Диссертация (Морфофункциональные изменения в стенках желудка при острой тонкокишечной непроходимости (экспериментальное исследование)), страница 8

Длясовременного этапа исследований характерна направленность на изучениепатогенетической роли свойственных для многих патологических состоянийнарушений микроциркуляции и метаболизма. Вместе с тем, остаетсянерешеннымособенностеймножествоважныхформированияивопросов,клиническихкасающихся,проявленийвчастности,острыхязвпищеварительного тракта при многих патологических процессах. Так, несмотряна многочисленные свидетельства о высокой частоте острых изъязвленийжелудка при перитоните, исследований, содержащих комплексную оценку43микроциркуляторных и метаболических расстройств в слизистой оболочкежелудка при ОТКН, осложненной перитонитом, мы не встретили. В настоящеевремя отсутствует удобная для клинического применения методика оценкикровообращения в слизистой оболочке желудка в динамике развития этогозаболевания.

К спорным вопросам относятся данные об особенностяхрегионарного кровотока в желудке, могущие быть полезными в обоснованииконсервативной терапии и выборе метода хирургического лечения острыхязв[38].Неудовлетворительноразработаныметоды,направленныенапрофилактику острых язв желудочно-кишечного тракта.

В связи с этим требуетизучениявозможностькоррекциимикроциркуляторныхнарушенийинарушений энергетического метаболизма для обеспечения патогенетическиобоснованной терапии больных с ОТКН как в предоперационном периоде, таки после устранения непроходимости.Для получения полных и объективных сведений, характеризующихсостояние сосудистых и тканевых структур желудка при ОТКН необходимыспециальные комплексные экспериментально-морфологические исследования,что и послужило основанием для проведения нашей научной работы.44ГЛАВА 2.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ2.1.Объект исследованияИзучить морфофункциональные изменения в стенках желудка при остройтонкокишечнойнепроходимостинаклиническомматериале,выполняябиопсию в динамике развития заболевания, не представляется возможным,поэтому основой нашей работы стало экспериментальное моделированиеразличных видов острой тонкокишечной непроходимости.Объектом исследования нашей работы служили собаки.

Выбор их в качествеэкспериментальных животных обусловлен тем, что строение и функциипищеварительного тракта, основные источники кровообращения и пути оттокакрови, строение артериального и венозного русла, а, следовательно, игемомикроциркуляторного русла органов желудочно-кишечного тракта усобаки и человека сходны [2,32].

Достаточно высокое положение вфилогенетическом ряду собаки и человека обуславливает однотипностьпротекания реакций.Крометого,большинствопредшествующихработпоизучениюколлатерального и внутриорганного кровообращения, используемых длясравнения полученных результатов, также проведено на собаках.Исследование выполнено на 33 взрослых беспородных собаках обоего полавесом 17-20 кг.

Все научные исследования проведены в соответствии сруководящими документами, такими как«Руководство по уходу ииспользованиюНациональноголабораторныхживотныхинститутаздравоохранения (National Institute of Health — NIH, Бетесда, США)» и«Правила проведения работ с экспериментальными животными». На 2интактных собаках, служивших первым контролем, выполнено изучениеморфологии стенки тонкой кишки и желудка в норме. У животных второйгруппы(12животных)выполненомоделированиестрангуляционной45тонкокишечной непроходимости на срок наблюдения 3, 6, 12 и 24 часа.

У 12животных третьей группы выполнено моделирование низкой обтурационнойтонкокишечной непроходимостина срок наблюдения 1, 2, 3и 6 суток.Четвертую, контрольную группу составили 7 животных, у которых быловыполнено изучение морфологии стенки тонкой кишки и желудка послелапаротомии без вмешательства на сосудах и органах брюшной полости через3, 6, 12 и 24 часа, а также через 2, 3 и 6 суток.Распределение животных по сериям экспериментов и срокам наблюденияпредставлено в таблице 2.1.Выбор сроков наблюдения основывается на особенностях клиническихпроявленийОТКН.Манифестацияклиническихсимптомовостройстрангуляционной тонкокишечной непроходимости происходит практическисразу же с момента формирования странгуляции, т.к.

в патологический процессвовлекается брыжейка тонкой кишки, которая содержит сосуды и большоеколичество нервных окончаний.Обтурация просвета тонкой кишки не происходит мгновенно: некотороевремя после уменьшения диаметра просвета тонкой кишки пассаж кишечногосодержимого по кишке возможен (в клинической практике такое состояниеназывают «частичной тонкокишечной непроходимостью»), брыжейка приобтурационной тонкокишечной непроходимости в патологический процесс невовлекается.

