Диссертация (Стандартизация сырья и настоек гомеопатических матричных галантуса), страница 9

С. К. Исламбекова (ФС 42-Уз-0032-96 [108]) и Институтехимии растительных веществ им. акад. С.Ю. Юнусова (ФС 000247-221111 [107]) в47республике Узбекистан. В действующей ФС 42-Уз-0032-96 на субстанциюгалантамина для контроля качества по показателю «Посторонние алкалоиды»,применяется метод ТСХ; для количественного определения установлен методтитрования в неводной среде [108]. Стандартизацию сырья – листьев унгернииВиктора–проводятпоколичественномусодержаниюгалантамина,определяемого фотоколориметрическим методом (не менее 0,05 %, ФС 42-152080 [105]), а листьев унгернии Северцова резаных – по содержанию ликорина,определяемого спектрофотометрически (не менее 0,1 % [106]).Для разработки нормативной документации, необходимой для надлежащегоконтроля качества ГомЛРС и НГМ подснежников, необходимо дополнительноеизучение комплекса БАС.

В наших исследованиях мы постарались наиболееполно отразить метаболом ГомЛРС и НГМ двух видов подснежников с цельюпоиска оптимальных подходов к стандартизации [6-40, 124-134].48ВЫВОДЫ К ГЛАВЕ 11. В ходе настоящего информационно-аналитического анализа установлено,что метаболом двух видов подснежников остается малоизученным. Болееподробно изучались АА, имеются данные по их качественному составу исодержанию, но, к сожалению, эти данные представлены недостаточно полно.2.

Подснежник Воронова и подснежник белоснежный используются вофицинальной и народной медицине, гомеопатической практике. Препараты ААприменяются при самых различных заболеваниях. АА подснежников Воронова ибелоснежного по основному фармакологическому действию условно можноподелить на три группы: гипотензивные, антихолинэстеразные, противоопухолевые.3. Целые растения подснежников используются в гомеопатии, дляпроизводства монокомпонентных препаратов. Тем не менее, этот вид ГомЛРСизучен недостаточно, сведений о химическом составе сопутствующих БАС вдоступной литературе не обнаружено.4.

АА изучаются уже на протяжении полувека. С появлением такихсовременныхметодов,какГХ-МС,сталовозможнымнаиболееполноохарактеризовать данную группу БАС ГомЛРС и НГМ двух видов подснежников.5. Существует необходимость в более детальном изучении состава, как АА,так и сопутствующих БАС, а также НГМ на основе ГомЛРС с применениемсовременных инструментальных физико-химических методов анализа.6. Вопрос стандартизации ГомЛРС и НГМ двух видов подснежников, как иразработки показателей их подлинности и качества, является недостаточноизученным.7. Принимая во внимание вышесказанное, разработка современнойотечественной НД на ГомЛРС и НГМ двух видов подснежников представляетсявесьма актуальной для фармации.49ГЛАВА 2.

ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ2.1. Характеристика объектов исследованияОбъектами исследования являлись образцы ГомЛРС свежих цветущихрастений подснежника Воронова и подснежника белоснежного, заготовленные вБотаническом саду Первого МГМУ им. И.М. Сеченова в 2014-2016 гг. ЗаготовкуГомЛРС проводили в марте-апреле в период массового цветения.Настойки гомеопатические матричные готовили из свежих растенийподснежников, содержащих все части – цветки, цветоносы, листья, луковицы,корни – (planta tota) согласно правилам гомеопатической технологии (ПроектОФС «Настойки гомеопатические матричные») по способу 3 а с использованием вкачестве экстрагента 73% этилового спирта (по массе) [97]. Для приготовленияспирта требуемой концентрации по массе использовали указания Проекта ОФС«Растворы и жидкие разведения гомеопатические» [97].2.2.

Методы анализа, оборудованиеИсследование анатомо-морфологических и микроскопических признаковГомЛРС подснежников осуществляли в соответствии с требованиями общихфармакопейных статей: ГФ XIII изд., в. 2, с. 304 «Корни, корневища, луковицы,клубни, клубнелуковицы» (ОФС.1.5.1.0006.15); ГФ XIII изд., в. 2, с. 272 «Травы»(ОФС.1.5.1.0002.15); ГФ XIII изд., в. 2, с. 280 «Листья» (ОФС.1.5.1.0003.15); ГФXIII изд., в. 2, с.

290 «Цветки» (ОФС.1.5.1.0004.15); ГФ XIII изд., в. 2, с. 379«Техника микроскопического и микрохимического исследования лекарственногорастительногосырьяилекарственныхрастительныхпрепаратов»(ОФС.1.5.3.0003.15) [51], а также принимали во внимание последние достиженияв области микроскопического анализа сырья [93, 94].

