заполненная сорбентом ReproSil-PurBesicC18, размер частиц 5 мкм;52подвижная фаза – фосфатный буферный раствор рН 3,0 – ацетонитрил(87:13);скорость подвижной фазытемпература колонки + 40 оС;длина волны детектирования – 278 нм;скорость0,5 мл;подачи подвижной фазыпри проведении промывкипредварительной колонки – 1,5 мл/мин;время промывки – до окончания хроматографирования;Содержание ципрофлоксацина гидрохлорида (Х), в миллиграммах, в 1 млпрепарата рассчитывают по формуле:гдеSi – среднее значение площадей пиков ципрофлоксация гидрохлорида,вычисленное из хроматограмм испытуемого раствора;Sоi – среднее значение площадей пиков ципрофлоксацина, вычисленное изхроматограмм раствора сравнения ципрофлоксацина гидрохлорида;mo – масса навески СО ципрофлоксацина гидрохлорида, в миллиграммах;m – масса навески препарата, в граммах;d – плотность препарата, в граммах в 1 см 3;Р – содержание основного вещества в СО ципрофлоксацина гидрохлорида.Результаты считаются достоверными, если выполняются следующиеусловия:– эффективность хроматографической системы, рассчитанная по пикуципрофлоксацина, должна быть не менее 6000 теоретических тарелок;– относительное стандартное отклонение площадей пиков ципрофлоксацинана хроматограммах раствора сравнения ципрофлоксацина гидрохлорида ииспытуемого раствора должно быть для 2-х параллельных хроматограмм -неболее 0,25 %; для 3-х параллельных – не более 0,67 %; для 4-х – не более 0,96 %;для 5-ти – не более 1,19 %.53– коэффициент симметрии пика ципрофлоксацина на хроматограммахиспытуемого раствора и раствора сравнения ципрофлоксацина гидрохлоридадолжен быть от 0,9 до 1,3.Определение цианокобаламина проводят методом УФ-ВИД спектрометриисогласно фармакопейным требованиям.

Характеристики

Список файлов диссертации