Когда уменьшение просвета кишки достигает определенногокритического уровня, происходит резкий спазм ее стенок с последующимпроявлением клинических симптомов острой кишечной непроходимости.46Таблица 2.1Распределение животных по сериям экспериментов.Группа1234Характер экспериментаКол-воживотных№ /№ животныхПродолжительностьэкспериментаИзучение морфологии стенкижелудка (норма)21-2Изучение морфологии стенкижелудка после моделированиястрангуляционнойтонкокишечной непроходимости33333-46-89-1112-143ч6ч12ч24чИзучение морфологии стенкижелудка после моделированиянизкойобтурационнойтонкокишечной непроходимости333315-1718-2021-2324-261 сут2 сут3 сут6 сутКонтроль.Изучение морфологии стенкижелудка при лапаротомии безвмешательства на сосудах иорганах брюшной полости.111111133272829303132333ч6ч12ч24ч2 сут3 сут6 сутВсего472.2.Методы исследования.Методы исследования включали в себя:1 - методики постановки экспериментов - моделирование разных видовкишечной непроходимости.2 – методы исследования морфологии стенок желудка.Методы исследования морфологии стенок желудка в условиях нормы и послемоделирования разных видов тонкокишечной непроходимости применялисьодни и те же.Применяли окраску гематоксилином и эозином, пикрофуксином по ВанГизон в сочетании с окраской по Маллори.Выборприменяемыхнамигистохимическихметодикопределялсянеобходимостью изучения обменных процессов в клетках эпителия и железслизистой оболочки желудка.

Был использован метод выявления суммарныхнуклеиновых кислот по Эйнарсону.Последнюю группу методов составил статистический анализ полученныхданных.2.2.1. Методика постановки экспериментов. Моделирование разных видовтонкокишечной непроходимости.Все операции на животных выполнены под наркозом с соблюдениемправил асептики и антисептики.

Для обеспечения наркоза собакам вводили2,5% раствор тиопентала натрия из расчета 0,4-0,5 мл на 1 кг массы телаживотного. В ходе эксперимента выполнялось моделирование различных видовострой тонкокишечной непроходимости (рис.2.1)48Рис. 2.1. Схема моделирования различных видов кишечной непроходимостиI Странгуляционная тонкокишечная непроходимостьII Низкая обтурационная тонкокишечная непроходимость1 Верхняя брыжеечная артерия2 Верхняя брыжеечная вена3 Начальный отдел тощей кишки4 Подвздошная кишка5.Слепая кишкаПри воспроизведении странгуляционной тонкокишечной непроходимостипослеобработкикожныхпокрововсрединнымразрезомвскрывалибрюшинную полость и накладывали лигатуру капроновой нитью № 5 на петлютонкой кишки длиной 15 см на расстоянии 80 см от илеоцекальногоилеоцекального перехода(рис.

2.2, 2.32.3).).49Рис. 2.2. Модель острой странгуляционной тонкокишечной непроходимости(схема).Рис. 2.3. Модель острой странгуляционной тонкокишечной непроходимости(интраоперационнаятраоперационная макроскопическая картина).50Низкую обтурационную тонкокишечную непроходимость (рис. 2.42.4,2.5)моделировали наложением капроновой лигатуры на тонкую кишку на 80 смпроксимальнее илеоцекального угла.Рис.2.4.Модельостройнизкойобтурациобтурационнойоннойтонкокишечнойнепроходимости (схема).Продолжительность экспериментов составляла 3, 6, 12 и 24 часа примоделировании странгуляционной острой тонкокишечной непроходимости 1, 2,3 и 6 суток при моделировании низкой обтурационной острой тонкокишечнойнепроходимости.епроходимости.51Рис.2.5.Модельостройнизкойобтурационнойтонкокишечнойнепроходимости (интраоперационная макроскопическая картина).2.2.2.

Методы исследования морфологии стенок желудка.2.2.2.1. Гистологические методики исследованияДля изучения морфологии стенок желудка в норме, при моделированииОТКН и в контрольной группе сразу же после выведения животного изэксперимента циркулярно иссекали участок стенки из антрального отдела, телаи дна желудка размером 1,0 х 1,0 см. Кусочки фиксировали в 12% нейтральномформалине или смеси Карнуа и, после соответствующей проводки, заливали впарафин. Из материала, залитого в парафин, готовили срезы толщиной 7-10мкм, которые окрашивали гематоксилином и эозином, пикрофуксином по ВанГизон в сочетании с окраской по Маллори.522.2.2.2.

МорфометрияДля морфометрического исследования сосудов гемомикроциркуляторногорусла подслизистой основы и слизистой оболочки желудка применялианализаторизображениясиспользованиемпрограммыLeicaQWin,включающий бинокулярный микроскоп DMLB с видеоприставкой Leica(производствоГермании).Измеряливнутреннийдиаметрсосудовгемомикроциркуляторного русла в подслизистой основе тонкой кишки.