При проведениимикроскопического анализа исследования и фотоснимки выполнялись намикроскопе «Альтами 139T» (окуляр 10× и объективы: 4×, 10×, 40×, 100×) спомощьюцифровойокулярнойкамерыUCMOS05100KPA;обрабатывались с использованием ПО Altami Studio.снимки50На предварительном этапе фитохимического анализа основные группы БАСв ГомЛРС и НГМ выделяли и анализировали качественными реакциями согласнофармакопейным и общепринятым методикам [51, 68, 70, 77].Для проведения ТСХ-анализа для всех групп БАС в качестве неподвижнойфазы использовали пластинки «Сорбфил» ПТСХ-АФ-А (УФ) 10×15.

С цельюприготовления хроматографических систем использовались растворители марок«ч.» и «х. ч.». Состав подвижных фаз и способы детектирования приводятся длякаждой группы БАС в соответствующем разделе работы. В ходе проведения ТСХанализа в работе нашли применение, как методики Государственной фармакопеи,так и методы, доступные в научной литературе [46, 51, 99, 109]Определение влажности ГомЛРС проводили согласно методике ГФ XIIIизд., в. 2, с. 413 «Определение влажности лекарственного растительного сырья илекарственных растительных препаратов (ОФС.1.5.3.0007.15) [51].Определение содержания примесей в ГомЛРС проводили в соответствии сметодикой ГФ XIII изд., в.

2, с. 401 «Определение подлинности, измельчённости исодержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственныхрастительных препаратах» (ОФС.1.5.3.0004.15) [51].Плотность НГМ определяли согласно методике ГФ XIII изд., в. 1, с.577.«Плотность» (ОФС.1.2.1.0014.15, метод 1) [51].СухойостатокНГМдвухвидовподснежниковопределялипофармакопейной методике, которая изложена в ГФ XIII изд., в. 2, с.124 ОФС«Настойки» (ОФС.1.4.1.0019.15) [51].Вспомогательное оборудование, использованное в работе: Весы аналитические AND GH-120 (120 г/ 10 мг), I специальный класс точности(A&D Co. LTD, Япония); Весы аналитические AND DX-3000WP (3200г / 0,01г), II класс точности (A&DCo.

LTD, Япония); УЗ – ванна Bandelin Sonorex RK 31, 0,9 л, 35 кГц (BANDELIN Electronic GmbH,Германия); рН-метр Mettler Toledo MP 220 (Mettler Toledo GmbH, Швейцария);51 центрифужный вакуумный испаритель Eppendorf Concentrator plus (EppendorfAG, Германия); Шейкер Biosan OS-10 с рабочим диапазоном оборотов 50-350 об./мин итаймером от 1 мин. до 96 ч. (Biosan, Латвия); Встряхиватель типа Vortex (IKA-Werke GmbH & Co.

KG, Германия); Аппарат для получения деионизированной воды «Milli-Q»; Центрифуга для микропробирок Eppendorf 5424 (Eppendorf AG, Германия); Дистиллятор ДЭ-10; Баня водяная лабораторная с электрическим подогревом; Дозаторы 1-канальные переменного объема – 20-200 мкл, 100-1000 мкл, 5005000 мкл (Eppendorf AG, Германия).2.2.1.Определение амариллисовых алкалоидовАА определяли качественными реакциями и методом ТСХ. Переченьобщеалкалоидных реактивов, с которыми проводились качественные реакции,представлен в 4.1.1.; тип НФ, состав ПФ и методы детектирования - в 4.1.2.АнализААметодомГХ-МС.ХроматографическоеразделениеААпроводили с использованием системы Agilent 7000 Series Triple Quadrupole GCMS System, оснащенной газовым хроматографом Agilent 7890A Series (AgilentTechnologies, США) под управлением ПО Agilent Technologies MassHunterWorkstation Software Qualitative Analysis ver. B.06.00 Build 6.0.633.0. Колонка HP-5МС (30 м × 250 мкм × 0,25 мкм).Пробоподготовка ГомЛРС.

Навеску массой 5,0 г ГомЛРС подснежника,растёртого в ступке до кашицеобразного состояния, экстрагировали 3 разаметанолом (10 мл) в ультразвуковой ванне при комнатной температуре (25 °С) втечение 40 мин. Затем растворитель упаривали досуха на вакуумном ротационномиспарителе, полученные сухие остатки растворяли в 15 мл 5%-ной солянойкислоты, а затем сопутствующие липофильные соединения удаляли с диэтиловымэфиром (3 × 15 мл). Водную фазу подщелачивали путем добавления 10% растворааммиака до рН 9, затем алкалоиды экстрагировали хлороформом (3 × 15 мл).52Хлороформные экстракты объединяли, добавляли 10 г безводного сульфатанатрия, перемешивали и фильтровали через складчатый бумажный фильтр.Органический растворитель удаляли на вакуумном ротационном испарителе.Полученный алкалоидный экстракт растворяли в 1 мл метанола и подвергали ГХМС анализу.Пробоподготовка НГМ.